Mikrobiologické vyšetrenie spúta

Mikrobiologické vyšetrenie je najdôležitejším článkom v diagnostickom hľadaní a overovaní pôvodcu pneumónie. Zahŕňa nielen izoláciu pôvodcu, ale aj štúdium jeho vlastností vrátane citlivosti na rôzne lieky s baktericídnym a bakteriostatickým účinkom.

Na tento účel sa používa metóda výsevu spúta na rôzne živné médiá. Zo vzorky spúta dodanej do laboratória sa vyberú hnisavé hrudky a starostlivo sa premyjú v Petriho miske izotopovým roztokom chloridu sodného, čo do určitej miery umožňuje ich uvoľnenie z mikroflóry horných dýchacích ciest. Výsev hnisavých hrudiek spúta sa vykonáva na rôzne živné médiá, ktorých zloženie je opísané v špeciálnych mikrobiologických príručkách. Médiá s výsevom sa inkubujú pri teplote 37,5 °C počas 24 hodín. Z vypestovaných kolónií sa izolujú čisté kultúry, identifikujú sa známymi mikrobiologickými metódami a stanoví sa ich citlivosť na antibiotiká.

Na stanovenie kvantitatívneho obsahu mikroorganizmov sa spúto homogenizuje, zmieša s živným bujónom a zo zmesi sa pripravia postupné desaťnásobné riedenia, ktoré sa naočkujú na Petriho misky s krvným agarom. Po 24 hodinách inkubácie pri teplote 37,5 °C sa výsledky berú do úvahy, pričom sa počítajú kolónie rovnakého typu vzhľadom a berie sa do úvahy stupeň riedenia materiálu. Z kolónií sa pripravia nátery a vyšetria sa pod mikroskopom.

Interpretácia výsledkov

Interpretácia výsledkov mikrobiologického vyšetrenia spúta je pomerne zložitá, čo sa vysvetľuje viacerými faktormi. Vyššie už bolo spomenuté neustále osivo bronchiálneho obsahu mikroflórou horných dýchacích ciest a ústnej dutiny a častá prítomnosť väčšiny najtypickejších pôvodcov respiračných ochorení (pneumokoky, streptokoky, stafylokoky atď.) v normálnom tracheobronchiálnom obsahu zdravých ľudí. V tejto súvislosti izolácia asociácie rôznych mikroorganizmov v spúte počas mikrobiologických štúdií, z ktorých väčšina je v tomto konkrétnom prípade oportúnna, mimoriadne sťažuje stanovenie pôvodcu ochorenia. Preto je pri interpretácii výsledkov mikrobiologického vyšetrenia spúta potrebné zohľadniť kvantitatívnu prevahu určitého typu baktérií (viac ako 106 ^-107 mc ^/ ml), výskyt určitých mikroorganizmov vo fáze exacerbácie a ich vymiznutie počas obdobia remisie. Je veľmi dôležité zohľadniť klinický obraz ochorenia.

Hlavné a možné pôvodcovia rôznych klinických foriem pneumónie

Klinická forma pneumónie	Hlavné patogény	Možné patogény
Krupózny	Pneumokoky	Streptokoky, Klebsiella
Po chrípke	Stafylokoky, pneumokoky, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokoky
Abscesovanie	Stafylokoky, bakteroidy, zmiešaná flóra	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Ašpirácia	Bakteroidy, anaeróbne streptokoky	Stafylokoky, pneumokoky
Pooperačné	Stafylokoky	Pneumokoky, Klebsiella
Intersticiálna reklama	Mykoplazmy	Patogény ornitózy, psitakózy
Sekundárna pneumónia u hospitalizovaných pacientov bez predchádzajúcej antibakteriálnej liečby	Stafylokoky, pneumokoky, klebsiella, bakteroidy	Escherichia coli, serratia atď.
Sekundárna pneumónia sa vyvinula na pozadí antibakteriálnej liečby	Fakultatívne patogénne mikroorganizmy	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus atď.
U pacientov s chronickou bronchitídou	Pneumokoky, Haemophilus influenzae	Stafylokoky, streptokoky
U pacientov s alkoholizmom	Pneumokoky, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, prvoky
Pri syndróme získanej imunodeficiencie	Pneumocystis, huby	Cytomegalovírusy
U pacientov, ktorých starostlivosť poskytujú externí pracovníci	Pneumokoky, stafylokoky, hemofilná papila	Klebsiella, Escherichia coli

Pri kvantitatívnom hodnotení výsledkov štúdie mikrobiálnej kontaminácie u pacientov s pneumóniou je potrebné pamätať na extrémne vysokú citlivosť tohto indikátora na predpisovanie antibiotík. Aj krátkodobá liečba antibakteriálnymi liekmi môže viesť k prudkému poklesu mikrobiálnej kontaminácie, čo neumožňuje adekvátne posúdenie výsledkov štúdie spúta. Preto je vhodné spúto odobrať pred predpisovaním antibiotickej liečby.

Treba tiež poznamenať, že na kultiváciu intracelulárnych patogénov pneumónie (mykoplazma, legionella, chlamýdie, rickettsia) sa používajú špeciálne selektívne živné médiá. Rutinná mikrobiologická analýza s použitím konvenčných živných médií (agar-agar) nikdy nedáva pozitívne výsledky. Preto by sa výber špecifických metód mikrobiologického testovania mal vykonávať za účasti ošetrujúceho lekára, ktorý je povinný informovať laboratórneho lekára o svojich podozreniach týkajúcich sa možnej úlohy intracelulárnych patogénov pri výskyte pneumónie u tohto pacienta.

Treba dodať, že v reálnej klinickej praxi aj technicky dokonalé mikrobiologické vyšetrenie spúta umožňuje identifikovať patogén v maximálne 40 – 60 % prípadov. Preto je možné na overenie patogénu použiť aj iné moderné výskumné metódy. Informačný obsah bakteriologickej štúdie možno výrazne zvýšiť použitím tracheobronchiálneho aspirátu, tekutiny získanej počas bronchoalveolárnej laváže (BAL), bronchoskopie atď., namiesto spúta ako skúmaného biologického materiálu.

Okrem toho sa na identifikáciu patogénov pneumónie môže použiť metóda imunofluorescencie rôznych biologických materiálov (bronchoskopický materiál, krv, pleurálny obsah atď.), PCR diagnostické metódy a štúdium hladiny špecifických protilátok v krvnom sére. Tieto diagnostické metódy však bohužiaľ zatiaľ nenašli široké klinické uplatnenie a v súčasnosti sa používajú iba vo veľkých špecializovaných centrách a laboratóriách.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]