Geneticky modifikované imunitné bunky vykazujú potenciál zabrániť odmietnutiu orgánov

V časopise Frontiers in Immunology bola prezentovaná bunková terapia, ktorá dokáže „odzbrojiť“ vysoko imunosenzibilizovaných pacientov pred transplantáciou orgánov. Vedci vytvorili regulačné T bunky (Treg) s chimérickým receptorom protilátok proti HLA (CHAR) – v podstate s „návnadou“ proteínu HLA-A2, ktorý zapne Treg pri kontakte s B bunkami produkujúcimi protilátky proti HLA-A2. In vitro tieto CHAR-Treg rozpoznali a potlačili produkciu IgG s vysokou afinitou u presenzibilizovaných pacientov, pričom si zachovali „identitu“ Treg (FOXP3/HELIOS) a nezabili cieľové bunky. To poskytuje šancu na cielenú desenzibilizáciu bez úplnej imunosupresie.

Pozadie štúdie

V transplantológii je hlavným „konfliktom záujmov“ protilátky proti HLA antigénom darcu. Po transfúziách, tehotenstvách alebo predchádzajúcich transplantáciách sa u príjemcu často vyvinie senzibilizácia: anti-HLA IgG a pamäťové B-bunky, pripravené na rýchle „rozvinutie“, už cirkulujú v krvi. Takíto pacienti sú menej kompatibilní, dlhšie čakajú na orgán a majú vyššie riziko akútnej a chronickej rejekcie protilátok. Štandardné desenzibilizačné protokoly (plazmaferéza/imunoadsorpcia, vysoké dávky IVIG, rituximab, inhibítory proteazómu, imlifidáza) pôsobia široko a zhruba: znižujú celkový pool protilátok alebo buniek, ale necielia na špecifické „nebezpečné“ klony a sú sprevádzané toxicitou a infekčnými rizikami.

Imunitný systém má svoju vlastnú „brzdu“ – regulačné T bunky (Treg), ktoré udržiavajú toleranciu voči „cudzím“. V posledných rokoch sa terapia Treg stala skutočnou klinickou stratégiou, ale v „štandardnej“ verzii je neselektívna: injekčne podané bunky nerozlišujú, proti ktorému antigénu sa reakcia vyvíja. Preto sa výskumníci snažia „priskrutkovať k cieľu“ – vybaviť Treg umelými receptormi, ktoré sa aktivujú iba vtedy, keď narazia na správny signál. Takto vznikla myšlienka chimérických receptorov (podobných CAR technológiám), ale zostavených nie na báze anti-CD19, ale z domén samotných HLA molekúl, takže Treg sa aktivujú v blízkosti B buniek produkujúcich zodpovedajúce anti-HLA protilátky.

Kritické požiadavky na takéto „cielené“ Treg bunky sú dvojaké. Po prvé, musia zostať pravými Treg bunkami (udržiavať si FOXP3/HELIOS a supresorové programy) bez toho, aby narušili efektorový fenotyp na pozadí silnej stimulácie. Po druhé, ich účinok musí byť cielený: presne potláčať alospecifické B-klony a plazmoblasty, minimálne zasahovať do zvyšku imunitného systému, aby sa nezvýšili náklady na liečbu infekcií a riziko nádorov. Ak sa tento problém vyrieši, objaví sa metóda mäkkej, presnej desenzibilizácie pred transplantáciou a znižovania potreby celkovej imunosupresie po nej.

Napokon praktický kontext: u niektorých pacientov je senzibilizácia zameraná na jednu alebo dve „problematické“ alely (napr. HLA-A2) a práve tie blokujú prístup k orgánom. Bunková terapia zameraná na takéto „úzke miesta“ môže rozšíriť skupinu kompatibilných darcov, urýchliť transplantáciu a znížiť výskyt odmietnutia protilátok – najmä u detí a u príjemcov s dlhodobým „historickým“ kontaktom s cudzím HLA (viacnásobné transfúzie, opakované transplantácie). Preto je dôkaz princípu pre anti-HLA-indukované Treg dôležitým krokom k personalizovanej imunomodulácii v transplantológii.

Ako je štruktúrovaná nová bunka

• Konštrukcia: extracelulárna doména HLA-A2 + pánt CD8 + transmembránový CD28 + signálny "tandem" CD28-CD3ζ. Tento receptor sa aktivuje, keď sa na povrchu B-bunky nachádza protilátka proti HLA-A2.
• Špecificita: CHAR-Treg „štartujú“ špecificky na anti-A2 B-bunkách bez ovplyvnenia iných typov imunity.
• Profil Bezpečného Tregu: po aktivácii nestrácajú značky čiar (FOXP3, HELIOS), t. j. zostávajú „brzdené“ a nepremenia sa na „plyn“.
• Necytotoxické: Na rozdiel od modifikovaných konvenčných CD4 T buniek s rovnakým receptorom, CHAR-Treg nezabíjajú bunky anti-A2, ale potláčajú ich funkciu.

Čo presne bolo skontrolované?

• Ex vivo model pacienta: Mononukleárne bunky krvi pacientov presenzibilizovaných HLA-A2 boli primárne stimulované stimulmi (HLA-A2-K562), potom boli pridané CHAR-Treg a bolo merané zloženie IgG (ELISA) a B-buniek (spektrálna prietoková cytometria, UMAP).
• Výsledok: po 48 hodinách a 5 dňoch bola produkcia IgG významne znížená (u 2 z 3 vzoriek pacientov), podiel B buniek sa vo všeobecnosti znížil bez zjavnej „voľby“ medzi podtypmi (naivné, pamäťové, marginálna zóna, plazmoblasty).
• Interpretácia autorov: Citlivosť testu sa dá zvýšiť pomocou anti-A2-špecifického ELISA testu a samostatným stanovením tried IgG; je potrebné testovanie u väčšieho počtu pacientov a na iné HLA alely (napr. A24).

Prečo je to dôležité pre transplantáciu?

Dnes už 20 % primárnych a až 75 % opakovaných príjemcov má protilátky proti HLA, čo dramaticky zužuje okruh vhodných darcov a núti k vysokým dávkam imunosupresie. Neselektívne desenzibilizačné protokoly (plazmaferéza, „nulovanie“ B-buniek) nefungujú hladko a sú plné komplikácií – od infekcií až po nefro- a neurotoxicitu (najmä u detí). Cielené Treg, pôsobiace iba proti „nebezpečným“ B-klonom, teoreticky umožňujú rozšírený prístup k orgánom a zníženie celkovej toxicity po transplantácii.

• Kľúčové potenciálne výhody:
  • Pred transplantáciou: „odstrániť“ senzibilizáciu na špecifický HLA a porovnať pacienta s nesenzibilizovaným pacientom.
  • Po transplantácii: znížiť dávky základnej imunosupresie a riziko chronickej rejekcie protilátok.
  • Okrem transplantácie: Tento prístup má potenciálne uplatnenie pri HCV a dokonca aj v prípadoch potratu, keď si matka vyvinie protilátky proti otcovmu HLA.

Čo hovoria samotní autori a tlačové správy

Tím MUSC (USA) nazýva túto prácu „prvým krokom k cielenej imunosupresii: potlačenie presne tých B buniek, ktoré ohrozujú transplantáciu, pričom zvyšok imunitného systému zostane na pokoji.“ Správa zdôrazňuje potenciál znížiť vedľajšie účinky a „vyrovnať podmienky“ pre tých, ktorým je v súčasnosti transplantácia takmer nemožná kvôli silnej senzibilizácii.

Kde sú hranice a čo bude ďalej?

• Ide o in vitro/ex vivo dôkaz princípu na malom počte vzoriek pacientov: je priskoro hovoriť o klinických účinkoch. Sú potrebné prvé štúdie na ľuďoch, validácia rôznych HLA a hĺbková mechanika (sekretované faktory, kontaktne závislá supresia, transkriptomika CHAR-Treg).
• Je dôležité vypracovať špecifickosť a bezpečnosť: uistiť sa, že potlačenie je prísne zamerané na antigén a nenarúša iné vetvy imunity.

Na čo si treba pamätať

• Treg bunky s „návnadou“ HLA-A2 rozpoznávajú a potláčajú B bunky, ktoré sú pre transplantát nebezpečné.
• In vitro znižujú produkciu IgG u senzibilizovaných pacientov a udržiavajú stabilitu Treg fenotypu bez cytotoxicity.
• Ide o cielenú alternatívu k neselektívnej desenzibilizácii s potenciálom znížiť dávky imunosupresie a rozšíriť prístup k transplantáciám. Ďalším krokom sú klinické skúšky.

Zdroj: Valentín-Quiroga J. a kol. Chimérické ľudské regulačné T bunky s upraveným anti-HLA receptorom potláčajú aloantigén-špecifické B bunky u predsenzibilizovaných príjemcov transplantátu. Frontiers in Immunology, publikované 15. augusta 2025. DOI: 10.3389/fimmu.2025.1601385