Infekčná mononukleóza: protilátky proti vírusu Epstein-Barr v krvi

Infekčná mononukleóza je bežná systémová lymfoproliferatívna choroba, najčastejšie spôsobená vírusom Epstein-Barr. Toxoplasma gondii a iné vírusy (CMV, vírus ľudskej imunodeficiencie a ľudský herpesvírus typu 6, rozpoznané ako príčina náhleho exantému) môžu spôsobiť klinicky podobné ochorenia. Tieto rovnaké etiologické činidlá sú pravdepodobne schopné spôsobiť vývoj chronického únavového syndrómu.

Epstein-Barr vírus je vírus z herpetickej skupiny, má tropizmus pre B-lymfocyty, pretrváva persistentné v hostiteľských bunkách ako latentná infekcia. Je rozšírený na celom svete. Podľa štruktúry a veľkosti je vírus Epstein-Barr nerozlíšiteľný od ostatných herpesvírusov, ale v antigénnych vlastnostiach sa výrazne odlišuje od nich. Vírus má membránový antigén (MA-membránový antigén), jadrový antigén (nukleový antigén EBNA-Epstein-Barris) a vírusový kapsidový antigén (VCA).

Infekcia sa vyskytuje, keď sa vírus prenáša so slinami. Epstein-Barrovej pri požití infikuje hltanu epitel, spôsobujúce zápal a horúčku - typické klinické príznaky začali infekčnú mononukleózu. Prísne lymfotrópny vírus, spájajúcej S3α receptora bunkovej membráne B lymfocytov vyvoláva proliferáciu polyklonálnych B lymfocytov so zodpovedajúcim zvýšením mandlí, systémový lymfadenopatia a splenomegália. B-lymfocyty sú transformované (získavajú schopnosť nekonečného delenia), a v neprítomnosti zodpovedajúcej bunkovej imunitnej odpovede, tento proces môže vyvíjať samozrejme malígny (napríklad X-viazanú syndróm lymfoproliferatívne). Ak bunková imunita faktory riadiť replikáciu vírusu Epstein-Barrovej v tele, klinické príznaky infekčnej mononukleózy postupne mizne.

Rovnako ako ostatné herpetických vírusov, Epstein-Barrovej vírus môže pretrvávať v latentnej infekcie (jeho DNA, obsiahnuté v jadre malého množstva B-lymfocytov). Epizodické asymptomatickej reaktivácie infekcie - bežný jav, približne 20% zdravých mladých ľudí vylučovať vírus Epstein-Barrovej sa slinami. U jedincov s poškodenou imunitou (napr AIDS, ataxia-teleangiektázia, u pacientov po transplantácii), sa môže vyvinúť jasnú reaktívna infekciu vlasové leukoplakia, intersticiálna pneumonitída, alebo vo forme monoklonálnej B-bunkového lymfómu. Vírusom Epstein-Barrovej je spojená etiológie nosohltanu karcinómu a Burkittovho lymfómu.

Jedným z prejavov infekčnej mononukleózy je výskyt atypických lymfocytov v periférnej krvi (až do 10% z celkového počtu lymfocytov). Atypické lymfocyty sa nachádzajú v krvi od začiatku obdobia klinických prejavov infekcie. Ich obsah v krvi dosahuje vrchol na konci druhého alebo začiatku tretieho týždňa a môže sa udržať na tejto úrovni až 1,5-2 mesiacov, úplné zmiznutie zvyčajne nastáva na začiatku štvrtého mesiaca od nástupu ochorenia. Prítomnosť atypických lymfocytov je pomerne necitlivá známka infekcie spôsobenej vírusom Epstein-Barr, ale má celkovú špecificitu približne 95%.

Proliferácia polyklonálnych B lymfocytov v infekcie spôsobené vírusom Epstein-Barrovej, vytvára veľké množstvo autoprotilátok u pacienta, ako je napríklad IgM anti-i (za studena aglutiníny), reumatoidnej faktor, antinukleárne protilátky. Väčšina nezvyčajných IgG, ktoré sa objavujú v infekčnej mononukleóze, sa nazývajú Paul-Bunnel heterofilné protilátky. Tieto protilátky patrí do triedy IgM, ktoré majú afinitu k jahňacie a konské červených krviniek, nie sú zamerané na akýkoľvek antigén Epstein-Barrovej. Heterofilné protilátky - Náhodné produkty B-lymfatické proliferácie (spôsobená vírusom Epstein-Barrovej), zobrazí sa v prvom týždni infekčnej mononukleózy a postupne miznú počas rekonvalescencie, obvykle nie sú detekované v 3-6 mesiacov.

Keď sa počiatočný akútny stupeň infekcie stáva latentným, vo všetkých bunkách sa objavujú genómy vírusu Epstein-Barr (unikátne antigény) a jadrový antigén sa uvoľňuje do životného prostredia. V odpovedi na antigén sa syntetizujú špecifické protilátky - hodnotné markery štádia ochorenia. Krátko po infekcii B lymfocytov sa deteguje skorý antigén (EA), proteín potrebný na replikáciu vírusu Epstein-Barr (a nie štruktúrna vírusová zložka). K skorému antigénu v tele pacienta sa syntetizujú protilátky tried IgM a IgG. Spolu s úplným vírusom vírusu Epstein-Barr sa objavujú antigény vírusovej kapsidy (VCA) a membránový antigén (MA). Keď infekčný proces ustúpi, malé percento B-lymfocytov infikovaných vírusom Epstein-Barr sa vyhýba imunitnej deštrukcii a zachováva vírusový genóm v latentnej forme. Jadrový antigén (EBNA) vírusu Epstein-Barr je zodpovedný za jeho duplikáciu a prežitie.

Laboratórne testy dokážu detegovať protilátky proti rôznym antigénom.

Zo sérologických metód diagnostiky infekčnej mononukleózy je najbežnejšia reakcia Paul-Bunnel (aglutinácia) zameraná na detekciu heterofilných protilátok v sére. Titr heterofilných protilátok 1: 224 a vyššie v sére pacienta sa považuje za diagnosticky významný, čo potvrdzuje diagnózu infekčnej mononukleózy. Heterofilná aglutinácia je pozitívna u 60% mladých ľudí po 2 týždňoch a po 90% po 4 týždňoch od začiatku klinických prejavov ochorenia. Preto je potrebných niekoľko štúdií na diagnostiku infekčnej mononukleózy: počas prvého týždňa ochorenia (reakcia môže byť negatívna) a 1-2 týždne neskôr (reakcia môže byť pozitívna). Obsah heterofilných protilátok klesá po ukončení akútneho obdobia infekčného procesu, ale ich titr sa môže stanoviť do 9 mesiacov od začiatku klinických príznakov. Reakcia Paul-Bunnel sa môže od pozitívneho až po negatívny, dokonca aj na pozadí reziduálnych hematologických a klinických príznakov u pacienta. Citlivosť metódy u dospelých je 98%, špecificita je 99%. U detí s infekčnej mononukleózy vo veku 2 rokov heterofilných protilátky boli detekované len u 30% pacientov vo veku 2-4 rokov - 75% po dobu 4 rokov - viac ako 90%. Citlivosť metódy u detí je nižšia ako 70%, špecifickosť je 20%. Zníženie a potom opätovné zvýšenie titra heterofilných protilátok sa môže vyskytnúť v reakcii na inú infekciu (najčastejšie pri vírusových infekciách horných dýchacích ciest). Odpoveď Paul-Bunnel nie je špecifická pre vírus Epstein-Barr. Titr heterofilných protilátok neposkytuje krížovú reakciu a nespája sa so špecifickými protilátkami proti vírusu Epstein-Barr, ani sa nespolupracuje so závažnosťou priebehu ochorenia. Test je nepoužiteľný na diagnostikovanie chronickej formy infekčnej mononukleózy (pozitívne v priemere iba u 10% pacientov).

Tíry 1:56 alebo menej sa môžu vyskytovať u zdravých ľudí a u pacientov s inými ochoreniami (reumatoidná artritída, rubeola). Výsledky falošne pozitívnych testov sú veľmi zriedkavé.

V súčasnej dobe sa na stanovenie protilátok proti erytrocytám berana používa metóda "jediného bodu" (kĺzavá aglutinácia), ktorá sa najskôr používa ako skríningový test. Citlivosť je porovnateľná s reakciou Paul-Bunnel. Posuvná falošne pozitívne testy môžu byť asi 2% z týchto štúdií (leukémia, malígny lymfóm, malária, rubeoly, vírusová hepatitída, karcinóm pankreasu) a falošne negatívnych dospelých - 5-7% prípadov.

Treba poznamenať, že spektrum diagnostických testovacích systémov vyrábaných firmami na základe stanovenia titrov protilátok je veľmi široké, preto je potrebné zamerať sa na diagnostický titer protilátok špecifikovaný v návode na testovacie systémy.

Ak heterofilné protilátky nie sú identifikované a klinický obraz zodpovedá infekčná mononukleóza, je potrebné preskúmať, sérum špecifických protilátok IgM a IgG. Pre detekciu špecifických protilátok proti vírusu Epstein-Barrovej za použitia nepriamej metódy, imunofluorescenčný (umožňujú detekciu protilátok proti VCA a EA antigénov) antialexin-imunofluorescencie (protilátky proti EA, VCA a EBNA antigén) a IFA.

Protilátky proti zložke EA antigénu D (anti-EA-D) sa objavujú dokonca aj v latentnom období primárnej infekcie a rýchlo vymiznú s obnovením.

Protilátky proti komponentu EA antigénu R (anti-EA-R) sa môžu detegovať 3-4 týždne po klinických prejavoch ochorenia. Pretrvávajú v krvnom sére približne rok, často sa zistí s atypickými alebo dlhotrvajúcimi prúdmi infekčnej mononukleózy. Zvyčajne sa tieto protilátky vyskytujú pri Burkittovom lymfóme.

Protilátky proti IgM triedy VCA (anti-VCA IgM) sa objavujú veľmi skoro, zvyčajne klinickým príznakom, sú zistené na začiatku ochorenia v 100% prípadov. Vysoké titre sa vyskytujú v 1. Až 6. Týždni od nástupu infekcie, začínajú sa znižovať od 3. Týždňa a zvyčajne zmiznú po 1-6 mesiacoch. Anti-VCA IgM je takmer vždy prítomný v sére s aktívnou infekciou, takže metóda ich detekcie je veľmi citlivá a špecifická pre akútnu epizódu infekčnej mononukleózy.

Protilátky proti VCA triede IgG (anti-VCA IgG) sa môžu objaviť skôr (v 1. Až 4. Týždni), ich množstvo dosiahne vrchol druhého mesiaca ochorenia. Na začiatku ochorenia sa vyskytujú v 100% prípadov. Iba 20% pacientov malo štvornásobné zvýšenie titra v štúdii párových sér. Titr sa znižuje pri zotavení, ale nachádza sa v priebehu niekoľkých rokov po prenesenej infekcii, preto je zbytočná na diagnostiku infekčnej mononukleózy. Prítomnosť anti-VCA IgG indikuje stav po infekcii a imunite.

Protilátky proti EBNA (anti-EBNA) sa objavujú neskôr ako všetky, zriedka sa vyskytujú v akútnej fáze ochorenia. Ich obsah sa zvyšuje počas obdobia zotavovania (do 3-12 mesiacov), môžu pretrvávať v krvi mnoho rokov po ochorení. Nedostatok anti-EBNA v prítomnosti anti-VCA IgM a anti-EA IgM indikuje aktuálnu infekciu. Detekcia anti-EBNA po predchádzajúcej negatívnej reakcii naznačuje existujúcu infekciu. Pri použití metódy ELISA je možné súčasne zistiť prítomnosť tried anti-EBNA IgM a IgG. Ak je množstvo anti-EBNA IgM vyššie ako anti-EBNA IgG, mala by sa zvážiť akútna infekcia, pričom reverzný vzťah je predchádzajúci.

V prospech akútnej primárnej infekcie jeden alebo viac z nasledujúcich príznakov naznačuje prítomnosť:

• anti-VCA IgG (zistené predčasne a neskôr je obsah znížený);
• Vysoký titer (viac ako 1: 320) alebo 4-násobné zvýšenie titru anti-VCA IgG v priebehu ochorenia;
• prechodný vzostup titru anti-EA-D (1:10 alebo viac);
• skorý anti-VCA IgG bez anti-EBNA, a neskôr - vznik anti-EBNA.

Akútne alebo primárnej infekcie spôsobenej vírusom Epstein-Barrovej, vylúčiť, ak sa titre anti-VCA IgG a anti-EBNA v sére nie sú počas doby štúdie zmeniť (v akútnej fáze a zotavenie).

Konštantná prítomnosť skorého antigénu a anti-VCA IgG vo vysokých titroch naznačuje chronickú fázu infekcie.

Detekcia protilátok proti vírusu Epstein-Barr sa používa na diagnostiku infekčnej mononukleózy a chronických infekcií spôsobených vírusom Epstein-Barr.

Protilátky proti vírusu Epstein-Barrovej môže byť detekovaná v nasledujúcich chorôb: sekundárne imunodeficiencie, vrátane infekcie HIV, nazofaryngálne karcinóm, Burkittov lymfóm, infekcie CMV, syfilis, lymskej choroby, brucelóza, a ďalšie.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]