konfokálna mikroskopia

Konfokálna mikroskopia sa v súčasnosti považuje za jednu z najsľubnejších metód zobrazovania kože in vivo, a preto je o to záujem medzi klinikmi a zástupcami vedeckých výskumných ústavov mimoriadne vysoká.

[1], [2], [3], [4]

Funkcie konfokálnej mikroskopie

V dermatológii sa konfokálna laserová mikroskopia používa na:

• skúmať penetráciu zlúčenín do kože (penetračné cesty, kinetika, distribúcia v koži);
• pozorovanie žliaz (definícia aktívneho a pasívneho stavu);
• štúdie mikrocirkulačného lôžka (vrátane reálneho času);
• diagnostika novotvarov.

Bez diskutovať o výhody a nevýhody vyššie uvedených typov konfokálna mikroskopia, berieme na vedomie, že všetky väčšie prísnosť získava popularitu fluorescenčné laserový konfokálna mikroskopia v posledných rokoch.

[5], [6], [7],

Konfokálna mikroskopia na kožné vyšetrenie

Konfokálna mikroskopia poskytuje dva neoceniteľné príležitosti - štúdium tkanív na bunkovej úrovni, v stave fyziologického života a ukážky výsledkov výskumu (tj bunková aktivita ..) v štyroch rozmeroch - výška, šírka, hĺbka a čas. Pre kvalitu obrazu a hĺbku štúdia zohráva najdôležitejšiu úlohu schopnosť tkaniva prenášať svetlo, inými slovami transparentnosť. Metóda konfokálnej mikroskopie je bezkontaktná, lúč svetla nespôsobuje pacientovi ani pokusnému zvieraťu žiadne škody alebo nepohodlie.

Na štúdium kože sa používa konfokálna skenovacia laserová mikroskopia (CSLM). Metóda umožňuje vidieť epidermis a papilárnu dermisovú vrstvu s rozlíšením blízkym histologickému. Všetky výsledky prieskumov sa zobrazia na monitore a uložia sa ako balík obrázkových súborov (vo forme mikrofilmu (v dynamike) alebo mikrofotografiách).

Existujú dva typy metód:

• Reflexná (odrazivosť CSLM) - je založená na skutočnosti, že rôzne intracelulárne a medzibunkové štruktúry majú odlišný index refrakcie svetla, čo umožňuje získať kontrastný obraz.
• Fluorescenčné (fluorescencie CSLM) - používa laserové svetlo preniká kožou a stimulácia ju alebo exo endohromofory ktorý reagoval začne emitovať fotóny (tj fluoreskujú ..).

Bočné rozlíšenie je minimálna vzdialenosť medzi bodmi umiestnenými vo vodorovnej rovine, t. Rovina rovnobežná s povrchom kože. Axiálne rozlíšenie je minimálna vzdialenosť medzi bodmi umiestnenými v rovine kolmej na povrch kože.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

História konfokálnej mikroskopie

Myšlienka vytvorenia mikroskopu schopného na úrovni buniek prezentovať intravitálne rozdelenie živého tkaniva bola aktívne vyvinutá pred 130 rokmi. Hlavný prvok moderných mikroskopov bol navrhnutý na konci XIX. Storočia a bol to rotačný disk s najmenšími otvormi spirálovito umiestnenými. Tento disk bol vynájdený v roku 1883 nemeckým študentom Paulom Nipkovom, na počesť ktorého dostal jeho meno - Nipkov disk (alebo nipkov disk). Vynález bol založený na schopnosti svetla prechádzať cez najmenšie otvory v kotúči a zväčšovacie šošovky, aby prenikli do hĺbky tkaniva a osvetľovali fragment buniek vo vzdialenosti od povrchu. Keď sa disk rýchlo otáča, fragmenty sa pridajú k celkovému obrázku. Odstránením alebo aproximáciou štruktúry objektu sa môže meniť hĺbka optickej časti skúmaného tkaniva.

Až s príchodom videorekordérov v roku 1980, a počítačov, ktoré môžu spracovávať obraz na začiatku roka 1990 existuje skutočná príležitosť k vytvoreniu a účinne aplikovať moderné mikroskopy, ktoré sú používané v našej dobe.