Pôvodca tularémie

Tularémia je primárne ochorenie zvierat (hlodavcov), u ľudí sa vyskytuje ako akútne infekčné ochorenie s pestrým klinickým obrazom a pomalým zotavením. Pôvodcu tularémie - Francisella tularensis - objavili G. McCoy a S. Chapin v roku 1912 počas epizootie u sysľov v oblasti s jazerom Tulare (Kalifornia), ktorú podrobne študoval E. Francis, na ktorého počesť je rod pomenovaný.

Ide o veľmi malé, 0,2-0,7 µm veľké, kokoidné alebo elipsoidné polymorfné tyčinky, ktoré pri použití špeciálnych farbiacich metód veľmi často poskytujú bipolárne farbenie; sú nepohyblivé, gramnegatívne, netvoria spóry; kataláza negatívne, tvoria H2S, striktné aeróby, teplotné optimum pre rast je 37 °C, pH 6,7-7,2. Virulentné kmene majú kapsulu, tvoria kyselinu bez plynu počas fermentácie niektorých sacharidov (glukóza, maltóza, manóza, fruktóza, dextrín), stupeň fermentácie sa medzi kmeňmi líši, obsah G + C v DNA je 33-36 mol %. F. tularensis nerastie na bežných médiách. G. McCoy a Sh. Chapin použili koagulované žĺtkové médium. Na ňom rastie bacil tularemie vo forme jemných malých kolónií pripomínajúcich kvapky rosy, potom kultúra nadobúda charakter jemného shagreenového povlaku so slabo vyjadrenou hlienovou konzistenciou. E. Francis navrhol na pestovanie tularemického bacilu živný agar s obsahom 0,05-0,1% cystínu, 1% glukózy a 5-10% krvi. Na takomto médiu je rast bujnejší a drsnejší: kolónie sú okrúhle s hladkým povrchom, mliečnej farby, vlhké, s hlienovou konzistenciou, obklopené charakteristickým zeleným halo. Rast je pomalý, kolónie dosahujú maximálnu veľkosť na 3.-5. deň (1 - 4 mm). Baktérie tularémie sa dobre množia v žĺtkovom vaku kuracieho embrya, čo spôsobuje jeho úhyn na 3.-4. deň.

Pre rast F. tularensis sú potrebné nasledujúce aminokyseliny: arginín, leucín, izoleucín, lyzín, metionín, prolín, treonín, histidín, valín, cystín, pre niektoré poddruhy - serín, tyrozín, kyselina asparágová; okrem toho pre rast potrebujú aj kyselinu pantoténovú, tiamín a ióny Mg2. Vzhľadom na tieto vlastnosti možno na kultiváciu F. tularensis použiť syntetické médiá.

Rod Francisella patrí do triedy Gammaproteobacteria, kmeň Proteobacteria. Tento rod zahŕňa aj F. novicida, ktorej patogenita pre ľudí nebola stanovená.

Pôvodcom tularémie je intracelulárny parazit. Jeho virulencia je spôsobená kapsulou, ktorá inhibuje fagocytózu; neuraminidázou, ktorá podporuje adhéziu; endotoxínom; alergénnymi vlastnosťami bunkovej steny, ako aj schopnosťou reprodukovať sa vo fagocytoch a potláčať ich zabíjací účinok. Mechanizmy virulencie ešte neboli dešifrované. Okrem toho sa v bacile tularémie našli receptory schopné interagovať s Fc fragmentmi imunoglobulínov IgG. V dôsledku takejto väzby je narušená aktivita komplementových systémov a makrofágov.

F. tularensis v S-forme (virulentná) má dva antigény - O a Vi (kapsulárny antigén). O-antigén je príbuzný s antigénmi Brucella. Disociácia S->SR->R vedie k strate kapsuly, virulencie a imunogenicity. Druh F. tularensis sa delí na tri geografické rasy (poddruhy):

• Holarktický (nízko patogénny pre domáce králiky, nefermentuje glycerol a nemá enzým citrulín ureidázu, ktorý sa nachádza v krajinách severnej pologule);
• Stredoázijský (nízko patogénny pre králiky, má citrulín ureidázu a fermentuje glycerol);
• Nearktický (americký), patogénnejší pre králiky, fermentuje glycerol, má citrulín ureidázu.

Okrem toho, kmene amerického a stredoázijského poddruhu majú fosfatázovú aktivitu, ktorá chýba u kmeňov holarktického poddruhu.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Rezistencia pôvodcu tularémie

F. tularensis je vo vonkajšom prostredí pomerne stabilný, najmä ak sa nachádza v patologickom materiáli. V krmive, obilí, kontaminovanom exkrementmi chorých hlodavcov prežíva až 4 mesiace; vo vode až 3 mesiace; v ľade viac ako 1 mesiac. Je citlivý na priame slnečné svetlo (hynie do 30 minút), vysokú teplotu (pri 60 °C hynie do 10 minút), pod vplyvom 3 % roztoku lyzolu, 50 % alkoholu, formalínu a iných antiseptík hynie do 5 – 10 minút.

Epidemiológia tularémie

Hlavným rezervoárom tularémie v prírode sú hlodavce, medzi ktorými sa v prírodných podmienkach pozorujú epizootie. Ľudia sa nakazia iba zo zvierat; patogén sa neprenáša z človeka na človeka. Patogén bol zistený u 82 druhov hlodavcov a zajacovitých a najčastejšie sa vyskytuje u zástupcov 4 čeľadí: myšiakovité hlodavce (Muridae), zajace (Leporidae), veveričky (Sciuridae) a tarbíky (Dipodidae). V Rusku sú hlavnými prenášačmi myšiakovité hlodavce: vodné potkany, hraboše obyčajné, myši domáce a ondatry.

Podľa citlivosti na tularémiu možno zvieratá rozdeliť do štyroch skupín:

• Skupina 1 - najcitlivejšie (hraboše, vodné potkany, myši domáce, biele myši, morčatá a niektoré ďalšie). Minimálna smrteľná dávka je jedna mikrobiálna bunka;
• 2. skupina - menej citlivé (sivé potkany, sysle atď.). Minimálna smrteľná dávka je 1 miliarda mikrobiálnych buniek, avšak na infikovanie niektorých z nich stačí jedna mikrobiálna bunka;
• 3. skupina (predátory - mačky, líšky, fretky). Odolné voči vysokým infekčným dávkam, ochorenie prebieha bez viditeľných prejavov;
• Skupina 4 - imúnna voči tularémii (kopytníky, studenokrvné zvieratá, vtáky).

Pre človeka je minimálnou infekčnou dávkou jedna mikrobiálna bunka. Človek sa môže nakaziť všetkými možnými spôsobmi: priamym a nepriamym kontaktom s chorými hlodavcami, ich mŕtvolami alebo predmetmi infikovanými hlodavcami; alimentárnym spôsobom (konzumáciou potravy a vody infikovanej hlodavcami), vzduchom prenášaným prachom a prenosom. Infekcia baktériami tularémie bola preukázaná u 77 druhov krvosajúcich článkonožcov. Obzvlášť dôležité sú kliešte rodu Ixodidae, u ktorých patogén pretrváva počas celého života a dokonca sa transovariálne prenáša na potomstvo. Tieto okolnosti prispievajú k ustáleniu ochorenia v prírode. Človek sa nakazí kliešťami nie uhryznutím, ale v dôsledku toho, že sa patogén dostane na kožu spolu s exkrementmi kliešťa.

V Rusku existuje 7 hlavných typov krajiny s prírodnými ohniskami tularémie: močiarne, lúčne, stepné, lesné, podhorské, tundrové a tugajské (púštne).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Príznaky tularémie

Pôvodca tularémie preniká do tela cez vonkajšie obaly (poškodenú a neporušenú kožu a sliznice). V mieste prieniku sa často tvoria vredy. Cez lymfatické cievy baktérie vstupujú do regionálnej lymfatickej uzliny a voľne sa v nej množia; zápalový proces vedie k tvorbe bubónu. Odtiaľto patogén preniká do krvi, bakterémia spôsobuje generalizáciu procesu, do ktorého sú zapojené rôzne orgány a tkanivá, ktorých proliferácia baktérií vedie k tvorbe granulómov a nekrotických vredov. S bakterémiou a generalizáciou je spojená alergická reštrukturalizácia tela. Inkubačná doba tularémie sa pohybuje od 2 do 8 dní. Ochorenie začína akútne: objavuje sa horúčka, bolesť hlavy, bolesti svalov, hyperémia tváre. Ďalší priebeh závisí od miesta vstupnej brány, podľa ktorého sa rozlišujú tieto klinické formy tularémie: ulcerózno-glandulárna (bubonická), očno-glandulárna, anginózno-glandulárna, abdominálna a pľúcna. Úmrtnosť pri tularémii nepresahuje 1-2%.

Postinfekčná imunita je silná, pretrvávajúca, vo väčšine prípadov celoživotná, má bunkovú povahu, je spôsobená prevažne T-lymfocytmi a makrofágmi, v menšej miere protilátkami. Fagocytóza u jedincov s imunitou je úplná.

Laboratórna diagnostika tularémie

Na diagnostiku tularémie sa používajú všetky mikrobiologické metódy. Štúdia sa vykonáva v zabezpečených laboratóriách. Materiál na štúdiu – krv, punkcia bubónu, škrab z vredu, výtok z spojiviek, plak z hltana, spútum atď. – je určený klinickou formou ochorenia. Okrem toho sa na štúdiu môže odobrať voda a potraviny. V prirodzených ohniskách tularémie sa vykonávajú plánované systematické štúdie na izoláciu pôvodcu tularémie z hlodavcov.

Bakteriologická metóda diagnostiky tularémie u ľudí zriedkavo poskytuje pozitívne výsledky. Čistá kultúra sa zvyčajne izoluje po jej nahromadení na vnímavých laboratórnych zvieratách. Na biologické testy sa používajú biele myši a morčatá. Myši sa infikujú subkutánne, morčatá intraperitoneálne; zvieratá uhynú 3. až 6. deň, niekedy po inovaní. Infikované zvieratá sa chovajú v špeciálnych podmienkach (ako pri diagnostikovaní moru) a pozorujú sa 6 až 14 dní. Experimentálne zvieratá neuhynú 7 až 15 dní, 15. až 20. deň sa porážajú a mŕtvoly sa pitvajú. V prítomnosti tularémie sa zisťujú patologické a anatomické zmeny vo forme produktívneho procesu s nekrózou. Čistá kultúra sa izoluje z vnútorných orgánov na žĺtkovom médiu, glukózo-cysteínovom krvnom ložisku atď. Identifikácia je založená na morfológii a tinktúrnych vlastnostiach patogénu, absencii rastu na MPA a aglutinácii s homológnym sérom. patogenita pre biele myši a morčatá. Čistú kultúru možno izolovať infikovaním 12-dňových kuracích embryí a žĺtkového vaku. Na izoláciu čistej kultúry patogénu z vody sa voda centrifuguje alebo filtruje cez bakteriálne filtre a sediment sa používa na infikovanie laboratórnych zvierat. Pri štúdiu potravinárskych výrobkov sa premyjú MP B, centrifugujú a sediment sa používa na infikovanie laboratórnych zvierat.

Súčasne s bakteriologickým vyšetrením sa zo skúmaného materiálu pripravujú nátery a farbia sa podľa Romanovského-Giemsu. V náteroch z orgánov možno zistiť malé kokoidné a tyčinkovité baktérie, ktoré sa nachádzajú intracelulárne a vo forme zhlukov a tvoria jemnú kapsulu.

Na diagnostiku sa používa podrobná aglutinačná reakcia, RPGA a RIF.

Na včasnú diagnostiku tularémie (od 5. dňa od začiatku ochorenia) sa používajú alergické testy. Používajú sa dva typy tularínu a podľa toho sa používajú dva spôsoby ich podávania: kožný a intradermálny. Keďže koncentrácia alergénu v oboch typoch tularínu je odlišná, je neprijateľné použiť kožný tularín na intradermálny test a naopak. Výsledky alergickej reakcie sa berú do úvahy dynamicky po 24, 36, 48 hodinách. Za pozitívny výsledok sa považuje infiltrát s priemerom najmenej 5 mm. U očkovaných osôb alebo osôb, ktoré prekonali tularémiu, zostávajú alergické testy pozitívne niekoľko rokov (anamnestická reakcia).

Špecifická prevencia tularémie

Na špecifickú prevenciu sa používa vakcína proti tularémii, ktorú v roku 1930 získali ruskí vojenskí lekári B. Ya. Elbert a N. A. Gaisky z kmeňa Me 15. Vakcína poskytuje silnú imunitu počas 5-6 rokov pri infekcii európskym a holarktickým poddruhom a je účinná proti americkej odrode patogénu. Očkovanie sa vykonáva podľa epidemiologických indikácií, ako aj u osôb patriacich do rizikových skupín. Súčasné očkovanie proti tularémii a brucelóze; tularémii a moru, ako aj proti tularémii a niektorým iným infekciám je povolené.

Nešpecifická prevencia tularémie je rovnaká ako pri iných zoonózach a je zameraná predovšetkým na kontrolu hlodavcov.