PCR hepatitídy C

HCV v materiáli bežne chýba.

Na rozdiel od sérologickú diagnostiku hepatitídou C vírusových metód, kde protilátky proti HCV, PCR môže detekovať prítomnosť HCV RNA a priamo kvantifikovať jeho koncentráciu v materiáli. Test má špecifickú špecifickosť a vysokú citlivosť: desať molekúl HCV RNA v testovacom materiáli je dostatočné na jeho detekciu. Detekcia protilátok proti HCV len potvrdzuje pacienta na skutočnosť, infikované, ale neumožňuje ohodnotí aktivity infekčného procesu (replikácie vírusu) a prognózu ochorenia. Okrem toho, protilátky proti HCV detegovaný v krvi pacientov s akútnou a chronickej hepatitídy, rovnako ako u tých pacientov, ktorí sú chorí a späť, ale často protilátky objavujú v krvi len pár mesiacov po nástupe klinického ochorenia, takže je ťažké diagnostikovať. Detekcia HCV v krvi pomocou PCR je viac informatívnou diagnostickou metódou. Identifikácia HCV RNA pomocou PCR dôkaz virémie, vypovedá o replikáciu vírusu v tele a je jedným z kritérií pre účinnosť antivírusovej terapie. Detekcia HCV RNA pomocou PCR v raných fázach vírusovej infekcie na pozadí úplnej absencii akýchkoľvek sérologických markerov môže byť najskôr dôkaz infekcie. Avšak izolovaná detekcia HCV RNA na pozadí úplnej absencie akýchkoľvek iných sérologických markerov nemôže úplne eliminovať falošne pozitívny výsledok PCR. V takýchto prípadoch je potrebné komplexné vyhodnotenie klinických, biochemických a morfologických štúdií s opakovaným opakovaným potvrdením prítomnosti PCR infekcie.

Veľmi dôležité je použitie metódy PCR u pacientov s chronickou vírusovou hepatitídou C, pretože vo väčšine prípadov neexistuje korelácia medzi prítomnosťou vírusovej replikácie a aktivitou pečeňových enzýmov. V takýchto prípadoch iba PCR umožňuje posúdiť prítomnosť vírusovej replikácie, najmä ak je konečný výsledok kvantitatívne exprimovaný. Vo väčšine prípadov dochádza k zániku HCV RNA z krvného séra neskôr ako normalizácia pečeňových enzýmov, takže ich normalizácia nemôže slúžiť ako základ pre zastavenie antivírusovej liečby.

Pre detekciu HCV RNA je prakticky dôležité skúmať metódou PCR nielen sérum, ale aj lymfocyty, hepatobiobaptam. Vírusy sa môžu zistiť 2-3 krát častejšie v pečeňových tkanivách ako v sére. Pri hodnotení výsledkov štúdie krvného séra pre HCV RNA je potrebné mať na pamäti, že viremia môže mať prirodzenú kolísavosť (podobne ako zmena enzýmovej aktivity). Preto po pozitívnych výsledkoch PCR štúdie možno získať negatívny výsledok a naopak. V takýchto prípadoch, na vyriešenie vzniknutých pochybností, je lepšie vyšetriť hepatobiobaty.

Detekcia HCV RNA v materiáli pomocou PCR sa používa na nasledujúce účely:

• riešenie sporných výsledkov sérologických štúdií;
• diferenciácia vírusovej hepatitídy C z iných foriem hepatitídy;
• detekcia akútneho štádia ochorenia v porovnaní s prenesenou infekciou alebo kontaktom; štádiu infekcie novorodencov zo séropozitívnych matiek s HCV;
• monitorovanie účinnosti antivírusovej liečby.

Pacienti s podozrením na vírusovú hepatitídu C:

• darcovia;
• osoby s rizikovými faktormi;
• osoby so zvýšenou aktivitou ALT;
• pacientov s akútnou hepatitídou

Všetky vyššie uvedené znaky hodnotenia výsledkov a prístupov k diagnóze HCV pomocou PCR sa vzťahujú aj na iné infekcie.

Metóda PCR umožňuje nielen detegovať HCV RNA v študovanom materiáli, ale aj stanoviť jej genotyp. Určenie genotypu vírusu má veľký význam pre výber pacientov s chronickou vírusovou hepatitídou C na liečbu interferónom-alfa a ribavirínom. Laboratórne indikácie na liečbu chronickej vírusovej hepatitídy C interferónom alfa sú nasledovné:

• zvýšená aktivita transaminázy;
• prítomnosť HCV RNA v krvi;
• genotyp 1 HCV;
• vysoká hladina vírusu v krvi (viac ako 8 x 10 ⁵ kópií / ml).

V súčasnosti môže byť obsah HCV RNA v krvnom sére kvantifikovaný pomocou PCR, čo je veľmi dôležité pre kontrolu liečby interferónom alfa. Hladiny virémie hodnotí takto: obsah HCV RNA z 10 ² až 10 ⁴ kópií / ml - slabé; od 10 ⁵ do ¹⁰⁷ kópií / ml - médium, viac ako 10 ⁸ kópií / ml - vysoké. Pri účinnej liečbe sa úroveň viremie znižuje.

[1], [2], [3], [4]