Diagnóza herpes
Posledná kontrola: 23.04.2024
Všetok obsah iLive je lekársky kontrolovaný alebo kontrolovaný, aby sa zabezpečila čo najväčšia presnosť faktov.
Máme prísne smernice týkajúce sa získavania zdrojov a len odkaz na seriózne mediálne stránky, akademické výskumné inštitúcie a vždy, keď je to možné, na lekársky partnerské štúdie. Všimnite si, že čísla v zátvorkách ([1], [2] atď.) Sú odkazmi na kliknutia na tieto štúdie.
Ak máte pocit, že niektorý z našich obsahov je nepresný, neaktuálny alebo inak sporný, vyberte ho a stlačte kláves Ctrl + Enter.
Diagnóza herpes je založený na správanie klasického šírenia vírusu v citlivých bunkových kultúrach, imunofluorescencie a sérologické metódy, vykonávanie kolposkopických štúdie za použitia moderných molekulárno-biologických metód (PCR, dot-hybridizácia), ktorý umožňuje diagnostikovať všetky skupiny herpesvírus, vrátane HHV-6 a HHV-7 typy.
Metódy laboratórnej diagnostiky herpetickej infekcie
Hlavné metódy zamerané na vylučovanie HSV alebo detekciu vírusových častíc a / alebo ich zložiek |
Pomocné metódy zamerané na detekciu protilátok proti HSV v biologických tekutinách ľudského tela |
|
|
Ukazuje sa, že 76% pacientov má genitálny herpes (GH) spôsobený HSV-2 a 24% - typ HSV-1. A GG ako monoinfekcia sa vyskytla iba u 22% pacientov, v 78% prípadov boli zistené mikrobiálne asociácie. U 46% pacientov bola detekovaná parazitocenóza spôsobená dvoma patogénmi, vrátane 40% zistených chlamýdií. Menej často v škvŕn určených gardnerelly, Trichomonas, gonokokov.
U 27% pacientov bola parazitocenóza reprezentovaná troma a 5,2% štyrmi patogénmi. A častejšie sa vyskytovala kombinácia chlamýdií s Gardnerella a Candida hubami. Tieto údaje by potvrdilo potrebu dôkladného bakteriologické vyšetrenie pacientov YY na identifikáciu kombinácie patogénov, ako aj hĺbkovú štúdiu o patogenéze zmiešaných infekcií urogenitálneho traktu, ktorý by umožnil diferencované komplexnej terapie infekcie HSV.
Materiály, ktoré sa majú študovať pri izolácii HSV v závislosti od lokalizácie herpetických lézií
Lokalizácia |
Obsah |
Škrabanie buniek |
SMZ |
Nasiakajte z priedušiek |
Biopsia vzorka |
Krvný | |||
1 |
2 |
3 |
4 | ||||||
Koža |
+ |
+ | |||||||
Oči |
+ |
+ | |||||||
Genitálie |
+ |
+ | |||||||
Riť |
+ |
+ |
+ | ||||||
ústa |
+ |
+ |
+ | ||||||
CNS |
+ |
+ |
+ |
+ | |||||
Pľúca |
+ |
+ |
+ | ||||||
Pečeň |
+ |
+ | |||||||
Vrodený |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
Metódy laboratórnej diagnostiky cytomegalovírusovej infekcie
Metódy |
Čas potrebný na získanie výsledkov |
Poznámky |
Virologické | ||
Elektrónová mikroskopia |
3 hodiny |
Malodostupen |
Izolácia vírusu v bunkovej kultúre (CPD) |
4-20 dní |
Štandardné, |
Imunofluorescenčné zafarbenie skorého AH s monoklonálnymi protilátkami |
6 hodín |
Menej |
TSITOLOGICHESKIY |
2-3 hodiny |
Menej |
SEROLOGICHESKIY | ||
RSK |
2 dni |
Standard |
Ssubsistence |
1 deň |
časovo náročné |
RIF |
6 hodín |
Jednoduché, |
NRIF |
6 hodín |
Komplexné |
RIMF |
6 hodín |
Komplexné |
IFA (IgM, TO) |
6 hodín |
Rýchle, jednoduché |
Imunoblot |
6 hodín |
Drahý |
Molekulárne biologické | ||
MG |
5-7 dní |
Nákladné, |
PCR |
3 hodiny |
Drahý |
Metódy diagnostiky vírusu herpes zoster
|
Laboratórne |
NEPRIAMA | |
Pridelenie |
Tkanivová kultúra, kuracie embryá, laboratórne zvieratá, kokultivácia s permisívnymi bunkami alebo pomocnými vírusmi |
Identifikácia izolátov |
Neutralizačná reakcia, DSC, IF, IPPE, reakcia zrazeninových izolátov, aglutinácia, IF |
STRAIGHT | |
Cytológia |
Smears: farebná imunofluorescencia |
Histológia |
Patomorfológia bunky |
štruktúra |
Embryonálna mikroskopia, imunoelektronická mikroskopia |
Stanovenie antigénov |
AK, PIÉF, RIM, IFA |
Určenie lokálnej produkcie protilátok |
IgM, IgG, IgA: IFA, RIA |
Molekulárne biologické prístupy |
Molekulárna hybridizácia, PCR |
Laboratórna diagnostika infekcie spôsobenej vírusom herpes zoster
Diagnostické |
Metódy |
Očakávané výsledky |
Akútna primárna infekcia |
1 |
Detekcia po 2 hodinách |
2 |
Úroveň protilátok rastie pomaly | |
3 |
Prezentujte 3 dni po infekcii | |
Akútna |
1 |
Detekcia ULV za 2 hodiny |
2 |
Úroveň protilátok rastie pomaly | |
4 |
Prezentujte 4 dni po objavení vyrážok |
- stanovenie WIEF v tekutine vezikúl;
- serológia: DSC, ELISA, zameraná na identifikáciu
- sérologické vyšetrenie: test ELISA zameraný na detekciu IgM;
- serológia: test ELISA zameraný na detekciu IgA, IgM.
Metódy na indikáciu imunitnej odpovede infekcie spôsobenej vírusom herpes zoster
Prístup |
Metóda |
Detekcia zvýšeného protilátkového titra v druhom sére |
RSK, RTGA, RPGA, neutralizačná reakcia IF, RIM, ELISA |
Detekcia IgG, Ig A triedy špecifických protilátok v prvej vzorke séra |
IFA, IF, RIM, latexová aglutinácia |
Interpretácia výsledkov sérologického vyšetrenia séra pacienta na herpesvírusové infekcie (ELISA)
Názov |
Priemerné prahové hodnoty pre infekcie | |
Výsledky analýzy |
Interpretácia | |
Cytomegaly Anti-CMV IgG (1-20 E / ml) Anti-CMV IgM (100 až 300%) |
Pozitívne 1-6 pozitívne 6-10 pozitívne> 10 |
Remisia |
Herpes simple 1,2 sérotypy |
Pozitívny 100-400 Pozitívny 400-800 Pozitívny> 800 |
Remisia |
V tabuľke sú uvedené hlavné metódy laboratórnej diagnostiky herpesvírusových infekcií a tiež sa odporúčajú biologické materiály, ktoré sa skúmajú v izolácii HSV s prihliadnutím na lokalizáciu herpetických lézií
Spoľahlivé je rozdelenie herpes simplexu a CMV prostredníctvom infekcie citlivých bunkových kultúr. V virologickom vyšetrení 26 pacientov v období recidívy bol HSV izolovaný na citlivej bunkovej kultúre Vero v 23 prípadoch (88,4%). V infikovaných kultúrach sa pozoroval vzor cytopatického účinku charakteristický pre HSV - tvorba mnohonárodných obrovských buniek alebo akumulácia zaoblených a zväčšených buniek vo forme zväzkov. V 52,1% prípadov bolo možné detegovať ohniská cytopatického účinku vírusu 16 až 24 hodín po infekcii. V 48 až 72 hodinách inkubácie infikovaných kultúr sa percento materiálov spôsobujúcich špecifickú deštrukciu buniek zvýšilo na 87%. A iba v 13% prípadov boli pozitívne výsledky detegované 96 hodín po infekcii a viac alebo s opakovaným pasážovaním.
Metódy laboratórnej diagnostiky generalizovanej herpetickej infekcie
Hlavné metódy zamerané na detekciu (izoláciu) herpesvírusov, ich častíc a ich zložiek |
Pomocné metódy zamerané na detekciu protilátok proti herpes vírusom v biologických tekutinách, ktoré zisťujú enzymatické posuny v krvnom sére |
Izolácia vírusu Herpes na citlivých bunkových kultúrach a zvierat |
Neutralizačné |
Na diagnostiku infekčnej mononukleózy (infekcie spôsobenej VEB) sa používajú sérologické metódy. Reakcia Paul-Bunnelya ovčími erytrocyty, titer 1:28, diagnostických a vyššie pre jediné štúdie séra, alebo zvýšenie 4-násobným protilátok pri skúmaní párových sér. Použite Goff-Bauerovu reakciu so suspenziou 4% formalizovaných červených krviniek koňa. Výsledok sa berie do úvahy po 2 minútach, pričom infekčná mononukleóza je vysoko špecifická.
V súčasnej dobe sa vyvinula enzýmová imunoanalýza (ELISA) na diagnostiku infekčnej mononukleózy. V tomto prípade sú IgG a IgM protilátky v sére pacienta určené inkubáciou s lymfoblastmi infikovanými EBV, po ktorej nasleduje liečba fluorescenčnými protilátkami. V akútnom období ochorenia sa stanovia protilátky proti vírusovému kapsidovému antigénu s titrom 1: 160 a vyššie.
Pri použití množstva importovaných komerčných testovacích systémov v IFA môže určiť: protilátky proti mravcov obálky protilátok Egan EBV k skorému antigénu EBV, celkové protilátky k skorej antigénu EBV, stanovené v akútnej fáze ochorenia a v jadre a v cytoplazme a obmedzenej protilátky EBV čoskoro, určuje v akútnej fáze ochorenia a v jadre a v cytoplazme buniek, ktorý je ohraničený protilátky proti EBV skorý antigén, stanovených v stredu ochorenia iba v cytoplazme buniek a protilátok proti EBV jadrového antigénu. Použitie týchto testovacích systémov umožňuje diferenciálnu diagnostiku mnohých ochorení spojených s EBV.
Po kladnom ELISA pre identifikáciu protilátok EBV dávajú imunoblotové potvrdzujúci reakciu, ktoré detekujú prítomnosť protilátok pre oddelenie EBV proteínové markery (P-proteíny): P23, P54, P72 (prítomnosť proteínu naznačuje možnosť reprodukcie EBV), str 138. Said vyššie uvedené laboratórne metódy sa používajú na kontrolu účinnosti liečby.
Citlivosť virologických metód je 85-100%, špecifickosť je 100%, doba štúdia je 2-5 dní. Často sa v praxi používa metóda priamej imunofluorescencie (PIF) s polyklonálnymi alebo monoklonálnymi protilátkami proti HSV-1 a HSV-2. Metóda UIF sa dá ľahko reprodukovať v bežnej klinickej laboratóriu, nie je nákladná, citlivosť je vyššia ako 80%, špecificita je 90-95%. Výsledkom imunofluorescenčného mikroskopia odhalila prítomnosť cytoplazmatických inklúzií, morfologické znaky, percento infikovaných buniek v náteroch, škrabancov uretry, krčka maternice, krčok maternice, rektum.
Metóda UIF poskytuje myšlienku morfologických vlastností buniek a zmien v lokalizácii HSV antigénov. Okrem priamych znakov poškodenia buniek herpes vírusmi (detekcia špecifickej luminiscencie) existujú nepriame príznaky herpetickej infekcie podľa údajov UIF:
- agregácia jadrovej hmoty, exfoliacia karyoolmy;
- prítomnosť tzv. Jadrové "otvory", keď z jadra bunky zostáva len jedna karyolemma;
- prítomnosť intranukleárnych inklúzií - Caudryho teľa.
Pri nastavovaní UIF lekári dostanú nielen kvalitu, ale aj kvantitatívne posúdenie infikovaných buniek, ktoré sme boli použité na vyhodnotenie účinnosti antivírusovej liečby sa acyklovir (AC). Takto bolo 80 pacientov s jednoduchým genitálnym herpesom (GG) skúmaných metódou UIF v dynamike. Je ukázané, že v prípade, pred ošetrením acykloviru v náteroch 88% pacientov malo vysoké percento infikovaných buniek (50-75% a vyššie), po jednom priebehu acykloviru v náteroch 44% pacientov so zdravými bunkami zistených v 31% prípadov sú označené jednotlivé infikované bunky a 25% pacientov malo až 10% infikovaných buniek.
Obsah infikovaných buniek v náteroch (PIF reakcia) pacientov s genitálnym herpesom liečených acyklovirom
Ochorenia |
Percento škvrny | |||||
Infikovaných buniek |
Normálne | |||||
Viac ako |
50-75% |
40-50% |
10% |
Jednotlivé bunky v n / sp | ||
Relaps (pred liečbou) |
25% |
63% |
12% | |||
(20) |
(50) |
(10) | ||||
Remisia (po liečbe) |
25% |
31% |
44% | |||
(20) |
(25) |
(35) |
Použitím mnohoročných UIF a metódy dot-hybridizácie sa takmer 100% prípadov zhodovalo s výsledkami štúdie. Je potrebné poznamenať, že za účelom zvýšenia spoľahlivosti diagnóze GH, a to najmä v prípadoch, keď existuje subklinického a malomanifestnyh formy herpes, sa odporúča použiť 2-3 metódu laboratórnej diagnostiky, najmä pri skúmaní tehotné ženy, ženy s pôrodníckej anamnézy znevýhodnené, ľudia s nešpecifikovaným gynekologické diagnózy.
Tak, pre PCR diagnostiku vírusových a bakteriálnych infekcií urogenitálneho traktu, je nutné vyhodnotiť pozitívne výsledky získané s históriou, prítomnosť (alebo neprítomnosť) špecifických klinických symptómov. Ak sa deteguje chlamýdie pomocou PCR, potom je v tomto prípade možné hovoriť o infekcii a zodpovedajúcim spôsobom riešiť problémy s liečbou. V prípade zistenia mykoplaziem (Ureaplasma) sú oportúnne patogény, na potvrdenie diagnózy je potrebné vykonať ďalšie štúdie kultúry, t. E. Crop materiál z pacient citlivý na bunkových kultúrach. Len vtedy, keď sa v kultúrnej analýze získajú pozitívne výsledky, môžeme hovoriť o laboratórnom potvrdení diagnózy mykoplazmózy. Rovnaká metóda umožní v prípade potreby určiť citlivosť izolovaných mykoplaziem na často používané liečebné formy (antibiotiká, fluorochinolóny atď.).
Možno jednostupňovú infekciu s niekoľkými vírusmi z čeľade Nepresviridae. Často sme zistili infekciu jedného pacienta s vírusmi HSV-1, HSV-2 a CMV. Mnoho častejšie infikovaných niekoľkými herpes vírusmi boli pacienti s klinickými a laboratórnymi prejavmi sekundárneho IDS (pacienti s onkohematologickými, onkologickými, infikovanými vírusmi HIV). Preto sa ukazuje, že klinické a imunologické poruchy, ktoré prebiehajú s infekciou HIV, sú sprevádzané zvýšeným počtom herpesvírusov detegovaných molekulárnou hybridizáciou. V tejto prognosticky najvýznamnejšej je možné považovať komplexnú jednoprocesovú detekciu DNA typu HSV-1, CMV a HHV-6.