Používanie bunkových technológií na zlepšenie výskytu jaziev

Moderná veda je charakterizovaná rýchlym rozvojom mnohých súvisiacich disciplín, ktoré sú spojené pod spoločným názvom "biotechnológia". Tento vedný odbor, založené na najnovšie poznatky v oblasti biológie, cytológie, molekulárnej genetiky, genetické inžinierstvo, transplantantologii, si kladie za cieľ využiť obrovský potenciál rastlinných a živočíšnych bunkách - základná stavebná jednotku všetkých živých vecí. "Živá bunka je pripravená biotechnologické reaktora, v ktorom sú realizované nielen procesy, ktoré vedú k vzniku konečného produktu, ale aj celý rad ďalších systémov uľahčiť udržiavanie katalytickej aktivity na vysokej úrovni" - John Woodward, 1992. Predvolené veda bunky bol uvedený v 1665, keď anglický fyzik R. Hooke vytvoril prvý mikroskop a v zátke našiel bunky - cellulae ("bunky"). V roku 1829 M. Schleiden a T. Schwann zdôvodnili "bunkovú teóriu", ktorá dokázala, že všetky živé veci pozostávajú z buniek. R.Virkhov v roku 1858 dokázal, že v základoch všetkých chorôb je porušenie štruktúrnej organizácie a metabolizmu buniek. Stal sa zakladateľom "bunkovej patológie". Základný príspevok k vedeniu bunky vznikol v rokoch 1907-1911. R. Garrison a AA Maksimov, čo dokazuje možnosť kultivácie buniek mimo tela. Ich práca ukázala, že na kultiváciu buniek by mali byť živočíšne tkanivá a časti rastlín mechanicky oddelené od malých kúskov. Na izoláciu buniek sú tkanivá rezané ostrým nožom alebo mikrotómom v tenkých častiach, približne 0,5 až 1,0 mm. Fyzické rozdelenie buniek sa nazýva imobilizácia. Izolované bunky sa získavajú enzymatickou disperziou kúskov rastlín alebo tkanív. Po rozdrvení ostrými nožnicami sa kúsky ošetria trypsínom alebo kolagenázou, čím sa získa suspenzná suspenzia jednotlivých buniek alebo ich mikroagregátov v špeciálnom médiu. Alginátové gély (alginát vápenatý) sa široko používajú na imobilizáciu rastlinných buniek. Je dokázané, že imobilizované rastlinné a živočíšne bunky si zachovávajú schopnosť biosyntézy. Výrobky bunkovej biosyntézy sa hromadia v bunkách, ich expresia nastáva buď spontánne alebo pomocou špeciálnych látok, ktoré podporujú zvýšenú priepustnosť bunkových membrán.

Kultivácia živočíšne bunky - oveľa zložitejší proces ako kultiváciu rastlinných buniek, čo vyžaduje špeciálne vybavenie moderných, špičkových technológií, dostupnosť rôznych médií, rastovými faktormi, ktoré sú určené pre zachovanie životaschopnosti buniek a udržiavať je v stave vysokej funkčnej aktivity. Bolo zistené, že väčšina buniek pevných tkanív, ako sú obličky, pečeň, kože a sú závislé na povrchu, tak in vitro, môžu byť kultivované iba v podobe monovrstev alebo tenkých vrstiev, ktoré sú priamo spojené s povrchu substrátu. Životnosť, proliferácia a funkčná stabilita buniek získaných enzymatickým rozptýlením tkaniva závisí vo veľkej miere od substrátu, na ktorom sa pestujú. Je známe, že všetky bunky získané z tkanív stavovcov majú negatívny povrchový náboj, takže pozitívne nabité substráty sú vhodné na ich imobilizáciu. Izolované bunky získané priamo z celých tkanív sa môžu udržiavať v primárnej kultúre v imobilizovanom stave, pričom sa udržuje vysoká špecifickosť a citlivosť počas 10 až 14 dní. Imobilizované, povrchovo závislé bunky zohrávajú dnes dôležitú úlohu v biológii, najmä ich úloha je dôležitá pre klinické štúdie. Používajú sa na štúdium cyklov vývoja buniek, regulácie ich rastu a diferenciácie, funkčných a morfologických rozdielov medzi normálnymi a nádorovými bunkami. Imobilizované monovrstvy buniek sa používajú v biotestoch, na kvantitatívne stanovenie biologicky aktívnych látok, ako aj na štúdium účinkov rôznych liečiv a toxínov na ne. Veľký záujem o bunku ako zdravotnícku pomôcku dokazujú lekári všetkých špecialít už niekoľko desaťročí. V tomto smere sa bunkové technológie rýchlo rozvíjajú.

S nástupom tkanivovej a bunkovej terapie, meno slávneho ruského vedca V.P. Filatov, ktorý v roku 1913 bol položený základ pre učenie tkanivové terapie študuje rohovky zdravých darcov s pacientmi s šedým zákalom .. Pri prevádzke, transplantácia rohovky, zistil, že rohovky zachované v chlade po dobu 1-3 dní pri teplote -2 -4 ° C je lepšie ako čerstvé. Tak bolo zistené, bunky prideliť vlastnosť za nepriaznivých podmienok, niektoré látky, ktoré stimulujú životne dôležitých procesov v transplantovanej tkaniva a tkaniva v regeneračné príjemcu. Tkanivo a bunky oddelené od tela sú v stave skúseností, to znamená spomalený život. V nich sa zastaví krvný obeh a následne aj výživa. Tkanivové dýchanie je mimoriadne ťažké, inervácia a trofické sú rozrušené. Byť v novom kvalitatívnom stave prispôsobujúcom sa novým podmienkam existencie bunky produkujú špeciálne látky, ktoré majú liečivé vlastnosti. Tieto látky neproteínovej povahy boli označené VP Filatov biogénnym stimulantom. To V.V.Skorodinskoy nastaviť spoločne s materiálom zo zvierat a rastlín, môže byť voľne ● Vyrovnávacia autoklavované pri 120 ° C po dobu jednej hodiny po skladovaní za nepriaznivých podmienok, v čase, keď nielen nestratil aktivitu, ale naopak posilnený, vzhľadom k výťažku biologických stimulantov z konzervovaných tkanív. Okrem toho stratili antigénne vlastnosti, čo výrazne znížilo možnosť odmietnutia. Konzervované sterilný materiál vstrekovaný do tela implantáciou (nariedením) pod kožu alebo vo forme extraktov zo vstrekovania, čím sa získa príslušné výsledky. Bolo tiež zistené, že fetálny tkanivá obsahujú významne väčšie množstvo biologicky aktívnych látok, ako dospelé tkanivá, a niektoré faktory nájsť iba v embryách. Inokulované fetálny príjemcu tkaniva organizmu, ktorý nie je vnímaný ako cudzí neprítomnosti v zložení cytoplazmatických membránových proteínov zodpovedných za druhy, tkanivá, a individuálne osobitosti (proteíny hlavného histokompatibilního komplexu). V dôsledku očkovania vo fetálnych ľudských tkanív zvierat nespúšťa imunologické obranné mechanizmy a reakcie, a odmietnutie nekompatibility. VP Filatov v lekárskej praxi široko využíva ľudskú placentu a pokožku. Predmety liečba pozostávala z 30-45 vstrekovacích tkanivových extraktoch a 1-2 implantáciou autoklavované tkaniva.

Po začatí výskumu s ľudskými a zvieracími tkanivami a bunkami preniesol svoje zovšeobecnenia do rastlinného sveta. Produkujúce pokusy na živých častiach rastlín (aloe, skorocel, agáve, topy repy a ľubovníka bodkovaného, atď), stvoril nepriaznivým podmienkam umiestnením rez listy v temnom mieste, ako po celú dobu životnosti elektrárne potrebuje svetlo. Lima bahno a rašelina boli pridelené biogénne stimulátory, pretože nečistoty a trávnik s účasťou mikroflóry a mikrofauny.

Nové kolo vývoj tkanivové terapie získal na konci 70. Rokov, kedy nahromadené vedomosti a desaťročia skúseností umožnili úplne novú úroveň použiť živočíšne aj rastlinné tkanivá a bunky pre liečenie ľudí a predĺžiť jeho životnosť aktívne. Takže v niektorých miestnych klinikách a radom zahraničných žien vo fyziologickom menopauzy, menopauze alebo pozadia ooforektomie pre spomalenie procesu starnutia, rozvoj aterosklerózy, osteoporózy, dysfunkcia imunitného, endokrinného a nervového systému začali usporadúvať tkanivovej terapie fetálny tkaniva placenty, hypotalamu, pečeň, vaječníkov, týmusu a štítnej žľazy. V jednom z najprestížnejších Gerontius-kozmetické kliniky v západnej Európe na rovnaký účel po celé desaťročia s použitím výťažkami injekcie, odvodené z fetálnych tkanivách pohlavných žliaz oviec.

V našej krajine sa široko používa biostimulačná liečba. U pacientov s rôznymi chorobami až do nedávnej doby sa aktívne podávať injekcie placenty extrakty, aloe, kolanhoe, rozchodníky veľké (biosed) malých lží, peloidodistillyat, peloidin, torfot, gumizol pripravených Filatov konania. V súčasnosti je v lekárňach prakticky nemožné kúpiť tieto vysoko účinné a lacné domáce tkanivové prípravky živočíšneho, rastlinného a minerálneho pôvodu.

Podkladové získať rôzne výživové prípravky z tkanív a orgánov ľudského dovážaných, ako Rumalon (z tkaniva chrupavky a kostnej drene) aktovegin (z teľacej krvi) solkoseril (extraktu krvného dobytok) a domácich drog - sklený ( sklenej dobytok oko) kerakol (od rohovky hovädzieho dobytka), splenin (zo sleziny dobytka), epitalyamin (od epitalyamo-epifýzy oblasti) tiež spadajú Filatov výskum. Spoločnou vlastnosťou pre všetky tkanivové prípravky je celkový účinok na celý organizmus. To znamená, že "tkanivo terapia" akademik Filatov bol základom väčšiny moderných vývoja a trendy v chirurgii, imunológia, pôrodníctva a ginekoloii, gerontológia, combustiology, dermatológie a kozmetické súvisiace bunky a produkty jeho biosyntézy.

Problém transplantácie tkanív staral ľudstvo od staroveku. Takže v Ebersovom papyru, datovanom 8 000 pred nl, sa už spomína používanie transplantácie tkaniva, aby sa kompenzovali vady v jednotlivých častiach tela. V "knihe života" indického vedca Sushruta, ktorý žil na 1000 litrov. BC existuje podrobný opis obnovy nosa z kože tváre a čela.

Potreba darcov kože rastie úmerne zvýšiť počet plastickej a rekonštrukčnej chirurgii. V tomto ohľade sa začalo používať kadaverózna a plodová koža. Tam bola potreba pre zachovanie darcovských zdrojov a identifikovať príležitosti pre ľudské kožné tkanivá náhradných zvierat rôznych prevedení simulácie kože. A práve v tejto oblasti pracujú vedcov, keď v roku 1941 P.Medovar najprv ukazoval základné možnosti rastu keratinocytov in vitro. Ďalším dôležitým krokom vo vývoji mobilných technológií bola práca Karasek M. A M. Charlton, ktorý v roku 1971 vykonal prvú úspešnú transplantáciu autológnych keratinocytov z primárnej kultúry zo králičích rán, za použitie ako substrát pre pestovanie KC kolagénového gélu, čím sa zlepšuje bunkovú proliferáciu v kultúre. J.Rheinvvald. H zelená. Vyvinuli technológiu na sériové pestovanie veľkých množstiev ľudských keratinocytov. V roku 1979, Green a jeho spolupracovníci zistili, vyhliadky na medicínske použitie keratinocytov bunkovej kultúry pri obnove kože s rozsiahlymi popáleninami, po ktorých sa táto technika neustále zlepšila, to začalo byť používaný lekári horieť centier v zahraničí aj v našej krajine.

V procese štúdium živých buniek ukázala, že bunky produkujú nielen biogénne stimulátory nebielkovinového pôvodu, ale aj rad cytokínov, neurotransmiterov, rastové faktory, polypeptidy, ktoré hrajú dôležitú úlohu v regulácii homeostázy celého organizmu. Bolo zistené, že v rôznych buniek a tkanív, ktoré obsahujú peptidové bioregulátor. Ktoré majú širokú škálu biologických účinkov a koordinujú vývoj a fungovanie mnohobunkových systémov. Použila sa doba aplikácie bunkovej kultúry ako terapeutického činidla. V našom tansplantatsiyu pozastavenia krajiny fibroblastových a keratinocyty bunkových vrstiev laminovaných v posledných desiatich rokoch sme prijali v combustiology. Takéto aktívny záujem o transplantácii kožných buniek spálených vzhľadom na nutnosť rýchleho uzavretiu veľkých popálenín plôch a deficitu darcov kože. Možnosť malého kúsku kože najväčšiu odlíšiť bunky, ktoré môžu pokryť povrch rany v roku 1000 a dokonca 10 000 krát väčšia ako plocha pleti darcovskej bola veľmi atraktívna a dôležité pre Combustiology a popáleninách. Percento uchytiť sa keratinocytov vrstvy sa líši v závislosti od oblasti horenia, veku a zdravotnom stave pacienta z 71,5 na 93,6%. Záujem o transplantácie keratinocytov a fibroblastov spojené nielen so schopnosťou rýchlo uzavrieť defekt v koži, ale tiež s ohľadom na skutočnosť, že tieto transplantácie majú silnú bioaktívne potenciál zlepšiť vzhľad tkanív odvodených od transplantácie. Nádory ciev, odstránenie hypoxia, zlepšenie trofiku, urýchlenie dozrievania nezrelých tkanív - že morfologicko-funkčné základ týchto pozitívnych zmien, ktoré prebiehajú v dôsledku uvoľnenia z transplantovaných buniek, rastových faktorov a cytokínov. Tak, a to vďaka zavedeniu do klinickej praxe vyspelých mobilné technológie transplantácii mnohobunkových vrstiev autológnych aj alogénnych keratinocytov a fibroblastov na rozsiahlych ranných plôch, Combustiology mali možnosť nielen k zníženiu úmrtnosti vystrelil s veľkým percentom kožných lézií, ale aj k zlepšeniu kvality zjazvené tkanivo, ktorá nevyhnutne sa vyskytuje na mieste popálenín IIb a IIIa a 6 stupňov. Skúsenosti combustiologists získané pri liečbe rán plôch u pacientov s popáleninami prišiel s nápadom použiť už upravený Greenova metódy v dermatológii a chirurgickej praxi v rôznych koži a kozmetické patológie (trofické vredy, vitiligo, névus, epidermolysis bullosa, odstránenie tetovania, súvisiace s vekom kožné zmeny, ako aj zlepšiť vzhľad jaziev).

Použitie alogénnej keratinocytov v chirurgii, dermatológii a combustiology má niekoľko výhod oproti primeneiya autológnych keratinocytov ako bunkový materiál je možné pripraviť vopred v neobmedzenom množstve, konzervované a v prípade potreby použiť. Je tiež známe, že alogénne KC majú zníženú antigénne aktivitu, ako keď sú kultivované in vitro stratiť Langerhansove bunky, ktoré sú nositeľmi HLA komplexných antigénov. V prospech použitia alogénne KC tiež hovorí, že sú nahradené autológnej po transplantácii, podľa rôznych autorov v období od 10 dní až 3 mesiace. V tomto ohľade je dnes mnoho krajín zaviedli bunkovej banky, prostredníctvom ktorého môžete prijímať transplantáciu buniek v správnom množstve av správny čas. Takéto banky sú v Nemecku, USA a Japonsku.

Záujem o využitie mobilných technológií v dermatológii a kozmetike vzhľadom k tomu, že "bunková kompozícia" nesú silné bioenergetické a informačné potenciál, vďaka ktorému je možné dosiahnuť kvalitatívne nové výsledky liečby. Autokine (rastové faktory, cytokíny, oxid dusnatý, a ďalšie.) Pridelené transplantované bunky pôsobí predovšetkým na svojich vlastných fibroblastov, zvýšenie ich syntetické a proliferačnej aktivitu. Táto skutočnosť je obzvlášť atraktívna pre výskumných pracovníkov, fibroblastov je kľúčovým buniek dermis, funkčné aktivita, ktorá je závislá od stavu všetkých vrstiev kože. Je tiež známe, že po poranení kože Cauter, laser, ihly a ďalšie nástroje, z kostnej drene, tukového tkaniva a kapilárne pericyt je doplnený s čerstvým kožných fibroblastov kmeňových prekurzorov, ktorá podporuje "omladenie" pool vlastné bunky. Aktívne začnú syntetizovať kolagén, elastín, enzýmy, glykosaminoglykánová, rastové faktory a iné biologicky aktívne molekuly, čo vedie k zvýšeniu hydratácie a vaskularizácie derma, zlepšuje jej pevnosť,