Analýzy ľudského papilomavírusu: ako sa odovzdávať, dešifrovať

Ľudský papilomavírus je vážnym nebezpečenstvom. Diagnóza je nevyhnutná na stanovenie infekcie a rizika jej onkogenity. Takéto informácie umožňujú vytvoriť najvhodnejší a účinnejší liečebný plán.

Kvalitatívnu diagnostiku vykonáva súčasne niekoľko špecialistov. Hlavné indikácie na vyšetrenie sú:

• Aktívny sexuálny život a častá zmena sexuálnych partnerov.
• Svrbenie, pálenie v oblasti pohlavných orgánov, atypické vylučovanie.
• Vzhľad na koži a slizniciach novotvarov vo forme papilómov, bradavíc a kondylómov.

Diagnóza papilomavírusu pozostáva zo súboru laboratórnych a inštrumentálnych metód:

• Vizuálne vyšetrenie a zber anamnézy - lekár skúma lézie a otázky o tom, kedy prvé erupcie alebo iné príznaky HPV. Posudzuje vzhľad a tvar nádorov. V prítomnosti anogenitálneho rastu sa vyšetrí krčka maternice a vykoná sa uretroskopia.
• Cytológia škvŕn a škrabancov - sa vykonáva na stanovenie morfologických zmien na úrovni buniek spojených s HPV. Presnosť tejto metódy závisí od techniky odberu vzoriek a kvalifikácie laboratórnych technikov.
• Kolposkopia - vyšetrenie sliznice na identifikáciu subklinických foriem infekcie. Diagnóza sa potvrdí, ak existujú takéto faktory: leukoplakia, mozaika, punkcia, anomálna transformačná zóna.
• Biopsia je plot malého objemu postihnutého tkaniva na mikroskopické vyšetrenie. Spravidla sa vykonáva s podozrením na poškodenie krčka maternice.
• Histologické vyšetrenie - materiál odvodený z biopsie sa posiela do laboratórnej štúdie s cieľom identifikovať prekancerózne stavy a iné bunkové abnormality.
• PCR - vykonaná na identifikáciu jednotlivých druhov HPV. Na diagnostiku použite krv, moč, hlien a inú tkanivovú tekutinu.
• Digene test je jednou z najspoľahlivejších diagnostických metód. Má vysokú citlivosť na ľudský papilomavírus. Umožňuje určiť genotyp a jeho príslušnosť k vysoko onkogénnej alebo nízko-koagulogénnej skupine.

K dnešnému dňu existuje veľa metód, ktoré dokážu zistiť infekciu HPV a určiť stupeň jej agresivity.

Screening ľudského papilomavírusu

Povinná analýza pre pacientov s predispozíciou k malígnym procesom v tele je skríning. Ľudský papilomavírus tiež slúži ako zámienka na podstúpenie tohto laboratórneho testu.

Prvý screening sa odporúča pre ženy vo veku 30 rokov. Analýza je potrebná na detekciu nielen papilomavírusu, ale tiež na prevenciu erozívnych lézií krčka maternice spojených s HPV.

Najčastejšie sú pacientom pridelené takéto druhy vyšetrení:

• Na štúdiu sa použije cytologický PAP test - cervikálne škrabanie umiestnené v kvapalnom médiu. Podporuje detekciu onkologických kmeňov HPV v počiatočnom štádiu vývoja.
• Pokročilé - definuje genotypy s vysokou onkogenitou a ich koncentráciou v tele.
• Polymerázová reťazová reakcia - má vysokú diagnostickú hodnotu, pretože umožňuje identifikovať všetky typy ľudského papilomavírusu.

Screening HPV sa uskutočňuje tak pri diagnostike ochorenia, tak počas liečby, ako aj pri hodnotení výsledkov liečby.

Analýza ľudského papilomavírusu

Ak je podozrenie na papilomavírus, všetkým pacientom je predpísaný súbor diagnostických postupov. HPV test je definícia typu vírusu v laboratóriu. Na štúdiu sa používajú rôzne biologické tekutiny a tkanivá.

Najčastejšie pre analýzu vezmite tampón z genitálií. Zber materiálu z tejto oblasti je potrebný aj pri absencii vizuálnych príznakov papilomatózy. Výsledná biopsia sa skúma pod mikroskopom pre zmenené epiteliálne bunky. Diagnóza určuje typ infekcie a riziko jej onkogenity.

Povinná analýza papilomatóznej infekcie sa musí predložiť pri plánovaní tehotenstva, určiť príčiny neplodnosti a abnormality tehotenstva. V tomto prípade je analýza pridelená obom partnerom naraz. Je to spôsobené tým, že vírus je prenášaný intimnou afinitou. Na základe výsledkov štúdie môže lekár predpísať ďalšie diagnostické metódy a vypracovať liečebný režim.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11],

Kvantitatívna analýza ľudského papilomavírusu

Na identifikáciu papilomavírusu, určiť jeho typ a stupeň aktivity, sa vykonáva kvantitatívna analýza. Existuje niekoľko metód na určenie HPV:

1. Polymerázová reťazová reakcia - PCR je štandard pre diagnózu HPV. Analýza je založená na zvýšení počtu kópií vírusovej DNA v biopsii. Takáto technika umožňuje s vysokou presnosťou identifikovať aj jednotlivé typy vírusu.
2. Digene test - rysom tejto metódy je spoľahlivá detekcia genotypov so zvýšenou onkogenitou. Na analýzu sa používajú rôzne biologické tekutiny a materiály.
3. Určenie prítomnosti vírusových protilátok - analýza odhaľuje špecifické proteíny imunitného systému. Každé vírusové činidlo, ktoré vstupuje do tela, prispieva k výrobe jedinečných imunoglobulínov. Ak sa v sére nachádzajú protilátky proti ľudskému papilomavírusu, znamená to infekciu tela.

Na kvantitatívnu analýzu použite kapilárnu krv (z prsta), škrabancov z kože a slizníc, biopsie tkaniva. 12 hodín pred testom prestaňte užívať antifungálne, antivírusové, antimikrobiálne a iné lieky vrátane antikoncepčných prostriedkov. V deň diagnostikovania musíte urobiť sprchu a dôkladne umyť intímne miesta, ak sa uvoľní. Tiež 2-3 dni pred postupom by sa malo zdržať sexuálnej intimity.

Interpretáciu výsledkov poskytuje ošetrujúci lekár. Lekár zohľadňuje nielen údaje o vykonanej diagnostike, ale aj klinické prejavy ochorenia. V opačnom prípade je interpretácia výsledkov chybná.

DNA ľudského papilomavírusu, PCR

Jednou z najbežnejších a najspoľahlivejších metód detekcie DNA ľudského papilomavírusu je PCR. Rôzne biologické materiály sa používajú na uskutočnenie reťazovej reakcie polyméru: krv, moč, škvrny so sliznicami, plodová voda. Analýza umožňuje určiť prítomnosť infekcie, dokonca aj s jej latentným tokom v tele.

Princíp tejto diagnostickej metódy je založený na izolácii ľudskej a vírusovej DNA. Každá deoxyribonukleová kyselina pozostáva zo štyroch nukleotidov:

• A je adenín.
• T - tymidínu.
• G - guanín.
• C je cytozín.

Podľa pravidiel genetiky majú určitý poradie kombinácie: A + T, G + C. Všetky živé organizmy majú vlastnú DNA, ktorú možno rozlíšiť. PCR rozpoznáva fragmenty patogénnej DNA, čím izoluje patogén.

Výhody PCR:

1. Univerzálnosť - Okrem ľudského papilomavírusu sa v priebehu štúdie môže identifikovať aj mnoho ďalších patogénov infekčných chorôb.
2. Vysoká citlivosť - okrem stanovenia prítomnosti vírusu, metóda stanovuje svoj typ a ďalšie charakteristiky.
3. Účinnosť - spoľahlivo odhalí potrebnú infekciu.
4. Rýchlosť - výsledky analýzy je možné získať 24 hodín po jej odovzdaní.

Príprava na analýzu:

• Týždeň pred plánovanou analýzou by ste mali prestať užívať lieky na kontrolu rakoviny, pretože môžu skresľovať výsledky.
• Štúdia sa nevykonáva počas menštruácie a do 3 dní po nej.
• Dva dni pred testom by ste mali vylúčiť sex.
• Diagnóza sa vykoná na prázdny žalúdok, posledné jedlo má byť 12 hodín pred analýzou. Ale môžete piť vodu.
• V deň podania PCR na HPV sa neodporúča vykonať hygienické postupy a ísť na toaletu malým spôsobom dve hodiny pred odobratím materiálu.

Lekár by mal rozlíšiť získané výsledky. Index na 3 Lg je nepodstatná koncentrácia pôvodcu, 3-5 Lg je klinicky významná koncentrácia a viac ako 5 Lg je vysoká koncentrácia. Normálne by mali byť všetky kvantitatívne tituly negatívne. Ale negatívne výsledky neznamenajú vždy neprítomnosť ochorenia. Často sa to prejavuje pri nízkych koncentráciách vírusu v tele a keď je potlačená imunitným systémom.

Napriek všetkým výhodám má PCR niekoľko nevýhod. Analýza by sa mala robiť len v modernej laboratóriu, aby sa predišlo získaniu falošných výsledkov. Osobitná pozornosť by sa mala venovať prevzatiu materiálu. Iba lekár by mal výsledky rozlíšiť, pretože po nedávnej liečbe infekcie sa môžu vyskytnúť pozitívne výsledky.

Škrabanie na ľudský papilomavírus

Na identifikáciu genitálnej infekcie HPV u mužov sa vykonáva škrabanie, teda Digene-test. Materiál sa odoberá z uretrálneho kanála so špeciálnym štetcom, v niektorých prípadoch sa tkanivá odoberajú z penisu. Pred vykonaním testu musíte urobiť sprchu a dôkladne sa umyť. Porušenie osobnej hygieny negatívne ovplyvňuje výsledky analýzy.

U žien sa škrabanie odoberá z krčka maternice s podozrením na dyspláziu, eróziu a iné patologické procesy spôsobené HPV. Na prevzatie materiálu lekár odoberie vaginálny výtok a vloží malý kefák do orgánu a posúva sa okolo osi v cervikálnom kanáli. Po všetkých manipuláciách je kefa umiestnená do skúmavky s médiom a poslaná do laboratória.

Prijaté materiály sa posielajú na diferenciálnu diagnostiku pomocou PCR, cytologické vyšetrenie sa nevykonáva. Výsledky sú pripravené 2-3 dni po analýze. Získané údaje predstavujú úplné informácie o type vírusu, jeho karcinogenite a množstve ďalších faktorov priebehu ochorenia. Ak sú výsledky nesprávne, štúdia sa opäť uskutoční. Opakované skríningové vyšetrenie je potrebné v čase liečby a po liečbe na určenie jeho účinnosti.

Tampón ľudského papilomavírusu

Ak sa pri gynekologickom vyšetrení v genitálnej oblasti zistí bradavica alebo kondylóm, lekár urobí Papový náter. Lekár vykoná špeciálny štetec na postihnuté tkanivá. Roztok sa odoberá z maternicového krčného kanálu u žien az uretra u mužov. Zozbieraná biopsia sa posiela do laboratória na štúdium.

Priraďte takéto typy škvŕn na podozrenie na ľudský papilomavírus:

• PCR - odhaľuje infekciu DNA. Pre túto analýzu sa škrabanie uskutočňuje v močovej trubici u mužov, v pošve a v cervikálnom kanáli u žien. Môžu sa použiť aj spermie alebo moč.
• Digene testovanie je štúdium zozbieraného materiálu na molekulárnej úrovni. Testovanie je súčasne diferenciáciou dvoch skupín papilomavírusov - s vysokou a nízkou onkogenitou.

Uvedené štúdie klasifikujú výsledky do 5 typov:

1. Absencia abnormálnych buniek.
2. Prítomnosť zmenených buniek v dôsledku zápalového procesu.
3. Minimálny počet buniek s atypickou štruktúrou.
4. Zhubné bunky.
5. Veľké množstvo onkogénnych buniek.

K dispozícii je aj klasifikácia podľa systému Bethesda. Skladá sa z ukazovateľov nízkych a vysokých stupňov zmeny. V tomto prípade je interpretácia náteru reprezentovaná nasledujúcimi údajmi:

• NILM je normálny epitel.
• ASCUS - zmenené bunky v dôsledku dysplázie, zápalu, sexuálnej infekcie alebo HPV.
• ASC-H - abnormality v štruktúre dlaždicového epitelu. Tento výsledok poukazuje na skoré štádiá onkológie alebo ťažkej dysplázie.
• LSIL - v škvrne je malý počet zmenených buniek. Označuje dyspláziu alebo papilomavírus.
• HSIL - významné zmeny epitelu. Závažná dysplázia a výrazná onkológia. Ak tento výsledok zostane bez pozornosti, potom u 7% pacientov o 3-5 rokov neskôr vznikne malígne ochorenie.
• AGC je atypický žľazový epitel. Vyskytuje sa u rakoviny maternice alebo dysplázie.
• AIS - počiatočné fázy onkológie.
• Kvalitný karcinóm SIL-dlaždicových buniek.

Z zvolenej metódy výskumu závisí rýchlosť získania výsledkov náteru. Spravidla je dešifrovanie pripravené za 2-3 dni.

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20],

Protilátky proti ľudskému papilomavírusu

Na detekciu protilátok proti HPV je indikovaný enzymatický imunotest. Princíp tejto štúdie pri určovaní prítomnosti imunoglobulínov na infekčné činidlo. Diagnóza pomocou ELISA indikuje imunitnú odpoveď tela na vírus. V závislosti od detegovaných protilátok sa rozlišujú nasledovné štádiá ochorenia:

• IgM - akútne.
• IgG - chronické alebo zotavenie.
• IgA - recidíva chronickej infekcie.

Výsledky testu na protilátky sú pripravené do 1-3 dní po ich odobratí. Pri dešifrovaní výsledkov je potrebné mať na pamäti, že ľudský papilomavírus môže byť nepriamou stopou, a preto overiť prítomnosť infekcie, PCR a iné testy. Okrem toho metóda ELISA nevytvára genotyp alebo riziko karcinogénnosti vírusu.

[21], [22], [23], [24], [25], [26], [27], [28], [29], [30],