Polymerázová reťazová reakcia (PCR) pri diagnostike infekčných ochorení
Posledná kontrola: 23.04.2024
Všetok obsah iLive je lekársky kontrolovaný alebo kontrolovaný, aby sa zabezpečila čo najväčšia presnosť faktov.
Máme prísne smernice týkajúce sa získavania zdrojov a len odkaz na seriózne mediálne stránky, akademické výskumné inštitúcie a vždy, keď je to možné, na lekársky partnerské štúdie. Všimnite si, že čísla v zátvorkách ([1], [2] atď.) Sú odkazmi na kliknutia na tieto štúdie.
Ak máte pocit, že niektorý z našich obsahov je nepresný, neaktuálny alebo inak sporný, vyberte ho a stlačte kláves Ctrl + Enter.
PCR - jedna z metód pre diagnostiku DNA, ktoré umožňujú zvýšiť počet kópií detekovateľné časti genómu (DNA) baktérií alebo vírusov, je miliónkrát za použitia DNA polymerázy. Test pre tento konkrétny genomového segmentu nukleovej kyseliny opakovane násobená (zosilneného), ktorý umožňuje jeho identifikáciu. Po prvé, je molekula DNA baktérie alebo vírusy zahrievaním rozdelená do dvoch reťazcov, potom v prítomnosti syntetizovaných DNA primérov (sekvencie nukleotidov špecifických pre definované genomového) je so väzba s komplementárnym úseky DNA, syntetizuje druhé vlákno nukleovej kyseliny po každého primeru v prítomnosti termostabilné DNA polymerázy , Ukazuje sa, že dve molekuly DNA. Tento proces sa opakuje mnohokrát. Pre diagnózu, iba jedna molekula DNA, tj. Jedna baktéria alebo vírus častice. Reakciou ďalší krok - syntéza DNA v molekule RNA za použitia enzýmu reverznej transkriptázy - umožnila testovať RNA vírusy, ako je vírus HCV. PCR - trojstupňový proces, opakované cykly denaturácia, nasadanie primérov, syntéza DNA (polymerizácie). Množstvo DNA syntetizované bol identifikovaný pomocou ELISA alebo elektroforéza.
PCR môže byť použitá v inom biologickom materiáli - sérum alebo krvnej plazmy, škrabanie z močovej trubice, biopsia, pleurálnej tekutiny, cerebrospinálnej tekutiny, atď. Prvá PCR bola použitá pre diagnostiku infekčných ochorení, ako sú vírusové hepatitídy B, vírusu hepatitídy C, vírusovej hepatitídy D, CMV infekcie, infekčné sexuálne prenosnou infekcie (kvapavka, odpadky diynaya, mykoplazmy, Ureaplasma infekcie), tuberkulóza, HIV -infektsiya atď.
Výhoda PCR pri diagnostike infekčných ochorení oproti iným metódam výskumu je nasledovná:
- pôvodca infekcie sa môže nachádzať v akomkoľvek biologickom prostredí tela vrátane materiálu získaného biopsii;
- Je možné diagnostikovať infekčné choroby v najskorších štádiách ochorenia;
- Je možné kvantitatívne vyhodnotenie výsledkov výskumu (koľko vírusov alebo baktérií sa nachádza v skúmanom materiáli);
- vysoká citlivosť metódy; napríklad citlivosť PCR pre detekciu DNA vírusu hepatitídy B v krvi je 0,001 pg / ml (približne 4 x 10 2 kópií / ml), zatiaľ čo citlivosť metódy DNA hybridizáciou za použitia rozvetvené sondy - 2,1 pg / ml (približne 7 x 10 5 kópií / ml).
[