Kmeňové bunky hematopoetických buniek

Hematopoetické kmeňové bunky (HSC) ako mezenchýmových progenitorové bunky sú charakterizované multipotency a vedú k bunkovej línie, konečných prvkov, ktoré tvoria krvné bunky a niektoré špecializované tkanivové bunky imunitného systému.

Hypotéza o existencii spoločného predka všetkých krvných buniek, rovnako ako termín "kmeňových buniek", vo vlastníctve A. Maximov (1909) Potenciál tvorba bunkovej hmoty z GSK obrovské -. Kmeňové bunky kostnej drene produkovať 10. Deň bunky, ktoré tvoria krvinky samotného periférii. Existencia krvotvorných kmeňových buniek bola založená v roku 1961 v pokusoch na obnovu krvotvorby u myší liečených smrteľnú dávku ožiarenia, ktorý ničí kmeňových buniek kostnej drene. Pos tj transplantácia syngenních buniek kostnej drene tak letálne ožiarených zvierat boli zistené diskrétne ložiska krvotvorby v slezine príjemcov, ktorého zdroj - jednotlivé klonovacích progenitorové bunky.

Potom bola preukázaná schopnosť hematopoetických kmeňových buniek samorezistentne podporovať hematopoézu počas ontogenézy. V procese embryonálneho vývoja sú HSC charakteristické vysokou migračnou aktivitou, ktorá je nevyhnutná pre ich migráciu do miest hematopoetických orgánov. Táto vlastnosť HSC sa zachováva aj v ontogenéze - kvôli ich konštantnej migrácii dochádza k trvalému obnoveniu skupiny imunokompetentných buniek. Schopnosť GSK migrácie, prenikanie cez hematoencefalickú tkanivové bariéry, implantácie rastu tkanív a klonovacích poskytli základ pre transplantáciu buniek kostnej drene v rade ochorení spojených s poruchami krvotvorným systému.

Ako u všetkých mobilných zdrojov kmeňových, krvotvorné kmeňové bunky sú prítomné vo vašom nika (kostnej drene) vo veľmi malom množstve, čo vedie k určitým ťažkostiam pri ich prideľovanie. Immunophenotypic ľudskej HSC sú charakterizované ako CD34 + NK buniek schopných migráciu do krvného obehu a kolonizovať orgánov imunitného systému, alebo znovu osídliť stróma kostnej drene. Je potrebné jasne pochopiť, že GSK nie je najviac nezrelé bunky kostnej drene, a sú odvodené od prekurzorov, ktoré obsahujú dormantnye fibroblastových SB34-negatívnych buniek. Bolo zistené, že bunky s fenotypom CD34 sú schopné vstúpiť do krvného riečišťa, kde sa zmení ich fenotyp v CD34 +, ale spätná migrácia v kostnej dreni pod vplyvom mikroprostredie opäť stane CD34-negatívne kmeňových buniek prvky. V kľude CD34-bunky nereagujú na parakrinné regulačné stromálne signály (rastové faktory, cytokíny). Avšak, v prípadoch, ktoré vyžadujú intenzity zosilnenia krvotvorných kmeňových buniek s fenotypom CD34 reagovať na diferenciačný signály tvoria oba hematopoetických a mezenchýmových progenitorové bunky. Hematopoézu sa vykonáva priamym stykom s GSK bunkových elementov v podpornej väzivového tkaniva kostnej drene predstavoval komplexnú sieť makrofágy, retikulárne endoteliálne bunky, osteoblasty, stromálne fibroblasty a extracelulárnej matrix. Kostná dreň stromálny rámec - nielen matrice alebo "kostra" pre krvotvorné tkanivá, nesie jemné regulácia krvotvorby v dôsledku parakrinný regulačných signálov, rastových faktorov, cytokínov a chemokiny, a tiež poskytuje adhézne interakcie sú nevyhnutné pre tvorbu krvných buniek.

Takto je základom neustále aktualizovaného systému hemopoézy hemopoetická kmeňová bunka, ktorá je schopná predĺžiť sebarealizáciu. Počas procesu spáchania sa HSC podrobujú primárnej diferenciácii a tvoria klony buniek, ktoré sa líšia svojimi cytomorfologickými a imunofenotypickými vlastnosťami. Následná tvorba primitívnych a spáchaných progenitorových buniek je ukončená tvorbou morfologicky identifikovateľných predkov buniek rôznych hematopoetických línií. Výsledkom následnej etapy komplexného viacstupňového spôsobu je dozrievanie krvotvorných buniek a získanie zrelých do periférnej krvi, vytvorených prvkov - erytrocytov, leukocytov, lymfocytov a krvných doštičiek.

[1], [2], [3],

Zdroje hematopoetických kmeňových buniek

Krvotvorné kmeňové bunky sú považované za najviac študovaných kmeňových zdroj, ktorý je do značnej miery v dôsledku ich použitia v klinike transplantácie kostnej drene. Na prvý pohľad je veľa o týchto bunkách známe. Do určitej miery je to pravda, pretože medziľahlé a zrelé potomkovia GSK - najdostupnejší bunkové elementy, z ktorých každý (erytrocyty, leukocyty, lymfocyty, monocyty / makrofágy a krvné doštičky) sú dôkladne študované na všetkých úrovniach - od svetla, elektrónovú mikroskopiu, z biochemické a imunofenotypové charakteristiky pred identifikáciou pomocou analýzy PCR. Sledovanie však vykonáva morfologických, ultrastrukturální, biochemických, immunophenotypic a biofyzikálnych parametrov genómovej GSK neprinieslo odpovede na mnoho veľmi problematické oblasti, sa roztok, ktorý je nevyhnutný pre vývoj transplantácie buniek. Stále nie je stanovená stabilizačný mechanizmy GSK v nečinnom stave, ktoré sú aktivované, na javisko symetrického alebo nesymetrického delenie, a čo je najdôležitejšie - vernosti vzdelanie ako funkčne rôznych krvných buniek, erytrocytov, leukocytov, lymfocytov a krvných doštičiek.

Prítomnosť v bunkách kostnej drene s fenotypom CD34, ktoré sú predkovia ako mezenchymálnych a krvotvorných kmeňových buniek vyvoláva otázku existencie najbližšej blízkosti CD34-negatívnych buniek v diferenciácii progenitorových buniek a hematopoetických stromálne línie. Dlhšia kultivačná metóda sa získa tzv dlhodobé kultúry "iniciování,buňky (dlhodobú kultúru-iniciačný bunky - LTC-IC). Životnosť takýchto progenitorových buniek v kolónii tvoriacich aktivitu strómy kostnej drene na základe kombinácie rastových faktorov je viac ako 5 týždňov, zatiaľ čo životaschopnosť angažovaných jednotiek tvoriacich kolónie (CFU) v kultúre 3 týždňoch. V súčasnosti sa predpokladá, že LTC-IC - funkčné analóg GCW ako repopulyatsionnom pri vysokom potenciáli asi 20% LTC-IC sú charakterizované fenotypom CD34 + CD38- a vykazujú vysokú schopnosť obnovy. Takéto bunky nájdené v ľudskej kostnej drene s frekvenciou 1:50 000. Avšak, je potrebné si uvedomiť limfoidoinitsiiruyuschie-myeloidných buniek najbližšie HSC, ktoré boli získané za podmienok dlhodobého (15 týždňov) kultúry. Tieto bunky sú označené ako LTC, medzi buniek ľudskej kostnej drene sa nachádzajú v 10 krát nižšia, než je LTC-IC, a je vytvorený ako myeloidných bunkových línií a lymfoidné krvotvorným stonky.

Aj keď krvotvorné kmeňové bunky značenie pomocou monoklonálnych protilátok, nasleduje identifikácia immunophenotypic je hlavný spôsob identifikácie a selektívne triedenie krvotvorných kmeňových buniek s potenciálnym klinickým použitím príslušného GSK tak obmedzené. Blokujúce protilátky CD34 receptor alebo iné markerové antigény počas triedenia imunopozitivních nevyhnutne mení vlastnosti buniek, izolované s ním. Výhodnejšie je imuno-negatívna sekrécia HSC na magnetických kolónach. Avšak, v tomto prípade, triedenie sa spravidla používa monoklonálne protilátky, ktoré sú umiestnené na nosiči kovu. Tiež je dôležité, že ako spôsob prideľovania GSK na základe fenotypovej, skôr než funkčné vlastnosti. Preto mnoho výskumníkov prednosť použitie analýzy klonogenních parametrov GSK, čo umožňuje veľkosť a zloženie kolónií na určenie stupňa zrelosti a smeru diferenciácie progenitorov. Je známe, že v procese spáchania počet buniek a počet typov v kolóniách sa znižuje. Krvotvorných kmeňových buniek a ich dcérska bunka čoskoro, s názvom "granulocytov erytrocytov monocyty megakariotsitokolonieobrazuyuschaya jednotka" (SFU-GEMMA), vytvorenie kultúry multilineární veľké kolónie, ktoré obsahujú, v tomto poradí, granulocyty, erytrocyty, monocyty a megakaryocytov. Sa nachádza pod hranicou granulocytovej línie záväzok monotsitokolonieobrazuyuschaya jednotky (SFU-GM) vytvára kolónie granulocytov a makrofágov, a granulocytové kolónie tvoriacich jednotiek (SFU-G), - iba malé kolónie zrelých granulocytov. Čoskoro erytrocytov predchodca - burstoobrazuyuschaya jednotky červených krviniek (SFU-E) - je zdrojom veľkých a zrelých červených krviniek kolónie tvoriace jednotky (SFU-E) - malých červených krviniek kolónií. V všeobecnej populácii, s rastom buniek v polotuhých médiá možno identifikovať bunky, ktoré tvoria šesť typov myeloidných kolónií: SFU-GEMMA, GM-SFU, SFU-G, M-SFU, VFU-E a E-SFU).

Okrem hematopoetických derivátov však akýkoľvek zdrojový materiál na separáciu HSC obsahuje významný počet sprievodných buniek. V tejto súvislosti je nevyhnutné predbežné čistenie transplantátu predovšetkým aktívnych buniek imunitného systému darcu. Zvyčajne sa na tento účel používa imunizácia založená na expresii špecifických antigénov lymfocytmi, čo umožňuje ich izoláciu a odstránenie použitím monoklonálnych protilátok. Okrem toho, technika immunorozetochnaya T-lymfocytov ochudobnený transplantáciu kostnej drene, ktorá je založená na tvorbe komplexov CD4 + lymfocytov a špecifické monoklonálne protilátky účinne odstrániť pomocou aferézu. Táto technika poskytuje purifikovaný bunkový materiál s 40-60% hematopoetických kmeňových buniek.

Zvýšenie počtu progenitorových buniek v dôsledku odstránenia zrelých krvných buniek z leukaferéze výrobku sa dosiahne protiprúde odstreďovaním nasledovaným filtráciou (za prítomnosti chelatačného činidla - citranov trisodného) cez kolónu obsahujúcu nylonové vlákna potiahnutých ľudského imunoglobulínu. Sekvenčné použitie týchto dvoch techník poskytuje kompletné čistenie štepu z krvných doštičiek o 89% - z erytrocytov a o 91% - z leukocytov. Vzhľadom na významné zníženie strát HSC sa môže hladina CD34 + buniek v celkovej bunkovej hmotnosti zvýšiť na 50%.

Pre funkčné charakteristiky izolovaných krvotvorných kmeňových buniek sa používa ich schopnosť vytvárať kolónie zrelých krvných prvkov v kultúre. Analýza vytvorených kolónií umožňuje identifikovať a kvantifikovať typy progenitorových buniek, stupeň ich spáchania a určiť smer ich diferenciácie. Klonogénna aktivita sa stanovuje v polotuhej látke na metylcelulóze, agare, plazme alebo fibrinovom géli, čo znižuje migračnú aktivitu buniek, čo zabraňuje ich pripevneniu na povrch skla alebo plastu. Za optimálnych podmienok kultivácie sa klony z jednej bunky vyvinú do 7 až 18 dní. Ak je v klone menej ako 50 buniek, identifikuje sa ako jeden klastr, ak počet buniek presiahne 50 - ako kolónie. Zohľadňuje sa počet buniek schopných tvoriť kolóniu (jednotky tvoriace kolóniu - CFU alebo bunky tvoriace kolónie - COC). Je potrebné poznamenať, že parametre a CFU COC nebude zodpovedať počtu HSC v suspenzii buniek, aj keď to koreluje s tým opätovne zdôrazňuje potrebu určiť aktivitu funkčné (tvoriacich kolónie) na HSC in vitro.

Medzi bunkami kostnej drene majú hematopoetické kmeňové bunky najvyšší proliferatívny potenciál, vďaka ktorému sa v kultúre vytvárajú najväčšie kolónie. Podľa počtu takýchto kolónií sa navrhuje nepriamo určiť počet kmeňových buniek. Po vzniku kolónií in vitro viac ako 0,5 mm v priemere a s počtom buniek, 1000, autori testovali stabilitu týchto buniek subletálne dávky 5-fluóruracilu sú a skúmaná ich schopnosť znovu osídliť kostná dreň letálne ožiarených zvierat. Podľa týchto parametrov sa izolované bunky veľmi nelíšili od HSC a dostali skratku symbol HPP-CFC - bunky tvoriace kolóniu s vysokým proliferatívnym potenciálom.

Hľadanie možnosti kvantitatívneho výberu hematopoetických kmeňových buniek pokračuje. Avšak, hematopoetické kmeňové bunky sú morfologicky podobné lymfocyty a sú relatívne uniformné súbor buniek s takmer okrúhlym jadrami, chromatín a častíc slabobazofilnoy malým množstvom cytoplazmy. Presné číslo je tiež ťažké určiť. Predpokladá sa, že GSK v kostnej dreni osoby sa vyskytuje s frekvenciou 1 na 106 buniek obsahujúcich jadro.

Identifikácia hematopoetických kmeňových buniek

Pre zlepšenie identifikáciu krvotvorných kmeňových buniek sa vykonáva postupne alebo súčasne (na viackanálovom sorbitanu tere) výskumu membrannosvyazannyh spektrum antigénov, v ktorom GSK fenotyp CD34 + CD38 by mali byť v kombinácii s nedostatkom diferenciačných markerov lineárne, najmä antigény imunokompetentných buniek, ako sú CD4, a povrchové imunoglobulíny Glycophorin.

Prakticky všetky schémy fenotypizácie hematopoetických kmeňových buniek zahŕňajú stanovenie antigénu CD34. Tento glykoproteín s molekulovou hmotnosťou asi 110 kDa, nesúci niekoľko glykozylácie miesta exprimovaný na plazmatických bunkovej membráne po aktivácii génu lokalizovaným na chromozóme 1. Funkcia molekuly CD34 je spojená s interakciou sprostredkovaných L-selektínom skorých hematopoetických prekurzorových buniek s stromálnou bázou kostnej drene. Je však potrebné mať na pamäti, že prítomnosť CD34 antigénu na bunkovom povrchu umožňuje iba predbežné posúdenie obsahu GSK v bunkovej suspenzii, ako je vyjadrená, a iné hematopoietické progenitorové bunky a stromálne bunky kostnej drene a endotelové bunky.

V procese diferenciácie hematopoetických progenitorových buniek je expresia CD34 trvale znížená. Progenitorové bunky erytrocytov, granulocytov a monocytov buď slabo exprimujú antigén CD34, alebo na svojom povrchu chýbajú (fenotyp CD34). Na povrchovej membráne diferencovaných buniek kostnej drene a zrelých krvných buniek nie je detegovaný antigén CD34.

Je potrebné poznamenať, že nielen v dynamike diferenciácie krvotvorných progenitorových buniek znižuje hladiny expresie CD34, ale paralelne postupne zvýšenú expresiu CD38 antigénu - integrálne membránový glykoproteín s molekulovou hmotnosťou 46 kDa, ktorý NAD-glikogidrolaznoy a cyklasy aktivity ADP-ribosyl, čo naznačuje jeho účasť pri preprave a syntéze ADP-ribózy. Tak je možné dvojitej kontroly stupňa záväzku hematopoetických kmeňových buniek. Populácia buniek s fenotypom CD34 + CD38 +, od 90 do 99% buniek CD34-pozitívna kostnej drene sa skladá z progenitorov s obmedzenou proliferačnej potenciál a diferenciácie, zatiaľ čo s fenotypom CD34 + CD38 bunky môžu nárokovať úlohu GSK.

Populácia buniek kostnej drene opísaná vzorcom CD34 + CD38- obsahuje skutočne veľký počet primitívnych kmeňových buniek, ktoré sa môžu diferencovať v myeloidnom a lymfoidnom smere. V súvislosti s dlhodobou kultiváciu s fenotypom CD34 + CD38- buniek podarí získať všetky zrelé krvné bunky: neutrofily, eozinofily, bazofily, monocyty, megakaryocytov, erytrocyty a lymfocyty.

Relatívne nedávno sa zistilo, že CD34-pozitívne bunky exprimujú ďalšie dve značky - AC133 a CD90 (Thy-1), ktoré sa tiež používajú na identifikáciu krvotvorných kmeňových buniek. Antigén Thy-1 sa koexprimuje s receptorom CD117 (c-kit) na bunkách CD34 + kostnej drene, pupočníkovej šnúry a periférnej krvi. Ide o povrchový glykoproteín viažuci fosfatidylinozitol s molekulovou hmotnosťou 25-35 kDa, ktorý sa zúčastňuje bunkových adhéznych procesov. Niektorí autori sa domnievajú, že antigén Thy-1 je markerom najviac nezrelých CD34-pozitívnych buniek. Samovoľne sa reprodukujúce bunky s fenotypom CD34 + Thy-1 + vedú k vzniku dlhých kultivovaných línií s tvorbou dcérskych buniek. Predpokladá sa, že antigén Thy-1 blokuje regulačné signály, ktoré spôsobujú delenie buniek. Napriek tomu, že CD34 + TU1 + bunky sú schopné samoobnovy a vytvorenie dlhodobého kultivovaných liniek, môže ich fenotyp nevzťahuje iba na ochranu zdravia, ako je Thy-1 + obsah v celkovej hmotnosti CD34-pozitívnych bunkových elementov je asi 50%, ak prekročenie počet hematopoetických buniek.

Schodnejšou pre identifikáciu krvotvorných kmeňových buniek by mal uznať AC133 - antigénne markery hematopoetických kmeňových buniek, ktorého expresia prvýkrát zistená v embryonálnych bunkách pečene. AC133 je transmembránový glykoproteín, ktorý sa objavuje na povrchu bunkovej membrány v najskorších štádiách dozrievania GSK - je možné, že ešte skôr ako antigén CD34. V štúdiách A. Petrenka a V. Grishchenka (2003) bolo zistené, že AC133 exprimuje až 30% CD34-pozitívnych buniek embryonálnej pečene.

To znamená, že ideálny fenotypická profil krvotvorných kmeňových buniek dnes pojmy, súčet obrysu bunky, v obvodoch, ktoré musia byť prítomné CD34 antigény konfiguráciu, AC133 a Thy-1, ale neexistuje žiadne miesto pre molekulárnu CD38 výstupkov, HLA-DR a markery lineárne diferenciácie GPA , CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20.

GSK fenotypové variácie portrét môže byť kombináciou CD34 + CD45RalowCD71low, pretože vlastnosti buniek opísaných v tomto vzorci sa nelíši od funkčných parametrov buniek s fenotypom CD34 + CD38. Okrem toho ľudský HSC môžu byť identifikované pomocou fenotypovej známky CD34 + Thy-l + CD38Iow /, c-kit / nízke - len 30 z týchto buniek úplne obnoviť krvotvorbu v letálne ožiarených myší.

Z analýzy všeobecných fenotypových charakteristík buniek kostnej drene v skutočnosti začala 40 rokov intenzívneho výskumu GSK súčasne schopnú ako samoobnovy a diferenciácie do iných bunkových elementov, čo umožňuje odôvodniť použitie transplantácii kostnej drene na liečenie rôznych patologických stavov krvotvorným systému. Nedávno objavené nové typy kmeňových buniek ešte neboli v klinickej praxi široko používané. Avšak, kmeňové bunky z pupočnej šnúry (šnúra) krvi a fetálnej pečeň môžu významne rozšíriť transplantáciu buniek nielen v hematológii, ale aj v iných odboroch medicíny, ako sa líši od HSC kostnej drene ako kvantitatívne výkonnostné a kvalitatívne charakteristiky.

Zdvihový krvotvorných kmeňových buniek hmotnosť nutná pre transplantáciu sú zvyčajne získané z kostnej drene, periférnej a pupočníkovej krvi, rovnako ako embryonálnych pečene. Okrem toho, hematopoetické progenitorové bunky môžu byť získané in vitro množenie HSS a ich následné diferenciáciu do hemopoetických cielené bunkových elementov. A. Petrenko, V. Grishchenko (2003) správne poukázať na významné rozdiely imunologické vlastnosti a schopnosť obnoviť krvotvorbu GSK rôzny pôvod, nerovný pomer obsiahnuté v ich zdrojov pluripotentných čoskoro a neskôr prekurzorov kmeňových buniek v dôsledku. Okrem toho, krvotvorné kmeňové bunky, získané z rôznych zdrojov drieku, vyznačujúci sa kvantitatívne a kvalitatívne veľmi odlišné združenia non-hematopoetické bunky.

Tradičným zdrojom hematopoetických kmeňových buniek je kostná dreň. Suspenzia buniek kostnej drene sa získava z brušnej kosti alebo hrudnej kosti lúhovaním pri lokálnej anestézii. Takto získaná suspenzia je heterogénna a obsahuje zmes HSC, elementy stromálnych buniek, viazané progenitorové bunky myeloidných a lymfoidných línií a tiež zrelé krvné elementy. Počet buniek s fenotypmi CD34 + a CD34 + CD38 medzi mononukleárnymi bunkami kostnej drene je 0,5 až 3,6 a 0 až 0,5%. Periférna krv po mobilizácii HSC indukovanej G-CSF obsahuje 0,4-1,6% CD34 + a 0-0,4% CD34 + CD38.

Vyšší podiel buniek CD34 + CD38 imunofenotypoch a CD34 + pupočníkovej krvi - a 0-0.6 OD-2,6%, a ich maximálny počet je detekovaný medzi krvotvorných fetálnych pečeňových buniek - a 2,3 0,2-12,5 -35,8%.

Avšak kvalita materiálu štepu závisí nielen od množstva obsiahnutého v nej z CD34 + buniek, ale aj na ich funkčnú aktivitu, ktorá môže byť odhadnutá na základe úrovne tvorby kolónií in vivo (znovuzarybnenie drene u letálne ožiarených zvierat) a in vitro - rastu kolónií na polotuhých médiách , Bolo zistené, že tvoriacich kolónie a proliferačnej aktivita krvotvorných progenitorových buniek s fenotypom CD34 + CD38 HLA-DR, izolované z fetálnych pečene, fetálnej kostnej drene a pupočníkovej krvi, a značne prevyšuje proliferačnej kapacitu krvotvorných buniek tvoriacich kolónie z kostnej drene a periférnej krvi dospelého človeka. Kvantitatívne a kvalitatívne analýza GSK rôzneho pôvodu boli zistené významné rozdiely v ich relatívny obsah v bunkovej suspenzii, a funkčnosť. Maximálny počet CD34 + buniek (24,6%), pozorovaných v vrúbľovania materiálov získaných z fetálnej kostnej drene. Kostná dreň dospelého človeka obsahuje 2,1% CD34-pozitívnych bunkových prvkov. Medzi mononukleárnych buniek z ľudskej periférnej krvi dospelého iba 0,5% majú fenotyp CD34 +, vzhľadom k tomu, pupočníkovej krvi ich výška dosahuje 2%. Tak tvoriacich kolónie schopnosť CD34 + buniek z plodovej kostnej drene o 2,7 krát prevyšuje kapacitu klonálního rastu krvotvorné kostnej drene dospelých ľudských buniek a pupočníkovej krvi bunky tvoria podstatne väčšie kolónií než krvotvorných prvky izolované z periférnej krvi dospelých: 65,5 až 40 ° C a , 8 kolónií / 105 buniek.

Rozdiely v proliferačnej aktivitu a schopnosti tvoriť kolónie krvotvorných kmeňových buniek sú spojené nielen s rôznym stupňom zrelosti, ale aj s ich prirodzené mikroprostredie. Je známe, že intenzita proliferáciu a diferenciáciu kmeňových buniek rýchlosťou určenou integrálneho regulačný vplyv viaczložkového systému, rastových faktorov a cytokínov, ktoré sú vyrábané obom kmeňových buniek a bunkových prvkov matice-stromálny mikroprostredie. Použitie populácie purifikovaných buniek a média bez séra s ohľadom na bunkovej kultúre dáva charakterizované rastové faktory, ktoré majú stimulačné a inhibičné účinky na kmeňových buniek rôznych úrovniach, progenitorových buniek a buniek z spáchaných v určitom lineárnom smere. Výsledky týchto štúdií ukazujú, že HSC pochádzajúce zo zdrojov s rôznymi úrovňami ontogenetického vývoja, líšia tak fenotypovo aj funkčne. Pre GSK, ktoré zostávajú v skorších štádiách ontogenézy, vyznačujúce sa vysokým potenciálom pre sebaprodukciu a vysokou proliferatívnou aktivitou. Takéto bunky sa vyznačujú dlhšou dlžkou telomerov a podliehajú tvorbe všetkých hematopoetických bunkových línií. Reakcia imunitného systému na embryonálny pôvod HSC je oneskorená, pretože takéto bunky mierne exprimujú molekuly HLA. Existuje jasný gradácie relatívneho obsahu HSC a ich schopnosť k self-obnovovať a počet riadkov, ktoré tvoria typy záväzku: CD34 + bunky plodu pečeni> CD34 + bunky z pupočníkovej krvi> CD34 + buniek z kostnej drene. Je dôležité, aby tieto rozdiely nie sú jedinečné intra- a neo postanatalnomu ranom období vývoja človeka, ale aj po celej ontogenézy - proliferačnej a tvoriacich kolónie aktivita HSC odvodených z kostnej drene alebo periférnej krvi dospelého, nepriamo úmerná veku darcu.