Antibiotická odolnosť mikroorganizmov: metódy určovania

Antibiotiká - jeden z najväčších úspechov lekárskej vedy, ktorý každoročne šetrí životy desiatok a stoviek tisíc ľudí. Avšak, ako hovorí múdrosť, stará žena má aj erudíciu. Čo predtým zabili patogénne mikroorganizmy, dnes nefunguje tak, ako to bolo. Takže aký je dôvod: zhoršili sa antimikrobiálne účinky alebo z dôvodu odolnosti voči antibiotikám?

Stanovenie rezistencie voči antibiotikám

Antimikrobiálne látky (APM), ktoré sa nazývajú antibiotiká, boli pôvodne vytvorené na boj proti bakteriálnej infekcii. A vzhľadom na skutočnosť, že rôzne ochorenia nemôžu spôsobiť zoskupenie viacerých druhov baktérií, bol pôvodne uskutočnený vývoj liekov účinných proti určitej skupine infekčných agens.

Ale baktérie, hoci najjednoduchšie, ale aktívne sa rozvíjajúce organizmy, nakoniec získavajú čoraz viac nových vlastností. Inštinkt sebazáchovy a schopnosť prispôsobiť sa rôznym životným podmienkam spôsobuje, že patogénne mikroorganizmy sú silnejšie. V reakcii na ohrozenie života začnú samy o sebe vyvíjať schopnosť odolávať, zdôrazňujúc tajomstvo, ktoré oslabuje alebo úplne neutralizuje účinok účinnej látky antimikrobiálnych látok.

Ukázalo sa, že akonáhle účinné antibiotiká jednoducho prestávajú plniť svoju funkciu. V tomto prípade hovorí o vývoji rezistencie voči tomuto lieku proti antibiotikám. A to tu nie je vôbec účinnosť účinnej látky AMP, ale mechanizmy na zlepšenie patogénnych mikroorganizmov, prostredníctvom ktorých sa baktérie nestanú citlivé na antibiotiká určené na boj proti nim.

Takže odolnosť voči antibiotikám nie je nič iné ako zníženie náchylnosti baktérií na antimikrobiálne lieky, ktoré boli vytvorené na ich zničenie. Z tohto dôvodu sa zdá, že liečba správne vybraných prípravkov neposkytuje očakávané výsledky.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Problém antibiotickej rezistencie

Nedostatok antibiotickej terapie, spojenej s rezistenciou na antibiotiká, vedie k tomu, že ochorenie pokračuje v pokročení a mení sa na ťažšiu formu, ktorej liečba sa stáva ešte zložitejšou. Obzvlášť nebezpečné sú prípady, keď bakteriálna infekcia postihuje životne dôležité orgány: srdce, pľúca, mozog, obličky atď., Pretože v tomto prípade je oneskorenie smrti podobné.

Druhým nebezpečenstvom je, že niektoré choroby s chronickou antibiotickou terapiou sa môžu stať chronickými. Osoba sa stáva nosičom zlepšených mikroorganizmov odolných voči antibiotikám určitej skupiny. Teraz je zdrojom infekcie, bojuje proti tomu, že staré metódy strácajú zmysel.

To všetko tlačí farmaceutickú vedu na vynález nových, účinnejších prostriedkov s inými účinnými látkami. Ale tento proces opäť prechádza vývojom antibiotickej rezistencie na nové lieky z kategórie antimikrobiálnych látok.

Ak sa niekto domnieva, že problém antibiotickej rezistencie vznikol pomerne nedávno, je veľmi mylný. Tento problém je starý ako svet. No, možno nie toľko, a napriek tomu je už 70-75 rokov. Podľa všeobecne uznávanej teórie sa objavilo spolu s uvedením prvých antibiotík do lekárskej praxe niekedy v 40. Rokoch 20. Storočia.

Aj keď existuje koncepcia skoršieho objavenia problému odolnosti mikroorganizmov. Pred príchodom antibiotík tento problém nebol špecificky riešený. Je tak prirodzené, že baktérie, rovnako ako iné živé veci, sa pokúšali prispôsobiť nepriaznivým podmienkam prostredia, urobili to vlastnou cestou.

Problém rezistencie patogénnych baktérií sa spomalil, keď sa objavili prvé antibiotiká. Avšak otázka nebola taká dôležitá. V tej dobe, aktívne riadil vývoj rôznych skupín antibiotík, ktoré sú v niektorých ohľadoch bola spôsobená nepriaznivú politickú situáciu vo svete, vojny, kedy vojaci zomrel na následky zranení a sepsa len preto, že nemohla poskytnúť účinnú pomoc kvôli nedostatku liekov. Len tieto drogy zatiaľ neexistovali.

Najväčší vývoj sa uskutočnil v 50-60 rokoch dvadsiateho storočia av priebehu nasledujúcich 2 desaťročí sa uskutočnilo ich zlepšenie. Pokrok v tejto oblasti sa neskončil, ale od 80. Rokov sa vývoj v oblasti antibakteriálnych látok výrazne znížil. Vine, či k veľkým nákladom na podnikanie (vývoj a výrobu nového produktu v našej dobe je už na hranici v USA 800 miliónov $), alebo jednoduché nedostatok nových nápadov pre "militantné" účinné látky inovačných liekov, ale v súvislosti s problémom rezistencie voči antibiotikám za na novú hrozivú úroveň.

Počas vývoja sľubných AMP a vytvárania nových skupín takýchto liekov vedci dúfali, že porazia viaceré typy bakteriálnych infekcií. Ale všetko sa ukázalo byť nie tak jednoduché "vďaka" antibiotickej rezistencii, ktorá sa v jednotlivých baktériách vyvíja pomerne rýchlo. Nadšenie sa postupne vysychá, ale problém zostáva dlho nevyriešený.

Zostáva nejasné, ako môžu mikroorganizmy vyvinúť odpor voči liekom, ktoré by ich mali teoreticky zabiť? Tu je potrebné pochopiť, že "zabíjanie" baktérií sa vyskytuje iba vtedy, keď sa liek používa na určený účel. A čo vlastne máme?

Príčiny rezistencie voči antibiotikám

Tu sa dostávame k hlavnej otázke, kto je na vine, že baktérie, keď sú vystavené antibakteriálnych látok neumierajú, a úplne zvrhlé tým, že získa nové vlastnosti, ktorá nie je v rukách ľudstva? Čo vyvoláva také zmeny, ku ktorým dochádza s mikroorganizmami, ktoré sú príčinou mnohých chorôb, s ktorými ľudstvo bojuje viac ako desať rokov?

Je zrejmé, že skutočnou príčinou vývoja rezistencie voči antibiotikám je schopnosť živých organizmov prežiť v rôznych podmienkach a prispôsobovať sa ich rôznymi spôsobmi. Ale schopnosť vyhnúť sa smrteľnej projektilu tvárou v tvár antibiotiku, ktorá by teoreticky mala preniesť smrť na ne, baktérie nie. Tak ako sa ukáže, že nielenže prežijú, ale zlepšujú sa spolu so zlepšením farmaceutických technológií?

Malo by sa chápať, že ak existuje problém (v našom prípade vývoj antibiotickej rezistencie v patogénnych mikroorganizmoch), potom existujú provokatívne faktory, ktoré vytvárajú podmienky pre to. Práve v tejto veci sa teraz snažíme pochopiť.

[7], [8], [9], [10], [11],

Faktory vývoja rezistencie voči antibiotikám

Keď osoba príde k lekárovi so sťažnosťami na svoje zdravie, očakáva kvalifikovanú pomoc špecialistu. Pokiaľ ide o infekciu dýchacích ciest alebo iných bakteriálnych infekcií, lekársky úlohou je predpísať účinné antibiotikum, ktoré neumožní priebeh ochorenia a určiť dávku potrebnú na tento účel.

Výber liekov u lekára je dosť veľký, ale ako presne určiť drogu, ktorá skutočne pomáha zvládnuť infekciu? Na jednej strane, aby sa zdôvodnil vymenovanie antimikrobiálneho lieku, je potrebné najprv určiť typ patogénu podľa etiotropického konceptu výberu lieku, ktorý sa považuje za najpravdepodobnejší. Na druhej strane to môže trvať až 3 alebo viac dní, zatiaľ čo najdôležitejšou podmienkou pre úspešné vyliečenie sa považuje včasná liečba v počiatočných štádiách ochorenia.

Lekár nemá po vykonaní diagnózy nič, čo by malo robiť v prvých dňoch náhodne, aby sa nejako spomalilo ochorenie a zabránilo jeho šíreniu do iných orgánov (empirický prístup). Pri vymenovaní ambulantnej liečby praktik vychádza z predpokladu, že niektoré baktérie môžu byť príčinou konkrétnej choroby. To je dôvod pre prvú voľbu lieku. Účel sa môže líšiť v závislosti od výsledkov testu na patogén.

A je dobré, ak je lekárska vymenovanie potvrdená výsledkami testov. V opačnom prípade sa stratí nielen čas. Záležitosť spočíva v tom, že pre úspešnú liečbu existuje ešte jedna nevyhnutná podmienka - úplná deaktivácia (v lekárskej terminológii existuje koncepcia "irradikácie") patogénnych mikroorganizmov. Ak sa tak nestane, prežívajúci mikróbov jednoducho "ochorí" a vytvoria určitú imunitu voči účinnej látke antimikrobiálnej drogy, ktorá spôsobila ich "chorobu". To je rovnako prirodzené ako produkcia protilátok v ľudskom tele.

Takže v prípade, že antibiotiká je vybraná správne, alebo budú neúčinné dávkovací režim a dávka, patogénne mikroorganizmy nemôže byť stratená, a mutovať alebo získavať pre nich zvláštne bolo predtým možné. Chov, tieto baktérie tvoria celú populáciu kmeňov rezistentných voči antibiotikám konkrétnej skupiny, t.j. Baktérie odolné voči antibiotikám.

Ďalším faktorom, ktorý nepriaznivo ovplyvňuje citlivosť patogénnych mikroorganizmov na antibakteriálne lieky, je použitie AMP v chove zvierat av veterinárnom lekárstve. Používanie antibiotík v týchto oblastiach nie je vždy odôvodnené. Navyše definícia ochorenia vo väčšine prípadov, patogén nie je vykonaná alebo vykonáva neskoro, pretože antibiotiká liečiť v podstate zvieratá celkom vážnom stave, keď je to všetko o čase a čakať na výsledky testov nie je možné. A v obci veterinári nie vždy majú túto príležitosť, takže koná "slepo".

Ale to by nebolo nič, len je tu ďalší veľký problém - ľudská mentalita, keď každý je doktorom pre seba. Navyše rozvoj informačnej technológie a možnosť nákupu väčšiny antibiotík bez lekárskeho predpisu len zhoršujú tento problém. A ak vezmeme do úvahy, že máme viac ako nekvalifikovaných lekárov, ktorí sa samy vyučujú, než tí, ktorí striktne dodržiavajú predpisy a odporúčania lekára, problém získa globálny rozmer.

V našej krajine sa situácia zhoršuje tým, že väčšina ľudí zostáva finančne bankrotom. Nemajú možnosť nakupovať účinné, ale drahé lieky novej generácie. V tomto prípade nahrádzajú vymenovanie lekára za lacnejšie staré analógy alebo lieky, ktoré odporúča najlepší priateľ alebo všadeprítomný priateľ.

"Pomohlo mi to a pomôžem vám!" - Môžete sa s tým pokúsiť, ak to slová zaznievajú z pery blížneho, ktorý zvládol bohatý životný zážitok, ktorý prešiel vojnou? A málo ľudí si myslí, že vďaka takým dobre prečítaným a dôveryhodným patogénnym mikroorganizmom sa dlho prispôsobili, aby prežili pod pôsobením liekov odporúčaných v skorších časoch. A čo pomohlo dedokovi pred 50 rokmi, môže byť v našich časoch neúčinné.

A čo môžeme povedať o reklame a nevysvetliteľnej túžbe niektorých ľudí pokúsiť sa o inovácie na seba, akonáhle sa ukáže príznakom vhodné ochorenie. A prečo všetci títo lekári, ak existujú také nádherné drogy, o ktorých sa dozvedáme z novín, televíznych obrazoviek a internetových stránok. Iba text o samoliečbe už je tak nuda, že len málo ľudí to teraz venuje pozornosť. A veľmi márne!

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20],

Mechanizmy rezistencie voči antibiotikám

Nedávno sa antibiotická rezistencia stala problémom číslo jedna vo farmakologickom priemysle, ktorý vyvíja antimikrobiálne látky. Ide o to, že je súčasťou takmer všetkých známych druhov baktérií, takže antibiotická terapia sa stáva menej účinnou. Tieto spoločné patogény, ako sú Staphylococcus, Escherichia a Pseudomonas aeruginosa, Proteus majú odolné kmene, ktoré sú distribuované cez ich predchodcov vystavených na antibiotiká.

Odolnosť voči rôznym skupinám antibiotík a dokonca aj jednotlivým liekom sa vyvíja rôznymi spôsobmi. Starý dobrý penicilín a tetracyklíny, ako aj nový vývoj v podobe cefalosporínov a aminoglykozidov sú charakterizované pomalého rozvoja rezistencie k antibiotikám, a to súbežne s týmito poklesy a ich terapeutický účinok. Čo sa nedá povedať o takýchto liečivách, ktorých účinná látka je streptomycín, erytromycín, rifampicín a linkomycín. Odolnosť proti týmto liekom sa vyvíja rýchlym tempom, v súvislosti s ktorým sa menovanie musí zmeniť aj počas liečby bez toho, aby čakalo na jeho ukončenie. To isté platí pre prípravky oleandomycínu a fusidínu.

To všetko dáva dôvody predpokladať, že mechanizmy vývoja rezistencie voči rôznym liekom proti antibiotikám sú výrazne odlišné. Pokúsme sa pochopiť, ktoré vlastnosti baktérií (prirodzené alebo získané) neumožňujú antibiotikám produkovať ich ožarovanie, ako bolo pôvodne koncipované.

Najprv zistíme, že rezistencia baktérie môže byť prirodzená (na začiatku jej boli poskytnuté ochranné funkcie) a získané, o čom sme diskutovali vyššie. Až do teraz sme sa hlavne hovorí o skutočnom rezistenciu voči antibiotikám, spojené s funkciou mikroorganizmu, nie nesprávnou voľbou alebo vymenovaním drogy (v tomto prípade hovoríme o falošnom rezistenciu voči antibiotikám).

Každá živá bytosť, vrátane najjednoduchšej, má svoju vlastnú jedinečnú štruktúru a niektoré vlastnosti, ktoré jej umožňujú prežiť. Všetko toto je geneticky stanovené a prenášané z generácie na generáciu. Prírodná rezistencia voči špecifickým aktívnym látkam z antibiotík je taktiež stanovená geneticky. A pri rôznych typoch baktérií je rezistencia zameraná na určitý typ liečiv, čo je dôvod, prečo je spojený vývoj rôznych skupín antibiotík ovplyvňujúcich určitý druh baktérií.

Faktory, ktoré spôsobujú prirodzený odpor, môžu byť odlišné. Napríklad štruktúra proteínovej membrány mikroorganizmu môže byť taká, že antibiotikum sa s ňou nemôže vyrovnať. Avšak antibiotiká môžu byť ovplyvnené iba proteínovou molekulou, ničiť ju a spôsobiť smrť mikroorganizmu. Vývoj účinných antibiotík zahŕňa zohľadnenie štruktúry proteínov baktérií, proti ktorým je účinok lieku nasmerovaný.

Napríklad antibiotická rezistencia stafylokokov na aminoglykozidy je spôsobená tým, že tieto nemôžu preniknúť do mikrobiálnej membrány.

Celý povrch mikróbu je pokrytý receptormi, niektoré typy sú spojené s AMP. Malý počet vhodných receptorov alebo ich úplná absencia vedie k skutočnosti, že neexistuje viazanie, a preto neexistuje antibakteriálny účinok.

Medzi inými receptormi existujú tie, ktoré pre antibiotikum slúžia ako druh majáka signalizujúci umiestnenie baktérií. Neprítomnosť takýchto receptorov umožňuje mikroorganizmu skryť sa pred nebezpečenstvom vo forme AMP, čo je akýmsi druhom maskovania.

Niektoré mikroorganizmy majú prirodzenú schopnosť aktívne odoberať AMP z bunky. Táto schopnosť sa nazýva effluksom a charakterizuje rezistenciu Pseudomonas aeruginosa voči karbapenémom.

Biochemický mechanizmus rezistencie voči antibiotikám

Okrem prírodných mechanizmov vývoja rezistencie na antibiotiká uvedených vyššie, existuje ešte jedna, ktorá nesúvisí so štruktúrou bakteriálnej bunky, ale s jej funkčnosťou.

Skutočnosť, že v tele baktérií je možné produkovať enzýmy, ktoré môžu mať negatívny účinok na molekuly účinnej látky AMP a znížiť jej účinnosť. Baktérie pri interakcii s takýmto antibiotikom tiež trpia, ich účinok je výrazne oslabený, čo vytvára vzhľad liečby infekcie. Napriek tomu pacient zostáva nositeľom bakteriálnej infekcie po nejakú dobu po takzvanom "zotavení".

V tomto prípade ide o modifikáciu antibiotika, v dôsledku čoho sa stáva neaktívnym vzhľadom na tento druh baktérií. Enzýmy produkované rôznymi typmi baktérií sa môžu líšiť. Stafylokok je charakterizovaný syntézou beta-laktamázy, ktorá spôsobuje prasknutie laktámového kruhu antibiotík série penicilínov. Vývoj acetyltransferázy môže vysvetliť rezistenciu voči gram-negatívnym baktériám chloramfenikolu atď.

[21], [22], [23]

Získaná rezistencia voči antibiotikám

Baktérie, podobne ako iné organizmy, nie sú vývojom cudzie. V reakcii na "vojenské" akcie proti nim môžu mikroorganizmy zmeniť svoju štruktúru alebo začať syntetizovať toľko enzýmovej látky, ktorá môže nielen znížiť účinnosť lieku, ale tiež ju úplne zničiť. Napríklad aktívna produkcia alanín transferázy spôsobuje, že "Cycloserine" je neúčinný proti baktériám, ktoré ju produkujú vo veľkých množstvách.

Antibiotická rezistencia sa tiež môže vyvinúť vďaka modifikácii bunkovej štruktúry proteínu, ktorá je tiež jej receptorom, ku ktorému by sa mohol viazať AMP. Tj tento druh proteínu môže chýbať v bakteriálnom chromozóme alebo meniť jeho vlastnosti, v dôsledku čoho je spojenie medzi baktériou a antibiotikom nemožné. Napríklad strata alebo modifikácia proteínu viažuceho penicilín spôsobuje necitlivosť na penicilíny a cefalosporíny.

V dôsledku vývoja a aktivácie ochranných funkcií v baktériách predtým náchylných na deštruktívny účinok konkrétneho typu antibiotík sa mení permeabilita bunkovej membrány. To sa môže dosiahnuť znížením kanálov, cez ktoré môžu účinné látky AMP prenikať do bunky. Tieto vlastnosti sú spôsobené necitlivosťou streptokokov na beta-laktámové antibiotiká.

Antibiotiká môžu ovplyvniť bunkový metabolizmus baktérií. Ako odpoveď sa niektoré mikroorganizmy naučili robiť bez chemických reakcií, ktoré sú ovplyvnené antibiotikom, čo je tiež samostatný mechanizmus na rozvoj rezistencie voči antibiotikám, čo si vyžaduje neustále sledovanie.

Niekedy baktérie idú na určitý trik. Spojením s hustou látkou sa zjednocujú v spoločenstvách nazývaných biofilmy. V rámci komunity sú menej citliví na antibiotiká a môžu bezpečne tolerovať dávku zabíjajúcu jednu baktériu, ktorá žije mimo "kolektívu".

Ďalšou možnosťou je kombinovať mikroorganizmy do skupín na povrchu polokvapalného média. Dokonca aj po rozdelení buniek zostáva časť bakteriálnej "rodiny" v "skupine", ktorá nemôže byť ovplyvnená antibiotikami.

[24], [25], [26], [27], [28], [29], [30]

Gény antibiotickej rezistencie

Existujú pojmy genetickej a nedogénnej rezistencie voči liekom. V druhom prípade ide o baktérie s neaktívnym metabolizmom, ktoré nie sú náchylné k násobeniu za normálnych podmienok. Takéto baktérie môžu vyvinúť antibiotickú rezistenciu voči určitým typom liekov, napriek tomu táto schopnosť nie je prenášaná na ich potomstvo, pretože nie je geneticky inkorporovaná.

To je charakteristické pre patogénne mikroorganizmy, ktoré spôsobujú tuberkulózu. Osoba sa môže infikovať a nie je podozrivá z tejto choroby už mnoho rokov, kým imunita z nejakého dôvodu nebude zlyhať. Toto je spúšť pre násobenie mykobaktérií a progresiu ochorenia. Avšak všetky tie isté lieky sa používajú na liečbu tuberkulózy, bakteriálne potomstvo zostáva na ne citlivé.

To isté platí aj so stratou proteínov v bunkovej stene mikroorganizmov. Pamätajte si znovu na baktérie, ktoré sú citlivé na penicilín. Penicilíny inhibujú syntézu proteínu, ktorý slúži na vytvorenie bunkovej membrány. Pod vplyvom AMP penicilínové série môžu mikroorganizmy stratiť bunkovú stenu, ktorej stavebným materiálom je proteín viažuci penicilín. Takéto baktérie sa stávajú odolné voči penicilínom a cefalosporínom, s ktorými teraz nemajú nič spoločné. Tento jav je dočasný, nesúvisí s mutáciou génov a prenosom mutovaného génu dedením. Vzhľadom na vzhľad bunkovej steny, ktorá je charakteristická pre predchádzajúce populácie, antibiotická rezistencia v takýchto baktériách zmizne.

Genetická rezistencia voči antibiotikám sa vyskytuje, keď sa zmeny v bunkách a metabolizmus v nich vyskytujú na úrovni génu. Mutácie génov môžu spôsobiť zmeny v štruktúre bunkovej membrány, vyvolávať produkciu enzýmov, ktoré chránia baktérie pred antibiotikami a tiež meniť počet a vlastnosti receptorov bakteriálnej bunky.

Existujú dva spôsoby vývoja udalostí: chromozomálny a extrachromozomálny. Ak nastane génová mutácia na tej časti chromozómu, ktorá je zodpovedná za citlivosť na antibiotiká, hovoria o chromozomálnej rezistencii voči antibiotikám. Samotná takáto mutácia sa vyskytuje extrémne zriedkavo, zvyčajne spôsobuje účinky liekov, ale opäť nie vždy. Je veľmi ťažké tento proces kontrolovať.

Chromozomálne mutácie sa môžu prenášať z generácie na generáciu, postupne vytvárajúce určité kmene (odrody) baktérií rezistentných voči jednému alebo inému antibiotiku.

Záchvaty extrachromozomálnej rezistencie voči antibiotikám sú genetické prvky, ktoré existujú mimo chromozómov a nazývajú sa plazmidy. Tieto prvky obsahujú gény zodpovedné za produkciu enzýmov a priepustnosť bakteriálnej steny.

Antibiotická rezistencia je najčastejšie výsledkom horizontálneho prenosu génu, keď niektoré baktérie prenášajú niektoré gény na iné, ktoré nie sú ich potomkami. V genóme patogénu (veľkosť 1 v 108 pre jeden proces kopírovania DNA materskej bunky, ktorá sa pozoruje pri replikácii chromozómov) sa však môžu pozorovať niekedy nepripojené bodové mutácie.

Takže na jeseň roku 2015 vedci z Číny popísali gén MCR-1, ktorý sa našiel v bravčovom mäse a črevách ošípaných. Funkciou tohto génu je možnosť jeho prenosu do iných organizmov. Po chvíli sa ten istý gén našiel nielen v Číne, ale aj v iných krajinách (USA, Anglicko, Malajzia, európske krajiny).

Gény rezistencie voči antibiotikám sú schopné stimulovať produkciu enzýmov, ktoré neboli predtým produkované v tele baktérií. Napríklad enzým NDM-1 (kovová beta-laktamáza 1), ktorý sa našiel v baktériách Klebsiella pneumoniae v roku 2008. Spočiatku to bolo zistené u baktérií z Indie. V nasledujúcich rokoch bol však v iných krajinách (Veľká Británia, Pakistan, USA, Japonsko, Kanada) detegovaný enzým, ktorý poskytuje rezistenciu voči väčšine AMP voči antibiotikám.

Patogénne mikroorganizmy môžu byť rezistentné voči určitým liečivám alebo skupinám antibiotík, ako aj rôznym skupinám liečiv. Existuje taká vec ako krížová rezistencia voči antibiotikám, keď sú mikroorganizmy necitlivé na lieky s podobnou chemickou štruktúrou alebo mechanizmom pôsobenia na baktérie.

Antibiotická rezistencia stafylokokov

Stafylokoková infekcia sa považuje za jednu z najčastejších infekcií získaných v komunite. Avšak aj v nemocnici na povrchu rôznych objektov je možné odhaliť približne 45 rôznych kmeňov stafylokokov. To naznačuje, že boj proti tejto infekcii je takmer prvou prioritou zdravotníckych pracovníkov.

Obtiažnosť tejto úlohy je, že väčšina kmeňov väčšiny patogénnych stafylokokov Staphylococcus epidermidis a Staphylococcus aureus sú odolné voči mnohých typov antibiotík. A počet takýchto kmeňov rastie každý rok.

Schopnosť stafylokokov k mnohým genetickým mutáciám, v závislosti od podmienok prirodzeného prostredia, spôsobuje, že sú prakticky nezraniteľné. Mutácie sa prenášajú na potomkov a v krátkej dobe existujú celé generácie infekčných agens odolných voči antimikrobiálnym prípravkom z rodu Staphylococci.

Najväčším problémom - to je stafylokoky rezistentné kmene, ktoré sú rezistentné nielen k beta-laktámy (β-laktámové antibiotiká: niektoré podskupiny penicilínov, cefalosporínov, karbapenémov a monobaktamom), ale aj ďalšie druhy ILA: tetracyklíny, makrolidy, linkozoamidy, aminoglykozidy, fluorochinolóny, chloramfenikol.

Po dlhú dobu môže byť infekcia zničená iba pomocou glykopeptidov. V súčasnosti sa rieši problém antibiotickej rezistencie takýchto kmeňov stafylokokov pomocou nového typu AMP - oxazolidinónov, ktorého jasným predstaviteľom je linezolid.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Metódy na stanovenie rezistencie voči antibiotikám

Pri vytváraní nových antibakteriálnych liekov je veľmi dôležité jasne definovať jeho vlastnosti: ako fungujú a aké baktérie sú účinné. To možno určiť len laboratórnym výskumom.

Analýza rezistencie na antibiotiká sa môže uskutočniť pomocou rôznych metód, z ktorých najpopulárnejší sú:

• Diskovej metódy alebo difúzie AMP v agare podľa Kirby-Bayer
• Spôsob sériového riedenia
• Genetická identifikácia mutácií, ktoré spôsobujú rezistenciu voči lieku.

Prvá doterajšia metóda sa považuje za najbežnejšiu z dôvodu lacnosti a jednoduchosti vykonania. Podstata metódy diskov je, že kmene baktérií izolovaných v dôsledku výskumu sa umiestnia do živného média dostatočnej hustoty a pokryjú sa impregnovaným roztokom AMP s papierovými kotúčmi. Koncentrácia antibiotika na diskoch je odlišná, takže keď liek difunduje do bakteriálneho média, môže byť pozorovaný koncentračný gradient. Pri veľkosti zóny neprastu mikroorganizmov je možné posúdiť aktivitu prípravku a vypočítať účinnú dávku.

Variantom metódy disku je E-test. V tomto prípade sa namiesto diskov používajú polymérne platne, na ktoré sa aplikuje určitá koncentrácia antibiotika.

Nevýhodou týchto metód je nepresnosť výpočtov spojených so závislosťou koncentračného gradientu na rôznych podmienkach (hustota média, teplota, kyslosť, obsah vápnika a horčíka atď.).

Spôsob sériového riedenia je založený na vytvorení niekoľkých variantov kvapalného alebo hustého média obsahujúceho rôzne koncentrácie testovacieho prípravku. Každý z variantov je osídlený určitým množstvom študovaného bakteriálneho materiálu. Na konci inkubačného obdobia sa odhaduje rast baktérií alebo jeho absencia. Táto metóda vám umožňuje určiť minimálnu účinnú dávku lieku.

Metóda môže byť zjednodušená tým, že sa ako vzorka odoberú iba 2 médiá, ktorých koncentrácia bude čo najbližšie k minimu potrebnému na inaktiváciu baktérií.

Metóda sériového riedenia sa správne považuje za zlatý štandard na stanovenie rezistencie voči antibiotikám. Ale kvôli vysokým nákladom a pracovitosti, nie je vždy možné použiť v domácej farmakológii.

Spôsoby identifikácie mutácií poskytnúť informácie o prítomnosti určitého kmeňa baktérií mutovaných génov, ktoré prispievajú k rozvoju odolnosti voči antibiotikám na konkrétne lieky, a preto nastať situácia, organizovať na základe podobnosti fenotypovej prejavy.

Táto metóda sa vyznačuje vysokými nákladmi testovacích systémov na jej implementáciu, avšak jeho hodnota pre predikciu genetických mutácií baktérií je nepopierateľná.

Bez ohľadu na to, aké účinné sú vyššie uvedené metódy testovania rezistencie na antibiotiká, nemôžu plne odrážať obraz, ktorý sa rozvíja v živom tele. A ak berieme do úvahy skutočnosť, že organizmus každej osoby je individuálny, procesy distribúcie a metabolizmu liekov sa môžu v ňom vyskytovať inak, experimentálny obraz je veľmi vzdialený skutočnému.

Spôsoby na prekonanie odolnosti voči antibiotikám

Bez ohľadu na to, aké dobré je toto alebo toto liečivo, ale s postojom k liečbe, ktorý máme, nemožno vylúčiť, že v určitom okamihu sa môže zmeniť citlivosť patogénnych mikroorganizmov. Vytvorenie nových liekov s rovnakými účinnými látkami tiež nerieši problém antibiotickej rezistencie. A na nové generácie liekov sa postupne oslabuje citlivosť mikroorganizmov s častými neoprávnenými alebo nesprávnymi vymenovaniami.

Prelom v tomto ohľade je považovaný za vynález kombinovaných prípravkov, ktoré sa nazývajú chránené. Ich použitie je opodstatnené pre baktérie, ktoré produkujú deštruktívne enzýmy pre bežné antibiotiká. Ochrana populárne antibiotiká vykonanej zaradenie nového lieku špeciálnych prostriedkov (napríklad, inhibítory enzýmov, nebezpečných pre určitý typ ILA) sú orezané produkcii týchto enzýmov zabraňuje baktérie a odstránenie liečivá z bunky pomocou membránového čerpadla.

Ako inhibítory beta-laktamáz sa zvyčajne používa kyselina klavulanová alebo sulbaktam. Pridávajú sa v beta-laktámových antibiotikách, čo zvyšuje ich účinnosť.

V súčasnej dobe vývoj liekov, ktoré môžu ovplyvniť nielen jednotlivé baktérie, ale aj tie, ktoré sa zlúčili do skupín. Boj proti baktériám v biofilme sa môže uskutočniť iba po jeho deštrukcii a uvoľnení organizmov, ktoré boli predtým spojené chemickými signálmi. Pokiaľ ide o možnosť deštrukcie biofilmu, vedci uvažujú o takej forme liekov, ako sú bakteriofágy.

Boj proti iným bakteriálnym "zoskupeniam" sa uskutočňuje prenesením do kvapalného média, kde mikroorganizmy začínajú existovať oddelene a teraz je možné bojovať s konvenčnými liekmi.

Tvárou v tvár fenoménu rezistencie v liečebnom procese doktori riešia problém predpisovania rôznych liekov účinných proti izolovaným baktériám, ale s rôznymi mechanizmami účinku na patogénnu mikroflóru. Napríklad súbežne používajú lieky s baktericídnym a bakteriostatickým účinkom alebo nahradia jeden liek druhým liekom z inej skupiny.

Prevencia rezistencie voči antibiotikám

Hlavnou úlohou antibiotickej terapie je úplné zničenie populácie patogénnych baktérií v tele. Táto úloha môže byť vyriešená len vymenovaním účinných antimikrobiálnych látok.

Účinnosť sa stanoví podľa jej spektrom účinku (či už z tejto skupiny označenej patogénu) schopnosti prekonať antibiotickej mechanizmy rezistencie, optimálne vybrané dávkovacieho režimu, v ktorom je zničenie patogénne mikroflóry. Okrem toho, pri predpisovaní lieku sa má zvážiť pravdepodobnosť vzniku vedľajších účinkov a dostupnosť liečby pre každého jednotlivého pacienta.

Pri empirickom prístupe k terapii bakteriálnych infekcií nie je možné brať do úvahy všetky tieto body. Vyžaduje si vysokú profesionalitu lekára a neustále monitorovanie informácií o infekciách a účinných liekoch na boj proti nim, takže vymenovanie nebolo neoprávnené a neviedlo k rozvoju rezistencie voči antibiotikám.

Vytvorenie špičkových zdravotníckych centier umožňuje pracovať s etiotropnou liečbou, keď sa prvýkrát deteguje patogén v kratšom čase, a potom sa podá účinné liečivo.

Prevencia rezistencie voči antibiotikám môže byť tiež považovaná za kontrolu predpisovania. Napríklad v ARVI nie je vymenovanie antibiotík opodstatnené, ale podporuje rozvoj antibiotickej rezistencie mikroorganizmov, ktoré sú v súčasnosti v "spánkovom" stave. Skutočnosť, že antibiotiká môžu vyvolať oslabenie imunity, čo spôsobí reprodukciu bakteriálnej infekcie, ktorá je pochovaná vnútri tela alebo sa dostala do nej z vonkajšej strany.

Je veľmi dôležité, aby predpísané lieky spĺňali cieľ, ktorý sa má dosiahnuť. Dokonca aj liek predpísaný na profylaktické účely by mal mať všetky vlastnosti potrebné na zničenie patogénnej mikroflóry. Náhodná voľba lieku môže nielen dať očakávaný účinok, ale aj zhoršiť situáciu tým, že sa vyvinie rezistencia na prípravu určitého druhu baktérií.

Osobitná pozornosť by sa mala venovať dávkovaniu. Malé dávky, ktoré sú neúčinné na boj proti infekcii, opäť vedú k vzniku antibiotickej rezistencie u patogénov. Nie je však potrebné preháňať to, pretože antibiotickou terapiou je pravdepodobnosť vzniku toxických účinkov a anafylaktických reakcií nebezpečných pre život pacienta veľká. Najmä ak sa liečba vykonáva ambulantne bez kontroly zo strany zdravotníckeho personálu.

Prostredníctvom médií je potrebné odovzdať ľuďom nebezpečenstvo samoliečby antibiotikami, ako aj nedokončenej liečby, keď baktéria nezomrie, ale len sa stávajú menej aktívnymi s vyvinutým mechanizmom antibiotickej rezistencie. Rovnaký účinok poskytujú aj lacné, nelicencované lieky, ktoré nelegálne farmaceutické spoločnosti uvádzajú ako rozpočtové protipoložky už existujúcich liekov.

Vysoká miera prevenciu antibiotickej rezistencie je považovaný za konštantný monitoring existujúcich infekčným agens a vývoj ich odolnosti voči antibiotikám a to nielen na úrovni okresu či kraja, ale aj na národnej úrovni (a to aj po celom svete). Bohužiaľ, toto má len sen.

Na Ukrajine systém kontroly infekcie ako taký neexistuje. Boli prijaté iba určité ustanovenia, z ktorých jedna (ešte v roku 2007!), Týkajúca sa pôrodníckych nemocníc, zahŕňa zavedenie rôznych metód monitorovania nosokomiálnych infekcií. Ale všetko opäť závisí od financií, a na takýchto štúdiách väčšinou nie sú vedené, nehovoriac o lekároch z iných odborov medicíny.

V Ruskej federácii na problém odolnosti voči antibiotikám liečení viac zodpovednosti a dôkazom toho je projekt "Mapa antimikrobiálnej rezistencie v Rusku." Výskum v tejto oblasti, zber informácií a ich systematizácia antibiotík obsahu mapy podieľa týchto veľkých organizácií, ako je Výskumný ústav Antimicrobial Chemotherapy, Medziregionálny asociácie mikrobiológie a antimikrobiálne chemoterapii, ako aj vedecké a metodické antibiotikum monitorovacie centrum odporu založené na podnet Spolkovej agentúry pre zdravotníctvo a sociálny rozvoj.

Informácie poskytované v rámci projektu sa neustále aktualizujú a sú k dispozícii všetkým používateľom, ktorí potrebujú informácie o odolnosti voči antibiotikám a účinnej liečbe infekčných ochorení.

Pochopenie toho, ako dôležitá je otázka zníženia citlivosti patogénnych mikroorganizmov a hľadanie riešenia tohto problému dnes postupne. Ale je to už prvý krok v ceste účinného boja proti problému s názvom "odolnosť voči antibiotikám". Tento krok je mimoriadne dôležitý.