Vírus chrípky A

Vírus chrípky A je virión, ktorý má sférický tvar a priemer 80-120 nm, jeho molekulová hmotnosť je 250 MD. Genóm vírusu je reprezentovaný jednovláknovými fragmentovanými (8 fragmentmi) negatívnej RNA s celkovou hmotnosťou 5 MD. Typ symetrie nukleokapsidu je špirálovitý. Vírus chrípky má supercapsid (membránu) obsahujúci dva glykoproteíny - hemaglutinín a neuraminidázu, ktoré vyčnievajú nad membránami vo forme rôznych trhlín. Hemaglutinín má trimernú štruktúru s hmotnosťou 225 kD; m každého 75 kD monoméru. Monomér pozostáva z menšej podjednotky s hmotnosťou 25 kD (HA2) a väčšej podjednotky s hmotnosťou 50 kD (HA1).

Hlavné funkcie hemaglutinínu:

• rozpoznáva bunkový receptor - mukopeptid, ktorý má N-acetylneuram - novú (sialovú) kyselinu;
• zaisťuje fúziu viriónovej membrány s membránou bunky a membránami jej lyzozómov, tj je zodpovedná za penetráciu viriónu do bunky;
• určuje pandemickú povahu vírusu (zmena hemaglutinínu - príčina pandémie, jeho variabilita - chrípkové epidémie);
• má najväčšie ochranné vlastnosti, zodpovedné za vznik imunity.

V prípade vírusu chrípky A u človeka, u ľudí a cicavca bolo zistených 13 typov hemaglutinínu odlišujúcich antigén, ktorým bolo priradené koncovým číslovaním (dH1dH103).

Neuraminidáza (N) je tetramér s hmotnosťou 200-250 kD, pričom každý monomér má hmotnosť 50 až 60 kD. Jeho funkcie sú:

• zabezpečenie diseminácie viriónov štiepením neuraminovej kyseliny z novo syntetizovaných viriónov a bunkovej membrány;
• spolu s hemaglutinínovým stanovením pandemických a epidemických vlastností vírusu.

Vírus chrípky A zistil 10 rôznych variantov neuraminidázy (N1-N10).

Virion nukleokapsidových fragmenty sa skladá z 8 vRNA a kapsidových proteínov, ktoré tvoria špirálový kábel. Na 3 'koncoch všetkých 8 fragmentov vRNA existujú identické sekvencie 12 nukleotidov. 5 'konce každého fragmentu majú rovnakú sekvenciu 13 nukleotidov. Konce 5 'a 3' sú navzájom čiastočne navzájom komplementárne. Táto okolnosť samozrejme umožňuje regulovať transkripciu a replikáciu fragmentov. Každý z fragmentov sa transkribuje a replikuje nezávisle. Pričom každý z nich je pevne viazané štyri kapsidové proteíny: nukleoproteinové (NP), vykonáva štrukturálne a regulačnú úlohu; proteín PB1 - transkriptáza; PB2 - endonukleázu a RA - replikáza. Proteíny PB1 a PB2 majú základné (alkalické) vlastnosti a PA - kyslé vlastnosti. Proteíny PB1, PB2 a PA tvoria polymér. Nukleokapsidový je obklopené matricou proteínu (M1 proteín), ktorý hrá hlavnú úlohu v viriónu morfogeneze a chráni viriónu RNA. M2 proteíny (kóduje jeden z čítacie rámca 7. Fragmentu), NS1 a NS2 (vRNA kódované ôsmy fragment, ktorý má, ako siedmy fragment vRNA dvoma čítacími rámci), sú syntetizované v priebehu replikácie vírusu, ale jej štruktúra nie je zahrnutá.

[1], [2], [3], [4]

Životný cyklus vírusu chrípky A

Chrípkový vírus sa absorbuje na bunkovú membránu v dôsledku interakcie jeho hemaglutinínu s mukopeptidom. Potom vírus vstupuje do bunky pomocou jedného z dvoch mechanizmov:

• fúzia viriónovej membrány s bunkovou membránou alebo
• cesta ohraničená jama - ohraničený bublina - endosom - lysosom - fúzie viriónu membrány s membránou lyzozómoch - na výstupe z nukleokapsida do cytosolu bunky.

Druhý stupeň "stripovanie" z viriónu (ničenia matricového proteínu) sa vykonáva na ceste k jadru. Rysom životného cyklu vírusu chrípky je, že vRNA transkripcie primer potreby. Skutočnosť, že vírus nemôže syntetizovať seba "uzáver", alebo viečko (anglicky cap.) - špeciálne miesto na 5'-konci mRNA, ktorá sa skladá z metylovaného guanínu a 10 až 13 po sebe idúcich nukleotidov, ktoré je nutné uznať mRNA ribozómy. Preto prostredníctvom svojich PB2 proteínových uhryznutie uzáver z bunkovej mRNA, rovnako ako syntézu mRNA v bunkách sa vyskytuje iba v jadre, vírusová RNA musí byť nutne preniknúť najprv do jadra. Preniká do neho vo forme ribonucleoprotein pozostávajúce z 8 RNA fragmenty, príbuzných proteíny NP, PB1, PB2 a PA. Teraz život bunky je úplne podriadená záujmom vírusu, jeho reprodukciu.

Funkcia transkripcie

Tri typy vírusovo špecifických RNA sa syntetizujú v jadre pre vRNA: 1) pozitívne komplementárne RNA (mRNA) použité ako matrice na syntézu vírusových proteínov; obsahujú na 5'-konci čiapočku štiepenú od 5 'konca bunkovej mRNA a na 3'-konci poly-A sekvenciu; 2) kompletná komplementárna RNA (cRNA), ktorá slúži ako templát na syntézu viriónových RNA (vRNA); na 5'-konci cRNA čiapočka chýba, na 3 'konci nie je žiadna poly-A sekvencia; 3) negatívna viriónová RNA (vRNA), ktorá je genómom pre novo syntetizované virióny.

Ihneď pred dokončením syntézy vRNA a cRNA vstupujú do asociácie s kapsidovými proteínmi, ktoré vstupujú do jadra z cytosolu. Avšak len ribonukleoproteíny asociované s vRNA sú zahrnuté vo viriónoch. Ribonukleoproteíny obsahujúce cRNA nielen vstupujú do zloženia viriónov, ale ani neopúšťajú jadro bunky. Vírusové mRNA vstupujú do cytosolu, kde sú preložené. Novo syntetizované molekuly vRNA po spojení s kapsidovými proteínmi migrujú z jadra do cytosolu.

[5], [6], [7], [8], [9]

Vlastnosti translácie vírusových proteínov

Proteíny NP, PB1, PB2, PA a M sú syntetizované na voľných polyribosomes. Proteíny NP, PB1, PB2 a PA syntéza po návrate z cytosolu do jadra, kde sa viaže na novo syntetizované vRNA, a potom sa vracia ako nukleokapsidu do cytosolu. Syntéza proteínu matrix po presune do vnútorného povrchu bunkovej membrány, premiestňovať ho v tejto oblasti bunkových proteínov. H a N proteíny sú syntetizované na ribozómoch spojených s membránami endoplasmatického retikula, prepravovaných na ňom, namáhaných glykozylácia, a sú uložené na vonkajšom povrchu bunkovej membrány, ktoré tvoria hroty naproti M-proteínu, ktorý sa nachádza na svojom vnútornom povrchu. Proteín H sa podrobí v priebehu rezania spracovania na HA1 a HA2.

Záverečná fáza viriónu morfogeneze je riadená M-proteínu. Vzhľadom na to, že interaguje nukleokapsidy; prechádza bunkovou membránou, je pokrytá prvá M-proteínu, a potom sa bunkový lipidovej vrstvy a superkapsidnymi glykoproteíny H a N. životný cyklus vírusu trvá 6-8 hodín a je kompletný Očkovanie novo syntetizovanej viriónu, ktoré sú schopné napadnúť bunky iných tkanív.

Stabilita vírusu vo vonkajšom prostredí je nízka. Je ľahko zničený zahrievaním (pri 56 ° C po dobu 5-10 minút), pod vplyvom slnečného svetla a UV žiarenia a je ľahko neutralizovaný dezinfekčnými prostriedkami.

[10], [11], [12], [13], [14], [15], [16]

Patogenéza a príznaky chrípky A

Doba inkubácie pre chrípku je krátka - 1-2 dni. Vírus sa replikuje v epitelových bunkách sliznice dýchacích ciest prednostne lokalizované v priedušnici, ktorá sa klinicky prejavuje ako suchý kašeľ s mučivé bolesti pozdĺž priedušnice. Degradačné produkty postihnutých buniek vstupujú do krvného obehu, spôsobujú silnú intoxikáciu a zvyšujú telesnú teplotu na 38-39 ° C. Zvýšená vaskulárne permeabilita spôsobená poškodením na endoteliálne bunky môže spôsobiť patologické zmeny v rôznych orgánoch: dot krvácanie do priedušnice, priedušiek a niekedy edém mozgu fatálne. Chrípkový vírus má depresívny účinok na krv a imunitný systém. To všetko môže viesť k sekundárnym vírusovým a bakteriálnym infekciám, ktoré komplikujú priebeh ochorenia.

Postinfekčná imunita

Predchádzajúci Predstava, že potom, čo utrpel chrípkou zostáva slabá a krátkodobé imunita po návrate vyvrátené vírusu H1N1 v roku 1977. Vírus spôsobil ochorenie predovšetkým u ľudí mladších ako 20 rokov, ktoré ich. E. Tí, ktorí nie sú chorí skôr, až do roku 1957. Následne je postinfekčná imunita pomerne intenzívna a dlhotrvajúca, ale má výrazný typovo špecifický charakter.

Hlavná úloha pri tvorbe získanej imunity patrí proti vírusom neutralizujúcim protilátkam, ktoré blokujú hemaglutinín a neuraminidázu, rovnako ako IgA sekrečné imunoglobulíny.

Epidemiológia chrípky A

Zdrojom infekcie je človek, chorý alebo nositeľ, zriedkavo zvieratá (domáce a voľne žijúce vtáctvo, ošípané). Infekcia ľudí sa vyskytuje kvapkami vo vzduchu, inkubačná doba je veľmi krátka (1-2 dni), takže epidémia sa veľmi rýchlo šíri a môže sa vyvinúť do pandémie bez kolektívnej imunity. Imunita je hlavným regulátorom chrípkovej epidémie. Keď sa vytvára kolektívna imunita, epidémia klesá. Súčasne vzhľadom na tvorbu imunity sú vybrané kmene vírusu s modifikovanou antigénnou štruktúrou, primárne hemaglutinín a neuraminidáza; tieto vírusy naďalej spôsobujú ohniská, až kým sa im nezobrazia protilátky. Takýto antigénový drift a udržiava kontinuitu epidémie. Avšak v prípade vírusu chrípky A bola objavená ďalšia forma variability, ktorá sa nazýva posun alebo strih. Je spojená s úplnou zmenou jedného typu hemaglutinínu (menej často - a neuraminidázy) na iný.

Všetky chrípkové pandémie boli spôsobené vírusmi chrípky A, ktoré prešli schiltózou. 1918 pandémia bola spôsobená vírusom H1N1 fenotypu (zabitých asi 20 miliónov ľudí) pandémiu v roku 1957 - H3N2 vírus (chorí s viac ako polovica svetovej populácie), 1968 - H3N2 vírus.

Aby sme vysvetlili dôvody prudkej zmeny typov vírusov chrípky A, boli navrhnuté dve hlavné hypotézy. Podľa hypotézy A. A. Smorodintseva vírus, ktorý vyčerpal svoje epidemické možnosti, nezmizne, ale naďalej cirkuluje v tíme bez zjavného prepuknutia alebo pretrváva dlhodobo v ľudskom tele. Za 10 až 20 rokov, kedy nastane nová generácia ľudí, ktorí nemajú imunitu voči tomuto vírusu, sa stane príčinou nových epidémií. Táto hypotéza je podporená skutočnosťou, že vírus chrípky A s fenotypom H1N1, ktorý zmizol v roku 1957, kedy bol nahradený vírusom h3N2, sa znova objavil po 20 ročnej absencii v roku 1977

Podľa inej hypotézy, vyvinutý a podporovaný mnoho autorov, nových typov vírusu chrípky sú vzhľadom k re-združenia genómov medzi vírusov ľudskej chrípky a vták medzi vírusu vtáčej chrípky medzi vírusmi vtáčej chrípky a cicavcov (ošípaných), S pomocou segmentové konštrukcii vírusového genómu (8 kusov ).

Vírus chrípky A teda má dva spôsoby zmeny genómu.

Bodové mutácie spôsobujúce antigénny posun. Predovšetkým sú pre ne náchylné gény hemaglutinínu a neuraminidázy, najmä v víruse H3N2. Vďaka tomu vírus H3N2 spôsobil v období od roku 1982 do 1998 8 epidémií a až dodnes zostáva epidemická.

Znovuzavedenie génov medzi vírusmi ľudskej chrípky a vírusmi vtáčej a prasacej chrípky. Predpokladá sa, že opätovné spojenie genómov vírusov chrípky A s genómami vírusu vtáčej chrípky a prasacej chrípky je hlavným dôvodom vzniku pandemických variant tohto vírusu. Antigénny drift umožňuje vírusu prekonať existujúcu imunitu u ľudí. Antigénny posun vytvára novú epidemickú situáciu: väčšina ľudí nemá imunitu voči novému vírusu a dochádza k pandémii chrípky. Možnosť takejto opätovnej asociácie genómov vírusov chrípky A sa dokázala experimentálne.

Bolo zistené, že epidémie chrípky u ľudí sú spôsobené vírusmi typu A s iba 3 alebo 4 fenotypmi: H1N1 (H0N1); H3N2; H3N2.

Avšak vírus kuracieho (vtáčej) je tiež významnou hrozbou pre ľudí. Ohniská vtáčej opakovane pozorované, najmä kuracie vírusu H5N1 spôsobil miliónov chorôb zvierat u domácich a divých vtákov z 80 až 90% úmrtnosť. Ľudia sa nakazili z kurčiat; tak v roku 1997 bolo od sliepok infikovaných 18 ľudí, tretina z nich zomrela. Zvlášť veľké ohnisko bolo pozorované v januári až marci 2004. To pokrývalo takmer všetky krajiny v juhovýchodnej Ázii a jeden z amerických štátov a spôsobila obrovské hospodárske škody. 22 kurčiat bolo infikovaných a zabitých. Prísna karanténa, odstránenie všetkých vtákov obyvateľstva vo všetkých strediskách, hospitalizácia a izolácie pacientov a všetci ľudia s horúčkou, rovnako ako ľudia, ktorí boli v kontakte s pacientmi, zákaz dovozu hydinového mäsa z nich: pre elimináciu vypuknutia ich zohľadnenia najťažšie a rozhodujúce opatrenia nad krajinami prísny lekársky a veterinárny dohľad nad všetkými cestujúcimi a vozidlami prichádzajúcimi z týchto krajín. Široký chrípky medzi ľuďmi nedošlo, pretože nedošlo k re-združenia genómu sa vírusu vtáčej chrípky s ľudskou chrípkového vírusu genómu. Nebezpečenstvo takejto reasociácie zostáva skutočné. To môže viesť k vzniku nového nebezpečného pandemického vírusu ľudskej chrípky.

V mene zistených kmeňov chrípkových vírusov ukazujú sérotypu vírusu (A, B, C), majiteľ forme (ak nie je človek), miesto izolácia, číslo kmeňa, rok jeho vydania (posledné 2 číslice) a fenotyp (v zátvorkách). Napríklad: "A / Singapur / 1/57 (h3N2), A / Duck / USSR / 695/76 (H3N2)".

[17], [18], [19], [20], [21],

Laboratórna diagnostika chrípky A

Materiál použitý na štúdiu je oddeliteľný nazofarynx, ktorý sa získa buď vyplavovaním alebo použitím tampónov bavlny a krvi. Metódy diagnostiky sa vzťahujú na:

• Virologická - infekcia kuracích embryí, kultúry obličkových buniek zelenej opice (Vero) a psov (MDSK). Bunkové kultúry sú zvlášť účinné na izoláciu A (H3N2) a B vírusov.
• Sérologické - detekcia špecifických protilátok a zvýšenie ich titru (v pároch séra) pomocou RTGA, RSK, metódy imunoanalýzy.
• Ako zrýchlená diagnóza sa používa imunofluorescenčná metóda, ktorá umožňuje rýchle odhalenie vírusového antigénu v škvrna od nosovej sliznice alebo v umývaní z nosohltanu pacientov.
• Na zistenie a identifikáciu vírusu (vírusové antigény) navrhnuté metódy RNA sondy a PCR.

Liečba chrípky A

Liečbu chrípky A, ktorá by sa mala začať čo najskôr, rovnako ako prevenciu chrípky a iných vírusových ARI je založený na použití dibazola, interferónu a jeho induktory amiksina a arbidol na osobitných systémov, a pre liečbu a prevenciu chrípky u detí starších ako 1 rok - Alguire (Rimantadine ) podľa osobitných schém.

Špecifická prevencia chrípky A

Každý rok na svete stovky miliónov ľudí trpia chrípkou, ktorá spôsobuje obrovské škody na zdraví obyvateľstva a hospodárstva každej krajiny. Jediným spoľahlivým prostriedkom na boj proti nemu je vytvorenie kolektívnej imunity. Na tento účel sa navrhujú a používajú tieto typy očkovacích látok:

1. žije z oslabeného vírusu;
2. zabitý celí virión;
3. Vakcína Subvirion (z rozštiepených viriónov);
4. podjednotkovej vakcíny obsahujúcej iba hemaglutinín a neuraminidázu.

V našej krajine zaviedla a používa polymér-trivalentnou vakcínou podjednotky ( "Grippol"), v ktorom je konjugát sterilný povrchových proteínov A a B, vírusy, je spojené s kopolymérom polioksidoniem (imunostimulačné).

Deti od 6 mesiacov. Do 12 rokov podľa odporúčaní Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO) by mala byť očkovaná len podjednotková vakcína ako najmenej reaktogénna a toxická.

Hlavným problémom pri zvyšovaní účinnosti očkovacích látok proti chrípke je zabezpečiť ich špecifickosť voči skutočnému vírusu, teda verzii vírusu, ktorý spôsobil epidémiu. Inými slovami, vakcína musí obsahovať špecifické antigény skutočného vírusu. Hlavným spôsobom zlepšenia kvality vakcíny je použitie najzachovalejších a najbežnejších pre všetky antigénne varianty epitopov vírusu A, ktoré majú maximálnu imunogenicitu.