Protilátky proti nukleárnym antigénom (antinukleárny faktor) v krvi

U zdravých ľudí je titer protilátok proti jadrovým antigénom v krvnom sére 1:40-1:80 (klinicky významný titer je ≥1:160 pri použití metódy nepriamej imunofluorescencie; pri použití skríningových metód - pod 1:50).

Antinukleárny faktor - protilátky proti celému jadru. Ide o heterogénnu skupinu autoprotilátok, ktoré reagujú s rôznymi zložkami jadra. Stanovenie protilátok proti jadrovým antigénom v krvnom sére je test na systémové ochorenia spojivového tkaniva. Skríning na prítomnosť antinukleárnych protilátok v krvnom sére sa vykonáva rádioimunoanalýzou (RIA), reakciou fixácie komplementu (CFR) alebo ELISA.

Pozitívne výsledky skríningu by mali byť potvrdené metódou nepriamej imunofluorescencie. Ako bunkový substrát sa používajú preparáty pripravené zo suspenzie buniek s veľkými jadrami [z ľudských epitelových buniek línie HEp-2 - bunky rakoviny hrtana alebo rezy pečene myší]. Typ farbenia (povaha distribúcie fluorescenčnej značky v bunkách) je pri rôznych ochoreniach odlišný a určuje smer ďalšieho stanovenia špecifickosti antinukleárnych protilátok.

• Difúzne farbenie (rovnomerné rozloženie značenia) je najmenej špecifické, možné pri systémovom lupus erythematosus, syndróme lupusu vyvolaného liekmi a iných autoimunitných ochoreniach, ako aj u starších jedincov. V prípade difúzneho farbenia buniek sa musí reakcia opakovať s vyšším riedením testovaného krvného séra. Ak typ farbenia zostane rovnaký, je najpravdepodobnejšie, že antigénom, proti ktorému sú namierené antinukleárne protilátky, je deoxyribonukleoproteín.
• Homogénne alebo periférne farbenie sa pozoruje, keď v skúmanom sére prevládajú protilátky proti dvojvláknovej DNA. Tento typ farbenia sa najčastejšie vyskytuje pri systémovom lupus erythematosus.
• Škvrnité alebo strakaté sfarbenie je spôsobené protilátkami proti extrahovateľným jadrovým antigénom a zvyčajne sa vyskytuje pri zmiešanom ochorení spojivového tkaniva, Sjögrenovom syndróme a liekmi indukovanom lupusovom syndróme.
• Nukleolárne farbenie (rozloženie značiek v jadierkach) je spôsobené protilátkami proti ribonukleoproteínu (pozri nižšie). Tento typ farbenia je typický pre systémovú sklerodermiu a občas je možný aj pri iných autoimunitných ochoreniach.
• Centromérne alebo diskrétne škvrnité farbenie je spôsobené protilátkami proti centromére (špecializovanej doméne chromozómov) a je charakteristické pre CREST syndróm a iné autoimunitné reumatické ochorenia.

Hlavným cieľom štúdie antinukleárnych protilátok je identifikovať systémový lupus erythematosus, pretože pri tomto ochorení sa objavujú v krvnom sére 95 % pacientov do 3 mesiacov od jeho nástupu.

Stanovenie protilátok proti jadrovým antigénom má veľký význam pre diagnostiku kolagenóz. Pri nodulárnej polyarteritíde sa titer (pri použití skríningových metód) môže zvýšiť na 1:100, pri dermatomyozitíde na 1:500, pri systémovom lupus erythematosus na 1:1000 a vyšší. Pri systémovom lupus erythematosus má test na detekciu antinukleárneho faktora vysoký stupeň citlivosti (89 %), ale strednú špecificitu (78 %) v porovnaní s testom na detekciu protilátok proti natívnej DNA (citlivosť 38 %, špecificita 98 %). Protilátky proti jadrovým antigénom sú vysoko špecifické pre systémový lupus erythematosus. Dlhodobé udržiavanie vysokej hladiny protilátok je nepriaznivým znakom. Pokles titra predpovedá remisiu alebo (niekedy) fatálny výsledok.

Pri sklerodermii je frekvencia detekcie protilátok proti jadrovým antigénom 60 – 80 %, ale ich titer je nižší ako pri systémovom lupus erythematosus. Neexistuje žiadny vzťah medzi titrom antinukleárneho faktora v krvi a závažnosťou ochorenia. Pri reumatoidnej artritíde sa často rozlišujú formy ochorenia podobné SLE, takže protilátky proti jadrovým antigénom sa detegujú pomerne často. Pri dermatomyozitíde sa protilátky proti jadrovým antigénom v krvi detegujú v 20 – 60 % prípadov (titer do 1:500), pri nodulárnej polyarteritíde v 17 % (1:100), pri Sjögrenovej chorobe v 56 % v kombinácii s artritídou a v 88 % prípadov pri Gougerot-Sjögrenovom syndróme. Pri diskoidnom lupus erythematosus sa antinukleárny faktor deteguje u 50 % pacientov.

Okrem reumatických ochorení sa protilátky proti jadrovým antigénom v krvi zisťujú aj pri chronickej aktívnej hepatitíde (v 30 – 50 % prípadov) a ich titer niekedy dosahuje 1:1000. Autoprotilátky proti jadrovým antigénom sa môžu v krvi objaviť pri infekčnej mononukleóze, akútnej a chronickej leukémii, získanej hemolytickej anémii, Waldenströmovej chorobe, cirhóze pečene, biliárnej cirhóze, hepatitíde, malárii, lepre, chronickom zlyhaní obličiek, trombocytopénii, lymfoproliferatívnych ochoreniach, myasténii a tymómoch.

V takmer 10 % prípadov sa antinukleárny faktor zistí u zdravých ľudí, ale v nízkych titroch (nie viac ako 1:50).

V posledných rokoch bola vyvinutá enzýmovo-imunoanalýza na stanovenie antinukleárnych protilátok rôzneho spektra, ktorá sa ľahko vykonáva a postupne nahrádza imunofluorescenčnú metódu.

Množstvo liekov môže viesť k falošne pozitívnemu zvýšeniu titra antinukleárnych protilátok: aminosalicyláty, karbamazepín, izoniazid, metyldopa, prokaínamid, jodidy, perorálne kontraceptíva, tetracyklíny, tiazidové diuretiká, sulfónamidy, nifedipín, β-blokátory, hydralazín, penicilamín, nitrofurantoín atď., a to kvôli schopnosti týchto liekov interferovať počas štúdie.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]