Rabdovírusy sú pôvodcami besnoty a vezikulárnej stomatitídy

Besnota je akútne infekčné ochorenie spôsobené rabdovírusom, ktoré sa vyskytuje, keď človeka uhryzne choré zviera alebo keď sa sliny chorého zvieraťa dostanú do kontaktu s poškodenou kožou alebo sliznicami. Táto infekcia centrálneho nervového systému je takmer vždy smrteľná.

Prvé zmienky o chorobe prenášanej uhryznutím psom, ktorá je svojim popisom veľmi podobná besnote, sa nachádzajú v klinovitých hlinených tabuľkách zo starovekej Mezopotámie, ktoré pochádzajú z 3. tisícročia pred Kristom. Vírus izoloval a oslabil pasážami na mozgu králika v roku 1882 I. Pasteur.

Vezikulárna stomatitída – ochorenie koní, hovädzieho dobytka a ošípaných, niekedy aj ľudí, ktoré prebieha benígne – je tiež spôsobená rabdovírusom. Tento vírus je pre ľudí slabo patogénny. Bol študovaný lepšie ako všetky rabdovírusy.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Životný cyklus

Rabdovírusy sú čeľaď, ktorá zahŕňa tri rody: Vesikulovírus (10 cicavčích vírusov, typickým je vírus vezikulárnej stomatitídy alebo VSV); yssavírus (6 sérologicky príbuzných vírusov, typickým je vírus besnoty); Sigmavírus (jediným zástupcom je vírus sigma-drozofily). Šesť vírusov, ktoré spôsobujú choroby rýb, a 13 vírusov, ktoré postihujú rastliny, zostáva neklasifikovaných. Rabdovírusy sa vyznačujú viriónom v tvare tyčinky alebo guľky: dlhý 60 – 400 nm a široký 60 – 85 nm. Častice sú obklopené dvojvrstvovou lipidovou membránou podobnou membráne s vyčnievajúcimi hrotmi dlhými 10 nm a širokými 3 nm. Pod membránou sa nachádza ribonukleokapsida so špirálovým typom symetrie, v ktorej sú pod elektrónovým mikroskopom viditeľné pruhy. Genóm rabdovírusov je reprezentovaný negatívnou jednovláknovou lineárnou nefragmentovanou molekulou RNA s molekulovou hmotnosťou 3,8 MDa; Bolo nájdených päť génov kódujúcich syntézu štrukturálnych proteínov a bolo určené poradie ich usporiadania. Na 3'-konci sa nachádza gén nukleokapsidového proteínu N (50 kDa). Nasleduje gén proteínu NSV (30 kDa), jednej zo zložiek vírusovej transkriptázy, ktorá je súčasťou nukleokapsidy. Ďalší gén kóduje matrixový proteín M (30 kDa) a vystieľa dvojvrstvovú lipidovú membránu zvnútra. Ďalej nasleduje gén proteínu G (65 kDa), vonkajšieho glykoproteínu vírusovej superkapsidy. Na 5'-konci sa nachádza gén vysokomolekulárnej zložky vírusovej transkriptázy, proteínu L (160 kDa).

Interakcia rabdovírusov s bunkami a ich reprodukcia prebieha podľa nasledujúcej schémy: adsorpcia vírusu na bunke (glykoproteín G) - preniknutie do bunky endocytózou - fúzia s lyzozómovou membránou - deproteinizácia vírusu. Pôsobením viriónovej transkriptázy (RNA polymerázy) sa tvorí cRNA, ktorá slúži ako matrica pre syntézu vRNA a plní funkciu mRNA. Následne sa na ribozómoch hostiteľskej bunky syntetizujú vírusovo špecifické proteíny. Proteíny M a G sú vložené do plazmatickej membrány. Nukleokapsida vytvorená počas interakcie vRNA s proteínmi N, L a NS, prechádzajúca cez membránu, je obalená superkapsidou. Zrelý virión sa od bunky oddeľuje pučaním.

Vírus besnoty je svojou štruktúrou a vlastnosťami intracelulárnej reprodukcie veľmi podobný vírusu vezikulárnej stomatitídy. Dôležitou vlastnosťou týchto vírusov je výrazná inhibícia procesov biosyntézy bielkovín v hostiteľskej bunke blokovaním iniciácie translácie. Existuje niekoľko sérovariantov vírusov vezikulárnej stomatitídy, ktoré sa líšia G proteínom, ktorý je zároveň ochranným antigénom.

Vírusy sa dobre množia v kuracích embryách, bunkách obličiek novonarodených škrečkov a v ľudských diploidných bunkových kultúrach. V bunkových kultúrach vírus vezikulárnej stomatitídy zvyčajne spôsobuje cytopatické účinky a bunkovú smrť a niekedy aj symplastogenézu.

Vírus besnoty má široké spektrum hostiteľov. Všetky teplokrvné živočíchy sú naň citlivé. Stupeň patogenity rôznych kmeňov vírusov besnoty pre rôzne zvieratá nie je rovnaký. U niektorých druhov netopierov sa vírus adaptoval iba na slinné žľazy bez toho, aby spôsoboval príznaky ochorenia; infekcia iných zvierat vždy vedie k smrti.

Kmene vírusov besnoty kolujúce v prírode medzi zvieratami sa nazývajú pouličné kmene. Spôsobujú ochorenia s pomerne dlhou inkubačnou dobou a zvyčajne tvoria špecifické inklúzne telieska v cytoplazme buniek. Infikované zvieratá môžu pociťovať dlhé obdobie nepokoja a agresivity. Vírus môže preniknúť do slinných žliaz a centrálneho nervového systému. Postupné pasáže v mozgu králikov vedú k tvorbe fixovaného vírusu, ktorý sa nedokáže ďalej reprodukovať v žiadnych bunkách okrem nervových buniek. Fixovaný vírus sa rýchlo reprodukuje, inkubačná doba je krátka, inklúzie v bunkách sa nachádzajú zriedkavo. Tento vírus je patogénny iba pre králiky.

Vírus besnoty nie je vo vonkajšom prostredí veľmi stabilný, rýchlo sa inaktivuje pri vystavení ultrafialovým lúčom alebo slnečnému žiareniu. Pri varení hynie po 2 minútach, pri teplote 60 °C - po 5 minútach. Rýchlo sa inaktivuje roztokmi lyzolu, chlóramínu, fenolu, rozpúšťadiel tukov a trypsínu. V mŕtvolách zvierat, najmä pri nízkych teplotách, prežíva až 4 mesiace.

Imunita

Keďže besnota je smrteľná, imunita po infekcii nebola skúmaná. Bolo zistené, že protilátky sa môžu tvoriť počas ochorenia a po očkovaní. Imunita po očkovaní pretrváva až 1 rok.

Epidemiológia besnoty

Besnota je typické zoonotické ochorenie. Hlavným zdrojom a rezervoárom vírusu sú divé a domáce mäsožravce: psy, mačky, vlky, šakaly, líšky, skunky, mangusty, netopiere. Ochorenie sa zvyčajne prenáša uhryznutím alebo slinou na poškodenej koži alebo slizniciach, pretože vírus sa množí v slinných žľazách zvieraťa. Choré zviera je nákazlivé nielen počas choroby, ale aj počas inkubačnej doby 2-3 dni, niekedy aj dlhšie, kým sa objavia prvé príznaky ochorenia.

[ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Príznaky besnoty

Primárna reprodukcia vírusu besnoty prebieha vo svalovom tkanive v blízkosti vstupných brán, potom patogén preniká do receptorov periférnych senzorických nervov a cez endoneurium Schwannových buniek alebo perineurálne priestory vstupuje do centrálneho nervového systému. Tam sa vírus reprodukuje v neurónoch hipokampu, predĺženej miechy, hlavových nervov a sympatických ganglií, čo spôsobuje zápalové, dystrofické a nekrotické zmeny v nervovom systéme. Počas tohto obdobia sa vírus reprodukuje aj v bunkách slinných žliaz.

Najkratšia inkubačná doba nastáva pri uhryznutí do hlavy a rúk, dlhšia - pri uhryznutí do dolných končatín; vo všeobecnosti sa pohybuje od 8 do 90 dní. Vo vývoji ochorenia sa rozlišujú tri štádiá: prekurzory (depresia), vzrušenie, paralýza. Najprv sa objavuje úzkosť, strach, úzkosť, nepríjemné pocity v oblasti uhryznutia. Po 1-3 dňoch sa objavuje výrazné vzrušenie, kŕče dýchacích a prehĺtacích svalov, objavuje sa výrazná hydrofóbia (hydrofóbia je druhý názov pre toto ochorenie). Pre toto obdobie je charakteristická agresia, sluchové a zrakové halucinácie. Potom sa vyvinie paralýza a po 5-7 dňoch od začiatku ochorenia nastáva smrť z paralýzy srdcového alebo dýchacieho centra.

Laboratórna diagnostika besnoty

Besnota sa diagnostikuje pomocou viroskopických, biologických a sérologických metód. Mozgové tkanivo (mozgová kôra a mozoček, Ammonov roh, predĺžená miecha) a tkanivo slinných žliaz sa vyšetrujú v histologických rezoch alebo náteroch uhynutých zvierat a ľudí. V pyramídových bunkách mozgového tkaniva sa nachádzajú špecifické eozinofilné inklúzie (Babesh-Negriho telieska). Nachádzajú sa v cytoplazme v blízkosti jadra a sú to zhluky vírusových nukleokapsidov. Ich výskyt je spôsobený ťažkým dozrievaním viriónov v nervových bunkách. Babesh-Negriho telieska sa detegujú pomocou špeciálnych farbiacich metód (Romanovsky-Giemsa, Mann, Turevich, Muromtsev atď.). Majú charakteristickú zrnitú štruktúru s bazofilnými granulami na acidofilnom pozadí, ich veľkosť je 4-10 μm. Nevýhodou tejto metódy je, že ju možno použiť až po smrti človeka alebo zvieraťa.

Vírusový antigén je možné detegovať v rovnakých preparátoch pomocou priamej alebo nepriamej imunofluorescenčnej reakcie.

Vírus besnoty sa môže izolovať zo slín chorých ľudí alebo zvierat, ako aj z čerstvého pitevného materiálu (mozgové tkanivo, tkanivo submandibulárnych slinných žliaz) intracerebrálnou infekciou bielych myší a králikov alebo škrečkov - intramuskulárne. Zvieratá vyvinú paralýzu a následne smrť. Mozog uhynutého zvieraťa by sa mal vyšetriť na detekciu Babes-Negriho teliesok alebo vírusového antigénu pomocou imunofluorescenčnej reakcie.

Protilátky je možné u očkovaných jedincov detegovať pomocou neutralizácie, fixácie komplementu, imunofluorescencie a imunosorbentných reakcií (RIM a IFM).

Špecifická prevencia a liečba besnoty

Prevencia besnoty spočíva v boji proti besnote u zvierat a v prevencii rozvoja choroby u ľudí, ktorých pohryzlo alebo olízalo choré zviera. Program na elimináciu besnoty u suchozemských zvierat treba posudzovať z dvoch hľadísk:

1. eradikácia besnoty u psov v mestách a
2. zlepšenie prirodzených ohnísk infekcie besnoty.

Skúsenosti mnohých krajín presvedčivo dokazujú možnosť kontroly mestských epizootií registráciou a imunizáciou psov. Na úplnú elimináciu besnoty je však potrebné zlepšiť jej prirodzené ohniská a vyhubenie divých mäsožravcov prináša len dočasný a lokálny výsledok a ohrozuje rozvoj nežiaducich environmentálnych následkov. V zahraničí už existujú rozsiahle pozitívne skúsenosti s prevenciou besnoty u divých zvierat (líšky, mývaly) kŕmením návnadami obsahujúcimi vakcínu. Perorálne vakcíny proti besnote sa v tomto ohľade považujú za veľmi sľubné: živá modifikovaná celoviriónová vakcína z atenuovaných vakcinačných kmeňov (SAD-Bern, Vnukovo-32) a rekombinantná geneticky modifikovaná perorálna vakcína s použitím vírusu vakcínie ako vektora exprimujúceho gén G-proteínu vírusu besnoty.

V prípade uhryznutia alebo slintania je potrebné ranu alebo kožu v mieste kontaktu so slinami dôkladne umyť mydlovou vodou, ranu kauterizovať alkoholovým roztokom jódu a začať špecifickú profylaxiu vakcínou proti besnote a gamaglobulínom proti besnote. Namiesto predtým používanej vysoko reaktogénnej Fermiho vakcíny (z mozgového tkaniva oviec infikovaných fixným vírusom) sa teraz na prevenciu ochorenia odporúča inaktivovaná kultivačná vakcína proti besnote, ktorá sa vyrába na bunkovej kultúre infikovanej atenuovaným vírusom besnoty (kmeň Vnukovo-32). Núdzové terapeutické a profylaktické očkovanie sa vykonáva vakcínou alebo vakcínou v kombinácii s gamaglobulínom proti besnote podľa schém uvedených v návode na ich použitie. Schéma očkovania je určená závažnosťou uhryznutia, jeho lokalizáciou, časom uplynulým od uhryznutia, informáciami o hryzavom zvierati a ďalšími okolnosťami.