Bez tabletiek a potlačenia imunity: prvá transplantácia β-buniek na svete pre diabetikov

V unikátnom prípade 42-ročný muž s 37-ročnou anamnézou ťažkého diabetu 1. typu dostal transplantáciu geneticky modifikovaných ostrovčekových β-buniek od darcu bez toho, aby mu bola podaná jediná kvapka imunosupresív. Výskumníci zo Švédska a Nórska použili CRISPR-Cas12b na odstránenie kľúčových markerov HLA I a II a potom zvýšili expresiu „cudzieho“ CD47, aby sa bunky „spojili“ s tkanivami príjemcu a zabránili adaptívnemu aj vrodenému odmietnutiu. Štúdia je publikovaná v NEJM.

Ako to bolo usporiadané?

1. Izolácia a úprava

• Darcovské ostrovčekové bunky boli „rozdrvené“ na jednotlivé β-bunky.
• CRISPR–Cas12b „vyradil“ gény B2M a CIITA (základ HLA-I a HLA-II).
• Lentivírusová transdukcia vložila gén CD47 do buniek, čím blokovala útoky makrofágov a NK buniek.
• Konečný produkt UP421 obsahoval ~86 % HLA I negatívnych, 100 % HLA II negatívnych a takmer 50 % buniek so zvýšenou expresiou CD47.

2. Transplantácia

• Do svalu predlaktia bolo intramuskulárne injekčne podaných 79,6 milióna upravených β-buniek – 17 malých „guľôčkových“ injekcií pozdĺž vlákien.
• Pacient nedostával steroidy, anti-CD3 ani cyklosporín.

3. Kontrola imunity

• Konvenčné (neupravené) ostrovčekové bunky a dvojité knockouty vyvolali silné T-bunkové a vrodené reakcie: vrchol aktivity v 7. – 21. deň, jasný prechod IgM → IgG a cytotoxicitu v kokteile PBMC + sérum.
• Hypoimúnne (HIP) bunky prežili 12 týždňov bez známok odmietnutia, protilátok alebo cytotoxicity.

4. Obnovenie funkcie pankreasu

• V 0. týždni C-peptid chýbal, ale 4 – 12 týždňov po transplantácii sa u pacienta vyvinulo zvýšenie C-peptidu závislé od glukózy v dôsledku príjmu potravy.
• Zároveň sa EHD znížila o 42 % a denná dávka exogénneho inzulínu bola upravená smerom nahor, aby sa predišlo „hyperspikom“ a ochránil nový transplantát.
• PET-MRI potvrdila prežitie a vaskularizáciu „ostrovčekov“ vo svale.

Bezpečnosť a vedľajšie účinky

Počas 12 týždňov boli zaznamenané iba 4 nežiaduce udalosti (mierna tromboflebitída a parestézia ruky), z ktorých žiadna nebola závažná ani nesúvisela s geneticky modifikovanými bunkami.

Význam štúdie

• Prvý človek na svete, ktorý dostal hypoimunitnú alogénnu transplantáciu ostrovčekov bez imunosupresie.
• Ukázalo sa, že nadmerná expresia CRISPR–Cas12b + CD47 chráni pred T bunkami, NK bunkami, makrofágmi a protilátkami.
• Klinická uskutočniteľnosť bola potvrdená: stabilná a fyziologická sekrécia inzulínu z transplantovaných buniek.

„Toto je dôkaz, že geneticky modifikované „neviditeľné“ β-bunky môžu pacientov zachrániť pred celoživotným užívaním liekov a imunosupresív,“ komentuje Dr. Johan Schön.

Ďalšie kroky

Zvýšením dávky buniek na úroveň, ktorá poskytuje úplnú nezávislosť od inzulínu a predĺžením pozorovania by séria takýchto transplantácií mohla v budúcnosti ponúknuť reálnu šancu na „vyliečenie“ pre milióny ľudí s cukrovkou 1. typu.