Krvný test na prítomnosť rakovinových buniek v tele: názov, ako ho vykonať

Dnes sa medicína čoraz častejšie stretáva s onkologickými ochoreniami. Napriek rozsiahlemu výskytu rakovinových nádorov zostáva mechanizmus ich vzniku a šírenia nepreskúmaný. Šírenie onkologických ochorení prebieha neuveriteľnou rýchlosťou. Najčastejšie tieto ochorenia postihujú ľudí v dôchodkovom veku. Ak sa však predtým toto ochorenie považovalo prevažne za ochorenie staršej generácie, dnes existuje tendencia, že sa ochorenie omladzuje. Mladí ľudia, dospievajúci a dokonca aj malé deti sú náchylní na toto ochorenie. Nebezpečenstvo spočíva v tom, že rakovinové nádory môžu postihnúť absolútne akýkoľvek orgán. Rastú a v určitom bode sa bunka oddelí, dostane sa do iného tkaniva a pripojí sa. V dôsledku toho vzniká nový nádor (metastázy). Vývoju nádorov a tvorbe metastáz sa dá zabrániť, ak sa nádor zistí včas a prijmú sa potrebné opatrenia. Analýza rakovinových buniek zohráva vedúcu úlohu vo včasnej diagnostike zhubných nádorov.

Testy umožňujú odhaliť nádor, diagnostikovať ho a čo je najdôležitejšie, včas reagovať. V skorých štádiách sa dá jeho rozvoju ešte zabrániť. Najčastejšie sa však nádory zisťujú v neskorších štádiách, keď je často nemožné pacientovi pomôcť. Problém s diagnostikou spočíva v tom, že v skorých štádiách sa nádor vyvíja takmer asymptomaticky a možno ho zistiť iba počas preventívneho vyšetrenia alebo počas laboratórnych testov.

Aké testy existujú na rakovinové bunky?

Pri vyšetrení rakoviny sa vykonáva všeobecné objektívne vyšetrenie pomocou rôznych inštrumentálnych metód a používajú sa aj laboratórne testy. Najprv sa pacientovi predpíšu štandardné klinické testy. Z nich možno získať všeobecnú predstavu o procesoch, ktoré sa v tele vyskytujú. Zhubné nádory môže nepriamo naznačovať zvýšený počet leukocytov, ako aj zvýšenie sedimentácie erytrocytov (ESR). Tieto informácie však nestačia, pretože pri akomkoľvek ochorení, infekčnom alebo zápalovom procese sa tieto ukazovatele tiež zvyšujú. Rakovinu môže naznačovať aj prudký pokles hemoglobínu, najmä ak porovnáte ukazovatele v dynamike. Ak sa takéto príznaky zistia, predpíše sa špeciálna štúdia zameraná na detekciu rakovinových buniek.

Vykonáva sa rozšírený krvný test, počas ktorého sa stanovujú špecifické onkologické markery. Tieto markery sa tvoria okamžite, dokonca aj v štádiu tvorby nádoru. Preto umožňujú identifikovať transformované bunky a rakovinové nádory v počiatočných štádiách ich vzniku.

Princíp diagnostickej metódy spočíva v tom, že špeciálne testovacie systémy detekujú v krvi nádorové markery, ktoré produkujú rakovinové nádory. Čím je štádium ochorenia závažnejšie, tým vyššia je ich koncentrácia v krvi. Telo zdravého človeka nádorové markery neprodukuje. Ich prítomnosť je teda priamym potvrdením rakovinového nádoru. Na základe výsledkov možno posúdiť veľkosť nádoru, jeho typ a lokalizáciu.

Indikácie postupu na analýzu rakovinových buniek

Testovanie rakovinových buniek sa vykonáva pri podozrení na rakovinu, ako aj na preventívne účely pre včasnú diagnostiku rakovinových nádorov. Ľudia nad 50 rokov, ako aj tí, ktorí patria do rizikovej skupiny pre vznik rakovinových nádorov, by mali test pravidelne absolvovať. Test sa vykonáva pri zistení nádoru, ktorého povaha nie je jasná. Umožňuje určiť, či je nádor benígny alebo malígny. Test sa vykonáva aj na sledovanie dynamiky výsledkov u pacientov s rakovinou, aby sa overila účinnosť liečby.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]

Príprava

Analýza nádorových markerov nevyžaduje žiadnu špeciálnu prípravu. Jediné, čo potrebujete, je získať odporúčanie od lekára. Potom 2-3 dni pred analýzou dodržiavajte ľahkú diétu (nepite alkohol, korenené, mastné, údené jedlá, koreniny). Analýza by sa mala vykonať nalačno. Posledné jedlo by malo byť 8 hodín pred testom. Ráno nemôžete piť alkohol ani fajčiť. Nepreťažujte telo niekoľko dní a vyhýbajte sa fyzickej námahe.

[ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Technika na analýzu rakovinových buniek

Existuje mnoho techník. Všetko závisí od typu výskumu. Ak sa vykonáva krvný test na stanovenie nádorových markerov, vykonáva sa pomocou enzýmovo-imunotestových metód. Táto metóda je založená na aglutinačnej reakcii, počas ktorej nádorový marker pôsobí ako cudzí agens pre telo (antigén). Imunitný systém naň okamžite reaguje a produkuje protilátku. Pôsobenie protilátok je zamerané na zničenie cudzieho organizmu a jeho následné odstránenie. Protilátka nájde antigén, ktorý je markerom rakovinového nádoru, napadne ho a stimuluje deštrukciu. Počas tohto boja sa antigén a protilátka zlúčia, dochádza k aglutinačnej reakcii. Tieto komplexy sa detegujú počas analýzy, keď sa protilátky zavádzajú do krvi.

Na tento účel sa pacientovi odoberie krv v požadovanom množstve. Aby sa zabránilo zrážaniu, pridá sa niekoľko kvapiek heparínu. Potom sa krv doručí do laboratória. Tam sa krv rozdelí na frakcie. Krvné sérum sa izoluje samostatne, pretože v sére sa nachádzajú nádorové markery. Na to sa používa centrifugácia. Pomocou špeciálneho zariadenia - centrifúgy - sa krv v skúmavke otáča vysokou rýchlosťou. V dôsledku toho sa všetky vytvorené prvky krvi usadia na dne a skúmavka obsahuje iba sérum. S ním sa vykonávajú ďalšie manipulácie.

Odoberie sa špeciálna analytická súprava (ELISA), na dno bunky sa pridá určité množstvo krvného séra. Pridá sa špeciálna protilátka proti rakovinovému nádoru. Čaká sa niekoľko hodín. Ak dôjde ku komplexačnej reakcii, počas ktorej sa protilátky a antigény zlúčia, potom sa v krvi nachádza antigén, ktorý pôsobí ako onkomarker indikujúci prítomnosť rakovinového nádoru. Tvorbu komplexov antigén-protilátka je možné pozorovať voľným okom, pretože v skúmavke sa objavuje zákal a sediment vo forme vločiek. Stupeň zákalu sa môže použiť na posúdenie počtu onkomarkerov. Pre presnosť výsledkov sa však vykonávajú špeciálne merania. Používa sa medzinárodný štandard zákalu alebo spektrofotometer, ktorý na základe uhla lomu svetla prechádzajúceho roztokom určuje jeho koncentráciu a poskytuje hotový výsledok.

Existuje aj iná metóda – imunomagnetická diferenciácia krvných frakcií. Na to sa používa špeciálne zariadenie, ktoré umožňuje detekciu rakovinových buniek určením nádorových markerov, ktoré sa prichytia na zmenenú bunku a stanú sa viditeľnými v magnetickom poli. Presnosť tejto metódy je pomerne vysoká – aj z milióna zdravých buniek je možné detegovať jednu rakovinovú bunku.

Pomocou takýchto analýz je tiež možné určiť presný počet rakovinových buniek, rýchlosť ich šírenia a predpovedať dynamiku rastu. Výhodou týchto analýz je aj to, že umožňujú monitorovať priebeh liečby, určiť účinnosť terapie a tiež s vysokou presnosťou vyberať lieky a ich optimálne dávkovanie. Presnosť dávkovania počas liečby zohráva vedúcu úlohu, pretože umožňuje účinne bojovať proti komplikáciám, znižovať počet rakovinových buniek a predchádzať vzniku metastáz. Okrem toho takéto správne dávkovanie znižuje toxický účinok liekov na organizmus.

Existuje aj metóda štúdia biopsie, pri ktorej sa odoberie kúsok tkaniva na vyšetrenie. Následne sa vykoná cytologické a histologické vyšetrenie. Cytologická analýza zahŕňa prípravu mikropreparátu zo získanej vzorky tkaniva na ďalšie štúdium jeho vlastností pod mikroskopom. Študujú sa hlavné morfologické a anatomické vlastnosti. Mikropreparát zo vzorky zdravého tkaniva sa výrazne líši od mikropreparátu z rakovinového nádoru. Existujú určité rozdiely v štruktúre, vzhľade a prebiehajúcich intracelulárnych procesoch. Špeciálne inklúzie môžu tiež naznačovať rakovinový nádor.

Počas histologického vyšetrenia sa tkanivo zasieva na špeciálne živné médiá určené na pestovanie tkanivových kultúr. Zasiatie sa kultivuje za špeciálnych podmienok počas 7 dní, po ktorých sa sleduje charakter rastu nádoru, rýchlosť a smer. To má dôležitý diagnostický význam.

Krvný test na rakovinové nádory

Najrýchlejším spôsobom, ako určiť onkologické ochorenie, je vykonať krvný test. Takáto štúdia sa vykoná do 1-2 dní a v prípade potreby je možné získať urgentné výsledky do 3-4 hodín. Ide o expresnú metódu, ktorá si stále vyžaduje ďalšie objasňujúce vyšetrenia. To však úplne postačuje na získanie predbežnej diagnózy a presnú identifikáciu nádoru. Analýza umožňuje určiť aj presnú lokalizáciu nádoru a štádium onkologického procesu.

Ako testovací materiál slúži krv pacienta. Analýza sa vykonáva ráno nalačno. Používa sa hlavne na potvrdenie alebo vyvrátenie diagnózy a umožňuje rozlíšiť benígny nádor od malígneho. Používa sa tiež na dynamické sledovanie ukazovateľov s cieľom určiť účinnosť liečby, monitorovať stav nádoru a predchádzať relapsom.

Princípom metódy je stanovenie hlavných antigénov, ktoré produkujú rakovinové bunky počas vývoja nádoru. Ak sa zistia, je možné s istotou povedať, že osoba má rakovinu. Ak sa však takéto nádorové markery nezistia, negatívny výsledok sa neuvádza. V tomto prípade sa predpisujú ďalšie štúdie.

Lokalizáciu nádoru možno určiť typom nádorového markera. Ak sa v krvi pacienta zistí antigén CA19-9, môže to naznačovať rakovinu pankreasu. Marker CEA indikuje lokalizáciu nádoru v črevách, pečeni, obličkách, pľúcach a iných vnútorných orgánoch. Ak sa zistí CA-125, indikuje to onkologický proces vo vaječníkoch alebo prídavných látkach. Markery PSA a CA-15-3 indikujú rakovinu prostaty a rakovinu prsníka. CA72-3 indikuje rakovinu žalúdka a rakovinu pľúc, B-2-MG indikuje leukémiu, leukémiu, myelóm. ACE sa objavuje pri rakovine pečene a metastázach. Krvný test nie je jediným faktorom potvrdzujúcim metódu. Mal by sa používať v kombinácii s mnohými ďalšími faktormi.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ]

Test buniek rakoviny krčka maternice

Bunky rakoviny krčka maternice možno identifikovať pomocou krvného testu, ktorého cieľom je identifikovať onkomarker. V takýchto prípadoch sa spravidla zistí CEA alebo karcinoembryonálny antigén. Na testovanie sa tiež odoberie ster z vagíny a krčka maternice. Najprv sa vykoná predbežné cytologické vyšetrenie. Počas cytologickej analýzy je možné zistiť transformované bunky a špecifické inklúzie, ktoré naznačujú onkologické procesy.

Potom sa v prípade potreby vykoná biopsia, počas ktorej sa odoberie kúsok tkaniva na vyšetrenie. Zasieva sa na živné médiá, inkubuje sa a potom sa študujú hlavné morfologické a biochemické vlastnosti. Na základe získaných údajov sa urobí záver o povahe nádoru, stupni jeho vývoja a koncentrácii rakovinových buniek.

[ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Test na karcinoembryonálny antigén

Je to antigén používaný na diagnostiku a liečbu rakoviny žalúdka, čriev, konečníka, ženských reprodukčných orgánov a mliečnych žliaz. U dospelých ho v malom množstve produkujú priedušky a pľúca a nachádza sa v mnohých biologických tekutinách a sekrétoch. Jeho množstvo, ktoré v onkológii prudko stúpa, je indikátorom. Treba vziať do úvahy, že jeho množstvo môže byť zvýšené aj u ľudí trpiacich autoimunitnými ochoreniami, tuberkulózou, benígnymi nádormi a dokonca aj u fajčiarov. Preto je detekcia vysokej koncentrácie týchto markerov (20 ng/ml a viac) len nepriamym potvrdením rakoviny a je potrebné vykonať množstvo ďalších štúdií. Tento ukazovateľ by sa mal tiež dynamicky monitorovať, aby bolo možné vyvodiť úplné závery. Výskumným materiálom slúži venózna krv. Antigén sa deteguje v krvnom sére.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ]

Analýza mutácií rakovinových buniek

Receptor epidermálneho rastového faktora je transmembránový receptor, ktorý interaguje s extracelulárnymi ligandmi epidermálnych rastových faktorov. Podieľa sa na tvorbe rakovinových nádorov mnohých orgánov, najmä je spoľahlivým znakom rakoviny pľúc. Faktom je, že hlavné gény sú za normálnych okolností zamerané na zabezpečenie kontroly nad rastom a reprodukciou telesných buniek. Bunky rastú, reprodukujú sa do určitého limitu, po ktorom gén vydá signál na zastavenie ďalšej reprodukcie a bunky sa prestanú deliť.

Gén tiež riadi proces apoptózy – včasnej smrti starých, zastaraných buniek. Keď dôjde k mutáciám v génoch, prestanú kontrolovať reprodukciu (proliferáciu) a smrť (apoptózu) a vydajú signál pre nepretržitý rast, v dôsledku čoho bunky rastú bez obmedzenia a neustále sa nekontrolovateľne delia. To vedie k vzniku rakovinového nádoru, ktorý sa vyznačuje schopnosťou rásť bez obmedzenia. V najprimitívnejšej forme si rakovinu možno predstaviť ako nekontrolované delenie a nesmrteľnosť bunky. Tento proces sa tiež považuje za neschopnosť bunky včas zomrieť.

Chemoterapia a rôzne protinádorové lieky sú zamerané konkrétne na deštrukciu a inaktiváciu tohto génu. Ak sa podarí potlačiť jeho aktivitu, potom sa dá zastaviť rozvoj rakoviny. Ale počas mnohých rokov liečby takýmito cielenými liekmi sa gén, rovnako ako každý organizmus, prispôsobil a stal sa rezistentným voči množstvu liekov.

Potom sa lieky zlepšili, zmenilo sa ich zloženie, opäť sa stali aktívnymi vo vzťahu k tomuto génu. Zlepšil sa však aj samotný gén: opakovane mutoval a zakaždým si vyvinul rezistenciu na lieky. V priebehu rokov sa nahromadilo mnoho typov mutácií tohto génu, viac ako 25. To so sebou prináša neúčinnosť špecifickej terapie. Aby sa nestrácal čas zbytočnou liečbou, ktorá nebude účinná, vykonáva sa analýza na určenie mutácie tohto génu.

Napríklad detekcia mutácií v géne KRAS naznačuje, že liečba rakoviny pľúc a hrubého čreva inhibítormi tyrozínkinázy bude neúčinná. Ak sa zistia mutácie v génoch ALK a ROS1, naznačuje to, že by sa mal predpísať crizotinib, ktorý rýchlo a účinne inhibuje tento gén a zabraňuje ďalšiemu rozvoju nádoru. Gén BRAF vedie k tvorbe melanómových nádorov.

Dnes existujú lieky, ktoré dokážu blokovať aktivitu tohto génu a zmeniť jeho nastavenie na neobmedzený rast. To vedie k tomu, že nádor spomalí svoj rast alebo ho úplne zastaví. V kombinácii s protinádorovými liekmi možno dosiahnuť významné výsledky v liečbe, až po zmenšenie veľkosti nádoru.

[ 37 ], [ 38 ], [ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ]

Analýza stolice na rakovinové bunky

Podstatou analýzy je zvyčajne zistenie skrytej krvi v stolici. Tento príznak môže naznačovať prítomnosť onkologického procesu v hrubom čreve alebo konečníku. Ľudia nad 45 – 50 rokov, ktorí sú najviac ohrození vznikom rakovinových nádorov, by mali absolvovať tento test každoročne. Môže to naznačovať iné patológie, ale potom sú potrebné ďalšie vyšetrenia pre diferenciálnu diagnostiku. Ide o včasnú diagnostickú metódu, ktorá umožňuje odhaliť nádor v štádiu jeho vzniku a prijať opatrenia na liečbu. Často táto metóda dokáže odhaliť aj prekancerózny stav.

Biopsia rakovinových buniek

Ide o štúdiu, ktorá poskytuje najpresnejšie a najspoľahlivejšie výsledky. Pozostáva z dvoch fáz. V prvej fáze sa odoberá biologický materiál na ďalšie vyšetrenie. Materiál je kúsok tkaniva odobratý priamo z orgánu, v ktorom sa nádor nachádza. V skutočnosti lekár pomocou špeciálneho vybavenia a nástrojov odreže kúsok nádoru a odošle ho do laboratória na ďalšie vyšetrenie. Odber sa zvyčajne vykonáva v lokálnej anestézii.

V druhej fáze sa biologický materiál podrobuje ďalšiemu cytologickému a histologickému vyšetreniu. Počas cytologického vyšetrenia sa pripraví mikropreparát a vyšetrí sa pod mikroskopom. Na základe celkového obrazu, vzhľadu a povahy inklúzií je možné urobiť predbežný záver o tom, či je nádor benígny alebo malígny. Táto fáza nepresahuje 30 minút.

Potom sa tkanivo namočí a zasieva do špeciálneho živného média, ktoré obsahuje všetky podmienky pre rast buniek. Kultúra sa umiestni do optimálnych podmienok, do inkubátora, a uchováva sa mesiac. Štúdia je pomerne dlhá a je určená rýchlosťou rastu buniek. Ak ide o rakovinový nádor, začne aktívne rásť. Benígny, nerakovinový nádor nerastie. Na urýchlenie rastu je možné pridať rastové faktory, ktoré ďalej stimulujú rast nádoru. V tomto prípade je možné výsledky získať do 7-10 dní.

Narastený nádor sa podrobí ďalším biochemickým, mikroskopickým štúdiám a nakoniec sa výsledok uvedie vo forme konečnej diagnózy, ktorá určuje typ nádoru, jeho štádium, prevalenciu a smer rastu nádoru. Toto je zvyčajne konečná verzia, ktorá určuje výsledok so 100% presnosťou.

[ 43 ], [ 44 ], [ 45 ], [ 46 ]

Normálny výkon

Ak sa vykoná analýza na stanovenie nádorových markerov, je pomerne jednoduché ju rozlúštiť. V prítomnosti onkologického ochorenia sa v tele nachádzajú nádorové markery. V zdravom tele sa nádorové markery nenájdu, pretože ich produkujú iba rakovinové bunky. Výnimkou je rakovinový embryonálny antigén, ktorý je v tele bežne prítomný v minimálnom množstve. Mierne zvýšenie koncentrácie môže naznačovať rôzne somatické patológie a iba prudké zvýšenie nad 20 ng/ml naznačuje prítomnosť rakovinového nádoru. Okrem toho, podľa toho, ktorý antigén sa deteguje, možno posúdiť lokalizáciu nádoru. Každý orgán produkuje svoj vlastný typ markerov.

Dešifrovanie výsledkov biopsie je ešte jednoduchšie. Ak sa na živnom médiu pozoruje rast buniek, nádor je malígny, ak nie je rast, je benígny.

Norma testu rakovinových buniek

Neexistujú jednoznačné indikátory pre všetky typy rakoviny. Každý špecifický nádorový marker má svoje vlastné normálne hodnoty. Okrem toho sa výrazne líšia v závislosti od veku a fyziologických charakteristík osoby.

Vo všeobecnosti možno prezentovať nasledujúce ukazovatele:

• 0 – 1 ng/ml – normálna hodnota;
• 1-20 – benígny nádor, prekancerózne stavy, somatické patológie;
• 20-30 – rakovinový nádor;
• Nad 30 – metastázy.

Je dôležité mať na pamäti, že akýkoľvek nádor, aj benígny, sa môže vyvinúť na malígny. Absencia nádorových markerov nie vždy znamená absenciu rakoviny. To je dôvod na ďalší výskum.

[ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Zariadenie na analýzu

Na vykonanie analýzy je potrebné komplexné technologické laboratórne vybavenie. Na detekciu nádorových markerov sú potrebné špeciálne súpravy na enzýmovú imunoanalýzu, laboratórne sklo, dávkovače, mikropipety, centrifúga, inkubátor, kultivátor, spektrofotometer alebo hmotnostný spektrometer na meranie optickej hustoty a imunomagnetický separátor.

Na cytologické, mikroskopické a histologické vyšetrenie je potrebný mikroskop s vysokým rozlíšením. Na histológiu je potrebný parný kúpeľ, autokláv, suchoteplotná komora, termostat, inkubátor, exsikátor a digestor.

Ako dlho trvá testovanie na rakovinové bunky?

Detekcia nádorových markerov je expresná metóda, ktorá umožňuje získať predbežné výsledky a potvrdiť alebo vyvrátiť diagnózu. Robí sa pomerne rýchlo - 1-2 dni, v prípade potreby sa dá zrýchliť na 3-4 hodiny.

Najspoľahlivejšou a najpresnejšou analýzou rakovinových buniek je biopsia, ktorá umožňuje definitívnu diagnózu. Takáto analýza sa vykonáva od 14 do 28 dní (v závislosti od rýchlosti rastu bunkovej kultúry). V prípade potreby sa môže urýchliť na 7 – 10 dní vytvorením špeciálnych inkubačných podmienok pridaním rastových faktorov.