Agregácia krvných doštičiek s ristocetínom (von Willebrandov faktor )

Referenčné hodnoty (norma) aktivity von Willebrandovho faktora sú 58 – 166 %.

Von Willebrandov faktor je syntetizovaný endotelovými bunkami a megakaryocytmi. Je nevyhnutný pre normálnu adhéziu krvných doštičiek a má schopnosť predĺžiť polčas rozpadu faktora VIII. Plazmatický koagulačný faktor VIII – antihemofilný globulín A – cirkuluje v krvi ako komplex troch podjednotiek označených VIII-k (koagulačná jednotka), VIII-Ag (hlavný antigénny marker) a VIII-vWF (von Willebrandov faktor asociovaný s VIII-Ag). Predpokladá sa, že von Willebrandov faktor reguluje syntézu koagulačnej časti antihemofilného globulínu A (VIII-k) a podieľa sa na hemostáze ciev a krvných doštičiek.

Von Willebrandova choroba je dedičné ochorenie charakterizované predĺženým časom krvácania, zníženou aktivitou ristocetínového kofaktora a zníženou (v rôznej miere) koagulačnou aktivitou faktora VIII. Klinické prejavy ochorenia sú podobné ako pri trombocytopatii. Pacienti s významne zníženou aktivitou faktora VIII však môžu mať hematómy a hemartrózu.

Na základe laboratórnych štúdií, ktoré nám umožňujú určiť štruktúru a aktivitu von Willebrandovho faktora, sa rozlišujú nasledujúce formy ochorenia.

• Typ I (70 % všetkých prípadov) sa vyznačuje miernym poklesom ristocetínového kofaktora (von Willebrandov faktor) a koagulačnej aktivity (VIII-k) s normálnou makromolekulárnou štruktúrou von Willebrandovho faktora.
• Typ II: je založený na selektívnom deficite vysokomolekulárnych polymérov von Willebrandovho faktora v dôsledku porúch v štruktúre tohto proteínu.
  • Typ IIB je spôsobený zvýšenou interakciou medzi von Willebrandovho faktora a krvnými doštičkami a zvýšený klírens krvných agregátov vedie k trombocytopénii.
• Typ III je charakterizovaný závažným kvantitatívnym deficitom von Willebrandovho faktora, čo vedie ku klinicky významnému zníženiu aktivity faktora VIII (VIII-k).

Obsah von Willebrandovho faktora sa stanovuje v prípadoch, keď je čas krvácania predĺžený, počet krvných doštičiek je v rámci referenčných hodnôt a neexistujú žiadne zjavné príčiny dysfunkcie krvných doštičiek. Na posúdenie von Willebrandovho faktora sa stanovuje kvantitatívny obsah von Willebrandovho faktora (štúdia aktivity kofaktora ristocetín), skúma sa ristocetínom indukovaná aglutinácia krvných doštičiek a antigénna štruktúra von Willebrandovho faktora asociovaného s faktorom VIII (VIII-vWF).

Na kvantitatívne stanovenie von Willebrandovho faktora sa používa stanovenie agregácie krvných doštičiek s ristocetínom v plazme. Medzi stupňom agregácie ristocetínu a množstvom von Willebrandovho faktora bol stanovený lineárny vzťah. Metóda je založená na schopnosti tohto antibiotika (ristocetínu) stimulovať in vitro interakciu von Willebrandovho faktora s glykoproteínom krvných doštičiek Ib. Vo väčšine prípadov von Willebrandovej choroby sa pozoruje zhoršená agregácia ristocetínu pri normálnej odpovedi na ADP, kolagén a adrenalín. Zhoršená agregácia ristocetínu sa zisťuje aj pri Bernard-Soulierovej makrocytárnej trombodystrofii (absencia receptorov agregácie ristocetínu na membráne krvných doštičiek). Na diferenciáciu sa používa test s pridaním normálnej plazmy: pri von Willebrandovej chorobe sa agregácia ristocetínu normalizuje po pridaní normálnej plazmy, zatiaľ čo pri Bernard-Soulierovom syndróme sa tak nedeje.

Štúdia sa môže použiť aj v diferenciálnej diagnostike hemofílie A (nedostatok faktora VIII) a von Willebrandovej choroby. Pri hemofílii je obsah VIII-k prudko znížený a obsah VIII-fB je v normálnom rozmedzí. Klinicky sa tento rozdiel prejavuje tým, že pri hemofílii sa vyskytuje zvýšený typ krvácania hematómu a pri von Willebrandovej chorobe petechiálny hematóm.

Aglutinácia krvných doštičiek indukovaná ristocetínom je znížená vo väčšine prípadov von Willebrandovej choroby, s výnimkou typu IIB.

Antigénna štruktúra von Willebrandovho faktora asociovaného s faktorom VIII (VIII-vWF) sa deteguje rôznymi imunologickými metódami a distribúcia von Willebrandovho faktora podľa molekulovej veľkosti sa určuje elektroforézou na agarózovom géli. Tieto testy sa používajú na stanovenie typu von Willebrandovej choroby.

Štúdia agregácie krvných doštičiek s rôznymi induktormi sa vykonáva nielen na identifikáciu porúch funkcií agregácie krvných doštičiek. Táto štúdia umožňuje vyhodnotiť účinnosť antiagregačnej terapie, zvoliť individuálne dávky liekov a vykonávať monitorovanie liekov.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]