Imunohistochemické markery v diagnostike prekanceróznych lézií ústnej sliznice a červeného okraja pier

Včasná a účinná diagnostika neoplastických lézií ústnej sliznice (CRS) a červeného okraja (CCG) zostáva vážnym problémom onkostomatológie. Spinocelulárny karcinóm ústnej dutiny zaujíma šiestu miesto na svete vo frekvencii medzi zhubnými nádormi všetkých lokalizácií. V Ruskej federácii je incidencia malígnych novotvarov ústnej dutiny 2 až 4% z celkového počtu malígnych nádorov človeka.

V posledných rokoch došlo k významným zmenám v štruktúre chorôb sliznice ústnej dutiny, najmä v náraste podielu prekanceróznych ochorení. Z tohto hľadiska zostáva účinná neinvazívna detekcia príznakov malignity naliehavou úlohou zubného lekárstva.

Aj napriek zdanlivej jednoduchosti klinického zobrazovacieho prediktor zmien sliznice dutiny ústnej a CGC v súvislosti s externým lokalizácie, určenie nozologických pre-rakovinových, len na základe Odtlačok a pohmatom, často vedú k diagnostickým chyby boli rôzne stupne keratinizácie alebo vredov aj markornyh prvky porážka z nich robí trudnodifferentsiruemymi. Zvlášť ťažké včasná diagnóza malignity, pretože sa objaví jej klinické prejavy o niečo neskôr skutočne došlo malígny transformáciu.

Preto sa výskum V.P. Kharchenko a kol. Ukazuje sa, že viac ako dve tretiny pacientov v čase liečby v zdravotníckom zariadení a stanovenie diagnózy majú III-IV štádiá ochorenia. Jedným z dôvodov oneskorenej liečby je "rozmazanie" klinického obrazu v počiatočných štádiách ochorenia. Okrem toho sa preukázala potreba vykonať organizačnú a metodologickú prácu a zvýšiť úroveň znalostí zubných lekárov o skorých klinických prejavoch prekanceróznych ochorení ústnej sliznice. Vykonané testovanie ukázalo, že len 42,8% zubných lekárov rozlišuje skoré prejavy rakoviny ústnej dutiny, pričom 4,2% respondentov môže správne vykonať primárne diagnostické opatrenia na zistenie rakoviny tejto lokalizácie.

Percento neliečiteľných foriem rakoviny ústnej sliznice v dôsledku diagnostických chýb, podľa rôznych autorov, dosahuje 58,4-70%. Situáciu komplikuje otvorené otázky klinickou diagnózou pre-rakovinových, najmä ťažkosti s rozlíšením začiatok zhubného bujnenia, rovnako ako problém výberu spôsobu liečby rakovinových ochorení. Neexistujú žiadne absolútne a relatívne indikácie pre biopsiu, najmä vo fázach konzervatívnej liečby. K dnešnému dňu v literatúre neexistuje žiadny príklad diagnostického kritéria klinickej úrovne, na ktorý by mohol zubný lekár poukázať pri výbere vhodnej metódy na liečbu konkrétneho pre-nádorového ochorenia.

Riešenie diagnostických problémov, ktoré väčšina autorov vidí v pomocných diagnostických metódach (cytológia, cheilostomatoskopia, biomikroskopia, optická koherentná tomografia). Avšak tieto metódy sú skôr subjektívne, pretože nesú len popisnú povahu kvalitatívnych zmien v postihnutých tkanivách. Jedným zo spôsobov kvantifikácie morfologických zmien je stanovenie imunohistochemických markerov.

Zavedenie do každodennej praxi modernej nádorových morfologických metódy overovania výrazne zlepšila kvalitu diagnostiky a liečby nádorových ochorení. Metodické možnosti modernej molekulárnej onkológie rozšírené v súčasnosti pomocou imunohistochemických štúdií môže určiť nielen histologické diagnózy nádoru, ale aj k jej morphofunctional vlastnosti, pokiaľ ide o agresivity a prognózy vo vzťahu k prekanceróznych lézií a rakoviny už vyvinula.

Podľa moderných myšlienok základom malígnej transformácie buniek je aktivácia jedného alebo viacerých bunkových onkogénov alebo supresorových génov. Pozoruje sa u 30% karcinómov rakoviny u človeka av mnohých prípadoch môže byť detekovaná imunohistochemicky. Boli študované onkogény ras p21, HER2 / neu, bcl-2 a supresorové gény p53 a Rb v rôznych nádoroch. Niektoré z uvedených onkogénov (a supresorových génov) sú nezávislé prognostické a prediktívne znaky.

Epitelom sliznice ústnej dutiny je lokusová praedifekcia tvorby nádorových nádorov. Vonkajšie faktory (traumatické oklúzie miesta, ostré hrany výplne úpadku ortopedické konštrukcie, nerozumný individuálne pre ústnu hygienu, zápalové a deštruktívne periodontálne lézie), spolu s genetickými (dedičné) faktory môžu hrať úlohu pri vyvolaní rakoviny tejto lokalizácii. Pri vývoji spinocelulárneho karcinómu ústnej poranenia sliznice môžu byť zapojené do mechanizmu riadenia procesov epiteliálne hyperplázia a skvamózne metaplázia.

Morfologické vlastnosti ústnej sliznice epitelu počas malignity súvisiace so zmenou v sade diferenciácii (fenotypu cytokeratin najmä epiteliálnej vrstve) markery CEA expresie, rovnako ako proliferáciu markeru Ki - 67.

P53 je tumor supresorový gén, ktorého proteínový produkt je nukleárny transkripčný faktor s mnohými funkciami, vrátane blokovania prechodu buniek bunkovým cyklom a indukcie apoptózy. Proteín p53 sa exprimuje vo všetkých bunkách tela. Pri neprítomnosti poškodenia genetického aparátu je proteín p53 v neaktívnom stave a keď dôjde k poškodeniu DNA, aktivuje sa DNA. Aktivácia spočíva v získaní schopnosti viazať sa na DNA a aktivovať transkripciu génov, ktoré obsahujú nukleotidovú sekvenciu v regulačnej oblasti, ktorá je označená prvkom odpovede p53. Mutácie p53 v bunkách dochádza asi 50% rakoviny, vedie k syntéze proteínov so stratou svojich funkcií, ale majú vysokú stabilitu a akumuláciu v jadre, ktorá imunohistochemicky vyjadrený v zreteľný nukleárnej farbenie.

"Voľný" typ génu wt-53 oncosuppressor a proteín p53, ktorý je kódovaný, hrajú ústrednú úlohu vo vývoji apoptózy. Keď je poškodená DNA, dochádza k expresii génu wt53 a zodpovedajúceho proteínu. Posledné blokuje bunkový cyklus v G1-S fáze, a tak inhibujú ďalšie replikáciu poškodenej DNA, ktorý je syntetizovaný v S fáze, a vytvára podmienky pre odstránenie poškodenej oblasti a udržiavanie jeho modifikované časti. Ak dôjde k oprave, bunka sa naďalej delí a generuje zdravé bunky. Ak však nedôjde k reparácii, zahrnú sa ďalšie mechanizmy, ktoré zabezpečia deštrukciu takejto bunky poškodenou (mutagénnou) DNA, t.j. Genetický program bunkovej smrti sa rozvíja - apoptóza.
V posledných rokoch sa predpokladalo, že stav p53 môže byť rozhodujúcim faktorom určujúcim citlivosť nádoru na chemoterapiu a rádioterapiu. Potvrdením tohto predpokladu sú početné štúdie, ktoré dokazujú, že mutovaný p53 je faktorom zlej prognózy a neúčinnosti adjuvantnej liečby pre rôzne neoplasmy ústnej sliznice.

Markery proliferácie sú tiež veľmi informatívnou diagnostickou hodnotou v predpovedaní priebehu malígnych nádorov. Proliferatívna aktivita je hlavným faktorom tak v mechanizme malígnej transformácie buniek, ako aj v biologickom chovaní už objavujúcich sa nádorov. Sľubným markerom proliferačnej aktivity je anti-Ki-67 antigén, ktorý sa exprimuje prakticky vo všetkých fázach bunkového cyklu a zodpovedá tak veľkosti proliferatívnej skupiny. Gén kódujúci Ki-67 je umiestnený na dlhom ramene chromozómu 10. Ki-67 sa týka regulačných proteínov. Jeho vzhľad sa zhoduje so vstupom bunky do mitózy, čo umožňuje jej použiť ako univerzálny marker proliferácie pri hodnotení rastu malígnych nádorov.

Rad štúdií skúmajúcich diagnostickú hodnotu imunohistochemických markerov v predpovedanie toku prekancerózne lézie sliznice dutiny ústnej a purpurové línie. Murti PR a spol. študovala expresiu p53 červeným paušálnym SSRI. Keď sa určila imunohistochemická metóda, expresia p53 nedokázala odhaliť malígny stav prekanceru ústnej sliznice. Autori navrhli, že nadmerná expresia p53 špičke v blízkosti čase transformácie do prekancerózne rakoviny, a nemôžu byť použité ako skorá marker malignity predikcie pre-rakovinových ústnej sliznice. Ďalší výskumníci zistili, že ľudský gén TP53 kóduje najmenej 9 rôznych izoforiem. Iný člen rodiny p53, p63, obsahuje 6 rôznych izoforiem a hrá kľúčovú úlohu vo vývoji ústnej sliznice, slinných žliaz, zubov a kože. Bolo navrhnuté, že p63 súvisí s vývojom karcinómu dlaždicových buniek hlavy a krku. Avšak v porovnaní s nemodifikovaným tkanivom neboli pozorované žiadne štatisticky významné zmeny expresie nových izoforiem p53 a p63 v prekancerte SSRI. Štúdie organizácie De Sousa FA potvrdili prognostický význam markera p53 pri určovaní potenciálu malígnej transformácie prekanceru ústnej sliznice. Súčasne sa niektorí autori domnievajú, že p53 nemožno použiť ako jediný marker na predpovedanie vývoja rakoviny.

Rovnako sľubný prognostický Imunohistochemické zisťovanie rovina je zastúpená v študovaného vzoriek tkaniva podoplanina - integrálna membránový mukoproteínov vyjadrená ako nezmenený a zmenená zápalové a neoplastické endotelu lymfatických kapilár. Vedci našli štatisticky významný vzťah expresné podoplanina iABCG2 (ATP-viažuci proteín podskupina G2) s rizikom malígny transformáciu plochý lišaj (riziko významne vyššie pri Koexprese podoplanina a ABCG2, než bez Koexprese podoplanina a ABCG2), a dospel k záveru, že podoplanin a ABCG2 môžu byť použité ako biomarkerov pre vyhodnotenie rizika malígne transformácie sa prekancerózne lézie RBCU

Výskumy zahraničných vedcov potvrdili diagnostickú významnosť expresie Fas / FasL ako biomarkerov vývoja rakoviny. Fas je typ I transmembránového glykoproteínu (synonymá APO-I, CD95), a indukuje apoptózu v bunkách po interakcii s ligandom fas (FasL) alebo agonistické monoklonálne protilátky proti Fas.

Súčasne je známe, že Fas je exprimovaný prakticky vo všetkých typoch tkanív. Zvýšená expresia Fas sa pozoruje v obličkách, pečeni, srdci a týmusu. Okrem toho sa tento receptor exprimuje na mnohých nádoroch, rovnako ako bunky infikované vírusom. Dôvodom rezistencie rôznych typov buniek na apoptózu závislú od Fas môže byť zvýšenie produkcie rozpustných Fas týmito bunkami. Rozpustný Fas je produkt alternatívneho zostrihu a je schopný inhibovať apoptózu indukovanú agonistickými monoklonálnymi protilátkami proti Fas alebo FasL.

Tak nejednoznačné interpretácia výsledkov výskumu vykonáva rôznymi autormi vedie k záveru, že v tomto štádiu molekulárnej onkológie použitie imunohistochemického markeru perspektívne v kombinácii s inými metódami diagnózu a prognózu premalígnych lézií sliznice dutiny ústnej.

Zvláštny význam má problém klasifikácie imunohistochemických markerov pre diagnostickú významnosť. Veríme, že v poradí klesajúcej dôležitosti môžu byť usporiadané v nasledujúcom poradí:

1. Imunohistochemické markery s vysokým diagnostickým významom: subplanín, ABCG2, bcl-2;
2. Imunohistochemické markery s priemerným stupňom diagnostického významu: Bax, MMP-9;
3. Sľubné imunohistochemické markery, ktorých diagnostická významnosť vyžaduje ďalšiu štúdiu: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Imunohistochemické markery, ktorých diagnostická významnosť na predikciu priebehu prekanceróznych ochorení nie je preukázaná: p53, p63.

Na základe tejto analýzy literatúry dát je možné urobiť záver, že stanovenie imunohistochemických markerov by nemala byť považovaná za jediný spôsob predikcie priebeh prekancerózne lézie sliznice dutiny ústnej a identifikácia riziko malígne transformácie, ale napriek tomu má táto metóda vysokú diagnostickú hodnotu v kombinácii s inými základe metódy predikcie priebehu prekanceróznych ochorení.

Senior výskumník Kuznetsova Roza Gilevna. Imunohistochemické markery pri diagnostikovaní prekanceróznych lézií sliznice ústnej dutiny a červeného okraja pier [Praktické lekárstvo. 8 (64) December 2012 / zväzok 1

[1], [2], [3], [4], [5]