Salmonella - patogény typu týfus a paratyfid

Týfus - ťažký akútny infekčné ochorenie charakterizované hlbokým všeobecného intoxikáciou, bakteriémiou a špecifické lymfatických črevnej prístroja. Intoxikácia sa prejavuje silnou bolesťou hlavy, zmätenosťou, delíriom (tyfus z gréckeho tyfa - hmla). Týfus ako samostatná jednotka nozologických prvýkrát pokúsil izolovať ruský lekár AG Pyatnitskii späť v roku 1804, ale nakoniec urobil v roku 1822 R. Breton, ktorý odlíšiť toto ochorenie od črevné tuberkulóze a navrhol nákazlivé povahe brušného týfusu.

Pôvodcom brušný týfus - Salmonella typhi - bol objavený v roku 1880 K. Ebert a izolovať v čistej kultúre v roku 1884 K. Gaffki. Čoskoro boli izolované a študované patogény paratýfusom A a B - S. Paratyphii A a S. Paratyphii B. Salmonella Rod zahŕňa veľkú skupinu baktérií, ale iba tri z nich - S. Typhi, S. Paratyphii A a S. Paratyphii B - spôsobiť ochorenie u osoby s klinickým obrazom horúčky týfusu. Morfologicky sú nerozlíšiteľné - krátke Gram-negatívne tyčinky so zaoblenými koncami a dĺžke 1-3,5 um, priemer 0,5-0,8 mikrónov; spóry a kapsuly netvoria, majú aktívnu pohyblivosť (peritrichi). Obsah G + C v DNA je 50 - 52% mol.

Príčinnými faktormi tyfu a paratypu sú fakultatívne anaeróby, teplotný optimál pre rast 37 ° C (ale môže rásť v rozmedzí od 10 do 41 ° C), pH 6,8-7,2; nie sú náročné na živné médiá. Rast v bujóne je sprevádzaný zákalom, na MPA sa vytvárajú jemné, hladké, priesvitné kolónie s priemerom 2 až 4 mm. Samotné kolónie S.typhi, ktoré majú antigén Vi, sú však zakalené. Kolónie S. Paratyphi V hrubšej forme, po niekoľkých dňoch, tvoria na svojom okraji zvláštne valce. Na prostrediach Endomo sú kolónie všetkých troch salmonelov bezfarebné, na bizmut-sulfitágare - čierne. V prípade disociácie na hustom médiu rastú R-kolónie. Selektívne prostredie pre pôvodcov horúčky týfusu a paratyfoidu je žlč alebo žlčový vývar.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Biochemické vlastnosti patogénov týfusu a paratyfidu

Patogény týfusu a paratýfusu dať pozitívnu reakciu s MR, netvorí indol nie je skvapalnený želatína, zníženie dusičnany na dusitany, netvorí acetoínu. S. Typhi nerastú na hladnom agare s citrátom. Hlavný biochemické rozdiely medzi patogény týfusu a paratýfusu k záveru, že S. Typhi nejaké fermentuje glukózu a iné sacharidy na kyselinu iba, je S. Paratyphii A a S. Paratyphii B - a za vzniku kyseliny a plynu.

S. Typhi na fermentáciu xylózy a arabinózy sú rozdelené do štyroch biochemických typov: I, II, III, IV.

Xylóza + - + -

Arabinóza - - + +

[7], [8], [9], [10],

Antigénna štruktúra patogénov týfusu a paratyfidu

Salmonely majú O a H antigény. Na O-antigénoch sú rozdelené na veľké množstvo séroskupín a podľa H-antigénov na sérotypy (ďalšie podrobnosti o sérologickej klasifikácii salmonely nájdete v ďalšej časti). S. Typhi, S. Paratyphi A a S. Paratyphi B sa navzájom líšia, pokiaľ ide o O-antigény (patria k rôznym séroskupinám) a H-antigény.

V roku 1934 A. Felix a R. Pitt zistili, že S. Typhi okrem O a H antigénov má ďalší povrchový antigén, ktorý nazývajú antigén vírusu (Vi antigén). Podľa svojej chemickej povahy sa Vi-antigén líši od O- a H-antigénov, skladá sa z troch rôznych frakcií, ale jeho základom je komplexný polymér N-acetylgalaktosaminurónová kyselina s hmotnosťou 10 MD. Vi-antigén sa zvyčajne vyskytuje v čerstvo izolovaných kultúrach, ale ľahko sa stratí pod vplyvom rôznych faktorov (najmä pri pestovaní pri teplotách nad 40 ° C a pod 20 ° C, v médiách s kyselinou karbolovou atď.), pri dlhom skladovaní kultúr, je počas 10 minút zničená pri teplote 100 ° C. Vzhľadom k tomu, že sa nachádza viac ako povrchné O-antigén, jeho prítomnosť zabraňuje aglutinácia kultúra S. Typhi O-špecifické sérové, tak kultúra nutne kontrolované aglutinácia s Vi-séra. Naopak, strata antigénu Vi vedie k uvoľneniu O-antigénu a k obnoveniu O-aglutinácie, avšak vi-aglutinácia sa stráca. Kvantitatívny obsah Vi-antigénu v S. Typhi sa môže veľmi líšiť, preto F. Kauffmann navrhol klasifikáciu S. Typhi podľa obsahu Vi-antigénu do troch skupín:

• čisté v-formy (nemecká víla - veľa);
• čisté w-formy (nemecký wenig - malý);
• stredné vw-formy.

Boli zistené tri neobvyklé mutanty S. Typhi: Vi-I-R-forma, bunky nemajú H- a O-antigény, ale trvalo zachovávajú Vi-antigén; O-901 - bez H- a Vi-antigénov; H-901 - obsahuje O- a H-antigény, ale nemá Vi-antigén. Všetky tri antigény: O-, H- a Vi- majú výrazné imunogénne vlastnosti. Prítomnosť Vi-antigénov umožňuje kultiváciu S. Typhi fágového typu. Existujú dva typy fágov, ktoré lýzujú iba tie kultúry, ktoré obsahujú antigén Vi: Vi-I je univerzálny fág, lýza väčšinu kultúr S. Typhi obsahujúcich Vi; a sada fágov Vi-II, ktoré selektívne lyzujú kultúru S. Typhi. Toto bolo prvýkrát ukázané v roku 1938 J. Craigom a K. Ianom. Pomocou vi-fágov typu II rozdelili S. Typhi na 11 typov fágov. V roku 1987 bolo identifikovaných 106 rôznych Vi-fágov typov S. Typhi. Ich citlivosť na zodpovedajúce fágy je stabilným znakom, preto fagotyp má dôležitý epidemiologický význam.

Boli tiež vyvinuté schémy fagotypizácie S. Paratyphi A a S. Paratyphi B, podľa ktorých sú rozdelené na desiatky fagotypov. Je významné, že fagotypy salmonely sa nemôžu navzájom líšiť iným spôsobom.

[11], [12], [13], [14],

Odolnosť patogénov týfusu a paratyfidu

Kauzívne látky tyfu a paratyfidu vo vonkajšom prostredí (voda, pôda, prach) pretrvávajú v závislosti od podmienok niekoľko dní až niekoľko mesiacov. Prúdiaca voda môže prežiť až 10 dní, kongestívne - do 4 týždňov na zelenine a ovocí. - 5-10 dní na riad - až 2 týždne, na masle, syre. - 3 mesiace, na ľade - do 3 mesiacov , a viac; zahrievanie pri teplote 60 ° C zabije za 30 minút a varenie - okamžite. Bežné chemické dezinfekčné prostriedky ich zabijú počas niekoľkých minút. Obsah aktívneho chlóru v kohútikovej vode v dávke 0,5-1,0 mg / l alebo ozonizácia vody zabezpečuje jeho spoľahlivú dezinfekciu ako zo Salmonella, tak aj z iných patogénnych črevných baktérií.

Faktory patogénnosti patogénov týfusu a paratyfidu

Najdôležitejším biologickým znakom pôvodcov horúčky týfusu a paratyfoidu A a B je ich schopnosť odolávať fagocytóze a množiť sa v bunkách lymfatického systému. Nevytvárajú exotoxíny. Hlavným faktorom ich patogenity je okrem antigénu Vi endotoxín, ktorý je charakterizovaný nezvyčajne vysokou toxicitou. Takéto patogénne faktory, ako je fibrinolyzín, plazmokoaguláza, hyaluronidáza, lecitináza atď., Sa zriedkavo nachádzajú v patogénoch tyfových a paratyfových infekcií. Najvyššia frekvencia sa vyskytuje v DNA-ase (75-85% zo študovaných kultúr S. Typhi a S. Paratyphi B). Bolo preukázané, že kmene S. Typhi, ktoré majú plazmid s 6 mM, sú vírusnejšie. Z tohto dôvodu zostáva otázka patogénnych faktorov týchto salmonel.

[15], [16], [17],

Postinfekčná imunita

Trvalé, dlhotrvajúce, opakované ochorenia týfusu a paratyfidu sú zriedkavé. Imunita je spôsobená objavením sa protilátok proti Vi-, O- a H-antigénom, imunitných pamäťových buniek a zvýšenej aktivity fagocytov. Postvakcinačná imunita, na rozdiel od postinfekcie, je krátkodobá (približne 12 mesiacov).

Epidemiológia týfusu a paratyfidu

Zdroj horúčky týfus a paratyfid A je len osoba, chorý alebo nosič. Zdrojom paratyfódu B, okrem ľudí, môžu byť aj zvieratá vrátane vtákov. Mechanizmus infekcie je fekálne-orálne. Infekčná dávka S. Typhi 105 buniek (spôsobuje ochorenie 50% dobrovoľníkov), infekčné dávky salmonely paratyfoidu A a B sú oveľa vyššie. Infekcia sa vyskytuje hlavne v dôsledku priameho alebo nepriameho kontaktu, ako aj prostredníctvom vody alebo potravy, najmä mlieka. Najväčšie epidémie spôsobili infekciu patogénmi (vodné epidémie).

[18], [19], [20], [21], [22],

Príznaky týfus a paratyfid

Inkubácia pre týfus je 15 dní, ale môže sa pohybovať od 7 do 25 dní. Závisí to od infekčnej dávky, virulencie patogénu a imunitného stavu pacienta. Patogenéza a klinický obraz horúčky týfusu a paratyfoidu A a B sú veľmi podobné. Pri vývoji ochorenia sú jasne uvedené nasledujúce štádiá:

• fáze invázie. Príčinná látka preniká ústami do tenkého čreva;
• prostredníctvom lymfatických cestách Salmonella vstúpi do lymfatických formácie tenkého čreva submukóze (Peyerových plátov a osamelé folikuly) a ich reprodukciu, dôvodom lymphangitis a lymfadenitídou (pôvodné brušný týfus, granule);
• bakterémia - výstup patogénu vo veľkých množstvách do krvi. Štádium bakteriémie sa začína na konci inkubačného obdobia a môže (pri absencii účinnej liečby) pokračovať v celej chorobe;
• stupeň intoxikácie nastáva v dôsledku rozpadu baktérií pôsobením baktericídnych vlastností krvi a uvoľňovania endotoxínov;
• štádiu difúzie parenchýmu. Z krvi sa salmonely absorbujú makrofágy kostnej drene, sleziny, lymfatických uzlín, pečene a ďalších orgánov. Veľké množstvo pôvodcu týfusu sa hromadia v žlčových ciest v pečeni a žlčníku, kde sa nájde priaznivé podmienky pre ich rozmnožovanie a kde baktericídne vlastnosti krvi oslabil vplyv žlče;
• vylučujúca alergická fáza. Keďže tvorba imunity začína proces uvoľňovania z patogénu. Tento proces vykonávajú všetky žľazy: slinné žľazy, črevá, pot, mliečne výrobky (počas kŕmenia dieťaťa), močový systém a najmä aktívne - pečeň a žlčník. Salmonella uvoľnená z žlčníka opäť vstupuje do tenkého čreva, z ktorého sa časť vylučuje výkalmi a niektorí znova zasiahnu do lymfatických uzlín. Sekundárne zavedenie do už citovaných uzlín spôsobuje v nich hyperergickú reakciu, ktorá sa prejavuje formou nekrózy a tvorby vredov. Táto fáza je nebezpečná možnosťou perforácie črevnej steny (vredov), vnútorného krvácania a vývoja peritonitídy;
• štádiu obnovy. Hojivý proces vredov nastáva bez toho, aby na zemi vyzerali znetvorené jazvy, vyčistené z necrotických nájazdov.

Na klinickom obrázku choroby sa rozlišujú nasledujúce obdobia:

• I počiatočná fáza - štadión incrementi (1. Týždeň): postupné zvýšenie teploty na 40-42 ° C, zvýšenie intoxikácie a ďalšie prejavy ochorenia.
• II - štádium maximálneho vývoja všetkých symptómov - stadium acme (2-3 týždne choroby): teplota je udržiavaná na vysokej úrovni;
• III - štádium recesie ochorenia - štvrtý dekres (štvrtý týždeň ochorenia): postupné zníženie teploty a zníženie prejavov iných symptómov;
• IV - stupeň obnovy.

8-9 dni choroby, a niekedy neskôr, mnoho pacientov sa objaví roseolous vyrážku na koži brucha, hrudníka a chrbta. Vyrážka (malé červené škvrny) je dôsledkom miestnych výrobných a zápalových procesov alergickej povahy v povrchových vrstvách kože okolo lymfatických ciev, ktoré obsahujú hojné patogén. Klinické zotavenie nie vždy zodpovedá bakteriologickému. Približne 5% pacientov sa stalo chronickými nosičmi salmonely tyfus alebo paratyfid. Dôvody, na ktorých dlhodobo (dlhšie ako 3 mesiace a niekedy aj roky) nosičov salmonel, zostávajú nejasné. Známy hodnota v nosiči formácie hrá lokálneho zápalu v žlči (niekedy močového) traktu, ktoré často vznikajú v súvislosti s týfus, paratýfus infekcií alebo zhoršili v dôsledku týchto infekcií. Avšak, rovnako dôležitú úlohu pri tvorbe dlhej nosnej Salmonella týfusu a paratýfusom A a B hrá L-transformácie z nich. V tvare písmena L Salmonella stratiť H-, a čiastočne 0-Vi-antigény sú zvyčajne umiestnené, intracelulárne (v makrofágoch kostnej drene), a preto sú k dispozícii buď pre chemoterapiu alebo protilátky, a môžu pretrvávať v tele po dlhú dobu chorého človeka. Po návrate do pôvodného tvaru a úplne jeho antigénne štruktúry salmonela znova sa opäť virulentný preniknúť do žlčových ciest, zhoršiť proces baktérií, sú vylučované stolicou, a tak nosič stáva zdroj infekcie pre ostatných. Je tiež možné, že tvorba bakteriálneho transportu závisí od určitého deficitu imunitného systému.

Laboratórna diagnostika týfusu a paratyfidu

Najstaršou a najdôležitejšou metódou diagnostiky týfusu a paratyfidu je bakteriologická liečba - získanie krvnej kultúry alebo myelokultúry. Preto skontrolujte krv alebo bodkovanie kostnej drene. Krv lepšie zasiať na Rapoport média (cholánovej pôde doplnené s indikátorom glukózy a plavené sklo) v pomere 1:10 (10 ml média 1 ml krvi). Výsev by mal byť inkubovaný pri 37 ° C najmenej 8 dní a pri zohľadnení možnej prítomnosti L-formulárov - až 3-4 týždňov. Na použitie identifikačných Salmonella izolovaných kultúr (na základe ich biochemických vlastností) diagnostické adsorbovaný séra s obsahom protilátok proti antigénom 02 (S. Paratyphii A), 04 (S. Paratyphii B) a 09 (S. Typhi). Ak izolovaná kultúra S. Typhi nie je aglutinovaná so sérom 09, musí sa skontrolovať s vi-sérom.

Na izoláciu S. Typhi je možné použiť exsudát, ktorý sa získava rozširovaním ružových rastlín s rastlinami rosolov.

Bakteriologické vyšetrenie stolice, moču a žlče sa vykonáva za účelom potvrdenia diagnózy, monitorovanie, bakteriálne obnovu pri prepustení rekonvalescentov a pre diagnostiku baktérií. V tomto prípade sa materiál vopred nasadené na obohacovanie média (média, obsahujúci chemikálie, ako je seleničitan, ktoré inhibujú rast E. Coli a ďalších zástupcov črevnej flóry, ale neinhibujú rast Salmonella) a potom s obohacujúce médiá - pre diferenciálne diagnostické médium ( Endo, sulfitagar bizmutu), aby sa izolujú izolované kolónie a získajú sa od nich čisté kultúry identifikované vyššie uvedenou schémou. Pre detekciu O- a VI-antigénu v sére a stoličky pacientov môžu byť použité DGC TPHA s protilátkou diagnostiky, koagglyutinatsii reakčná jednotkové hemaglutinácia, IFM. Pre urýchlenú identifikáciu S. Typhi sľubuje, že sa ako sonda použije fragment DNA nesúci gén Vi-antigén (identifikačný čas 3-4 hodiny).

Od konca 1. Týždeň choroby u pacientov s sérových protilátok sa objaví, teda pre diagnostiku týfusu v roku 1896, F. Vidal bolo navrhnuté skúmavka aglutinačné reakcie je nasadený. Dynamika protilátok proti S. Typhi je jedinečná: najprv sa objavujú protilátky proti O-antigénu, ale ich titr sa po zotavení rýchlo znižuje; H-protilátky sa objavia neskôr, ale pretrvávajú po ochoreniach a očkovaniach rokov. S ohľadom na túto skutočnosť, je reakcia dať Vidal súčasne oddeliť O- a N-diagnosticums (a tiež paratýfusu diagnosticums A a B), aby sa zabránilo prípadné chyby v dôsledku očkovania skôr presunuté alebo chorobou. Avšak špecifickosť Widal reakcia nie je dostatočne vysoká, takže výhodná aplikácia TPHA otočil, pričom diagnostiky senzibilizovaných erytrocytov alebo O- (O-detekčné protilátka), alebo VI-antigénu (k detekcii VI-protilátky). Najspoľahlivejšia a najzávažnejšia je posledná reakcia (Vi-hemaglutinácia).

Diagnóza bakteriálneho prenosu týfusu a paratyfidu

Jediným dôkazom je izolácia baktérií z kultivačného média S. Typhi, S. Paratyphii A, S. Paratyphii C. Materiál pre túto štúdiu sú dvanástnika, výkaly a moč. Zložitosť problému spočíva v tom, že nosiče nie vždy s týmito substrátmi vylučujú, sú tu prestávky a pomerne dlho. Ako pomocné metódy, ktoré umožňujú úzky rozsah jedincov skúmaných sérologické testy použitie (simultánne detekcia O-, H-, VI-alebo O, VI-protilátky ukazuje na možnú prítomnosť patogénu v tele) a alergické kožné test s Vi-Tifina River. Posledne uvedený obsahuje antigén Vi, ktorý pri interakcii s protilátkami Vi poskytuje lokálnu alergickú reakciu vo forme sčervenania a opuchu počas 20 až 30 minút. Pozitívna reakcia s Vi-tyfínom naznačuje prítomnosť Vi-protilátok v tele a možnú prítomnosť S. Typhi. Na identifikáciu L-foriem S. Typhi sa navrhujú špeciálne imunofluorescenčné protilátky (voči L-formujúcim antigénom patogénu). V. Murom ponúkol originálnu metódu na detekciu bakteriálnych nosičov. Spočíva v štúdiu tampónov, súčasne vhadzovaných do kanalizačných poklopov po celej kanalizačnej sieti osady.

[23], [24], [25], [26], [27], [28]

Liečba týfusu a paratyfidu

Liečba týfusovej horúčky je založená na použití rôznych antibiotík, ku ktorým patogény vykazujú vysokú citlivosť (levomycetin, ampicilín, tetracyklíny atď.). Antibiotiká znižujú závažnosť priebehu choroby a skracujú jej trvanie. Prenos R-plazmidov do salmonely z E. Coli alebo iných enterobaktérií však môže viesť k vzniku nebezpečných klonov epidémie.

Špecifická profylaxia týfusu a paratyfidu

Namiesto siedmich rôznych predtým používaných vakcín proti týfusu sa od roku 1978 vyrába iba jedna v našej krajine - chemický sorbovaný bovinný-týfus monovalentný. Avšak, vzhľadom na to, že týfus epidémia choroby presunul do kategórie sporadické (a toto bolo umožnené predovšetkým vďaka zlepšeniu vodovodných a kanalizačných systémov a zlepšenie sociálnej kultúru populácie), že je potrebné pre masovú imunizáciu proti nemu zmizol. Preto sa očkovanie z týfusu uskutočňuje iba v prípade epidemických indikácií.