Dermálny ekvivalent. História a výsledky klinických štúdií

Koncom 80. Rokov sa na Stanfordskej univerzite vyvinula tekutá forma kolagénu hovädzieho dobytka, ktorá sa transformovala na telesnú teplotu na mäkký elastický substrát. Liek bol registrovaný a schválený na použitie vo viacerých európskych krajinách ako implantovateľná droga zvaná Zyderm Collagen Implantant. Táto droga bola prvým implantátom. Neskôr sa objavili ďalšie činidlá na obrysovú plastickú kompozíciu, ako je restylan, perén, farmakrylový gél, artekol, biopolymérny gél a iné. Tieto lieky sa začali používať nielen na modelovanie obrysov a korekciu zmien súvisiacich s vekom v koži, ale aj na liečbu alebo skôr na vyrovnanie úľavu od jaziev. Všetci boli vstreknutí do spodnej časti bachoru.

Hľadanie nových spôsobov liečby hypotrofických jaziev nás viedla k myšlienke využitie na tento účel umelo vytvorený kože náprotivok - "dermálnej ekvivalent" (DE), ktorý tiež použiť tekuté kolagénu. Varianty umelých kožných náhrad bolo veľa, ale predstava, že z celkového počtu - vytvoriť konštrukčné prvky dermis podobne ako kožného tkaniva, ktoré by nemali byť odmietnuté v prípade transplantácií a mal dobrý substrát pre klíčenie vlastných komponentov dermis a epidermis. Je známe, že základné štruktúrne zložky dermy sú bunkové, vláknité prvky a intersticiálna látka. Vláknité prvky sú väčšinou kolagénu a elastínu vlákna, intersticiálna látka - glykoproteíny, proteoglykánmi a glykosaminoglykánová. Hlavné funkčné prvok dermis bunky - fibroblastov, fibroblastov bunková populácia, ktorá je zdrojom v podstate všetky z konštrukčných prvkov dermis. Preto pri vytváraní "náhradu kože" väčšina vedcov použiť kolagén substrát, zmiešaný s fibroblasty a glykosaminoglykánová. Vyššie v tej či onej forme vrstvy keratinocytov sa používa na vytvorenie polnosloynoy kože a rýchlejšie obnovenie životaschopnosti transplantovaného ekvivalentu kože, čo uľahčuje početnými keratinocyty vylučovanými rastové faktory. Jeden z prvých variantov "živého ekvivalentu kože" navrhol v roku 1983 E.Bell a spoluautori. Kožné fibroblasty boli zmiešané s kolagénu, plazmy a rastových médií, čo vedie k tvorbe gélu, na ktorého povrchu sa pestuje keratinocyty. Všetky kultivované po dobu 1 -2 týždňov vilro, načo dermálnej ekvivalent uvažovaného zrelé a reprezentovanej vo forme životaschopných tkaniva priesvitnej elastickej hmoty. Autori navrhli preniesť celú vrstvu štruktúry pokožky na povrchy rany pacientov s popáleninami. Ako základ pre dermálnej ekvivalent, niektorí autori používajú kolagénovú špongiou alebo kolagénové matrice, sa vzťahuje proteoglykánmi a naplnený fibroblasty, ktoré sa pestujú na vrchole ktorej autológnych keratinocytov. V dôsledku toho bol vytvorený takzvaný trojrozmerný model kože. Pre kultiváciu keratinocytov pre následný prenos do povrchu rany, niektorí autori sa tiež používajú ako umelom substráte matrice kolagénu a glykozaminoglykánov chitosanu mŕtvoly kože, bravčové kože. 7-14 dní po začatí kultivácie, polnosloyny štepu obsahujúci dermis a epidermis, boli transplantované do rany pacientov alebo zvierat.

Umelá náhrada kože sa použila nielen na obnovu kože spáleného, ale aj na testovanie liekov na cytotoxicitu, na štúdium rastových faktorov in vitro.

Nedostatočná podľa nášho hľadiska prevádzkovej efektivita dermabrasion hlbokých hypotrofických jaziev v kombinácii s prenosom IPC dal príležitosť pokúsiť zladiť topografiu pokožky zaočkováním vybrania hypotrofických jazva analógového dermálnej ekvivalent. Substrát pre vytvorenie dermalngogo ekvivalent stal kvapalina kolagén získaný laboratória, kde boli zavedené suspenzie fibroblastov. Dermálnej ekvivalent, rovnako ako IPC, vytvorený špecializované laboratóriá certifikované pre túto činnosť a v deň a hodinu prevádzky sa dodáva v sklenenej fľaštičke v nádobe s ľadom na kliniku.

Prevádzkové brúsne jazvy uskutočňované obvyklým spôsobom po antiseptické ošetrenie pokožky, a lokálnej anestézii 2% lidokaín alebo Novocaine alebo artikaínu. Mletím bol povrch múky vyrovnaný a súčasne boli vytvorené podmienky pre engrafovanie kultivovaných buniek alebo bunkových kompozícií. Po tom, kvapalina kolagén gél schladené vrúbľovať fibroblasty sa aplikuje sterilnou špachtľou na leštenom povrchu hypotrofických jaziev (jazvy vo vybraní), kde je pod vplyvom polymerizačnej teploty tela.

Výsledkom je, že po 5 až 10 minútach z kolagénu s fibroblastmi v kvapalnom stave dochádza k polymerizácii do hustého gélového stavu. Po zahustení DE sa bandáž so suspenziou alebo IPC na substráte aplikovala zhora.

Viacvrstvový sterilný obväz bol fixovaný ako pri transplantácii IPC. V závislosti od povrchu jazvy, obalu rany, na ktorom boli keratinocyty umiestnené a druhu mletia, sa obväz odtrhol do 7 až 12 dní.

Spôsoby kombinácia liečebných hypotrofických jaziev základe prevádzkových dermabrasion, nasledovaný prevodom do vybrania bachora "dermálnej ekvivalent" a keratinocyty v viacvrstvového zásobníku pestovaných na špeciálnych vinutých krytín, alebo ako suspenzia, môže podstatne lepšie kozmeticky prijateľné výsledky s poklesom alebo úplného vymiznutia (dosiahnutie -) tkaniny. Dermálny ekvivalent tvorí vlastné tkanivo (dermis), tkanivo jazvy zostáva pod novo vytvoreným tkanivom. IPC vytvára normálnu hrúbku a funkčnú aktivitu epidermis, v dôsledku čoho má celkový vzhľad jazvy za niekoľko mesiacov tendenciu k významnému zlepšeniu.

Takáto taktika liečby hypotrofických jaziev v súčasnosti môže byť nazvaná ako optimálna pri riešení tohto problému. Avšak verzia DE, ktorú sme použili vo forme kolagénového gélu s fibroblastmi inokulovanými do nej, nie je v práci veľmi vhodná. DE na prácu s hypotrofickými jazvami by mala byť na začiatku silnejšia, aby mohla byť umiestnená v prehĺbení jazvy, rozložiť ju. Po ktorom bola horná rana navinutá keratinocytmi. Teda možno povedať, že tento smer v práci s hypotrofickými jazvami je len plánovaný, ale prognózy jeho ďalšieho vývoja a štúdie sú veľmi optimistické.

Zložitosť a vysoké náklady na získanie viacvrstvových vrstiev keratinocytov ako terapeutického materiálu stimulovali potrebu hľadať iné varianty bunkových kompozícií. Veľký záujem je výskumníci kultivácia fibroblastov, ktoré pri presádzaní na povrchu rany majú za následok, v mnohých ohľadoch podobné výsledky transplantácie keratinocytov, ale je oveľa viac jednoduchý a lacný bunkový materiál. V našich štúdiách sme vykonali niekoľko pacientov s hypotropnými jazvami pomocou mezoterapie pomocou suspenzie fibroblastov na zjazvenie.

Suspenzia fibroblastov v rastovom médiu s 1,5 až 2 miliónmi buniek na ml. Bola podávaná pod jizvy meoterapeutickými technikami (mikropapulmonárna, infiltračná). Počet liečebných relácií od 4 do 10 v závislosti od premlčacej doby brucha, veku pacienta a hĺbky defektu. Interval medzi reláciami je 7-10 dní. Spravidla bolo zavedenie suspenzie autológnych a alogénnych fibroblastov sprevádzané miernym, rýchlo sa rozvíjajúcim vaskulárnym pôsobením.

Výsledkom je, že klinické štúdie ukázali, že pod vplyvom transplantovaného IPC znižuje trvania zápalovej odpovede v koži a jazvy po dermabrasion prevádzkovej a urýchlenie epitelizácie ranných plôch na priemere 3-4 dni.

Pri práci s normotropnými a hypertrofickými jazvami je najdôležitejšie zrýchlenie hojenia pooperačných erózií, pretože tu spočíva možnosť dosiahnutia optimálneho terapeutického účinku.

Transplantácia dermálneho ekvivalentu vyústila do plnenia (-) tkaniva hypotrofických jaziev, zarovnania ich reliéfu, vyhladenia s okolitou kožou, čo spôsobilo, že oblasť jaziev bola oveľa menšia.

Zavedenie suspenzie fibroblastov do hypotrofných jaziev tiež viedlo k vyrovnaniu reliéfu kože a zníženiu oblasti jaziev.

Vo všetkých prípadoch transplantácie bunkového materiálu bol zaznamenaný účinok následného účinku, kedy po niekoľko mesiacov došlo k zlepšeniu estetického vzhľadu jaziev, ktoré mali tendenciu sa stať štruktúrou podobnou dermoidu.

Všetky účinky, ktoré pozorujeme, súvisia s realizáciou biostimulačného potenciálu transplantovaných buniek. Prinajmenšou úlohou, zdá sa nám, je, že počet bunkových vrstiev v transplantáciách je zvyčajne o 10-30% vyšší. Z toho vyplýva, že celkový mobilný potenciál na jednotku plochy je už o 10-30% vyšší ako normálne. Navyše najlepšie výsledky pri transplantácii keratinocytov a fibroblastov boli získané transplantáciou bunkového materiálu z mladých zdravých ľudí. Táto skutočnosť, mimochodom, hovorí v prospech použitia alogénnej kultúry získanej od mladých a zdravých darcov. Bioenergetický a informačný potenciál takejto kultúry sa prenáša do vlastných buniek, niekedy docela starších príjemcov, vďaka čomu sa zlepšuje "kvalita" vlastných tkanív a buniek.

Aplikácia kultúry keratinocytov a fibroblastov teda umožňuje:

• Urýchlite epitelizáciu jaziev po dermabrázii.
• Znížte výskyt jaziev nielen kvôli vyrovnaniu ich povrchu s povrchom okolitej kože, ale aj kvôli vytvoreniu plnej epidermy nad nimi.
• Na zlepšenie výsledkov operatívnej dermabrázie v dôsledku účinku cytokínov transplantovaných buniek na jazvu, ktorá má nakoniec tendenciu premeniť sa na štruktúru podobnú koži.
• Aby sa získali esteticky oveľa prijateľnejšie výsledky liečby pacientov s normotropnými, hypotrofnými, hypertrofickými, atrofickými jazvami a strijmi.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]