Analýza citlivosti na antibiotiká: príprava, dekódovanie, koľko sa robí

Dnes je analýza citlivosti na antibiotiká čoraz populárnejšia. Mikroflóra človeka je pomerne rôznorodá, reprezentovaná veľkým počtom mikroorganizmov v rôznych biotopoch.

Farmaceutické spoločnosti vyvinuli veľké množstvo antibakteriálnych látok, antibiotiká, ktoré umožňujú udržanie normálneho pomeru a počtu mikrobiálnych populácií. Od začiatku éry antibiotík sa mnohé lieky, ktoré boli predtým považované za smrteľné, liečili. Ale aj mikroorganizmy majú tendenciu prežiť, postupne prispôsobovať pôsobeniu antibakteriálnych liečiv. V priebehu času sa mnohí z nich stali odolnými voči mnohým liekom, upevnili ich v genotype a začali prechádzať z generácie na generáciu. Takže nové mikroorganizmy už nie sú na začiatku citlivé na určité lieky a ich účel môže byť neúčinný. Lekárnici vyvíjajú čoraz viac nových produktov, pridávajú im nové účinné zložky a menia základný vzorec. Ale postupne tiež rozvíjajú odpor.

Dôvodom zvýšenej rezistencie mikroflóry na mnohé lieky a dokonca aj na ich analógy sa často skrýva nesprávny a nekontrolovaný príjem antibiotík. Lekári predpisujú antibiotiká a ich kombinácie pre rôzne bakteriálne ochorenia. Súčasne neexistuje žiadne predbežné posúdenie, ako efektívne budú, optimálna dávka sa nevyberá, čo je veľmi dôležité tak pre liečbu, ako aj pre prevenciu mechanizmov na rozvoj ďalšieho odporu. Mnohí mylne predpisujú antibakteriálnu liečbu aj pri vírusových ochoreniach, čo je neúčinné, pretože antibiotikum neovplyvňuje vírusy.

Terapia sa často predpisuje bez predbežného testovania citlivosti, nevykonáva sa výber účinnej látky a požadovaná dávka pre každú konkrétnu chorobu a biotop. Keďže antibiotiká sú predpísané "v slepých", často sa vyskytujú prípady, keď nevykazujú žiadnu aktivitu voči tým mikroorganizmom, ktoré spôsobili chorobu, a ktorých počet sa má znížiť. Namiesto toho ovplyvňujú iných zástupcov mikroflóry, čo vedie k dysbióze, ktorá je tiež pomerne nebezpečnou patológiou a môže viesť k vážnym následkom. Zvlášť nebezpečné sú prípady, keď antibiotikum zničí normálnu mikroflóru, ktorá je určená na ochranu tela a udržanie jeho normálneho fungovania. Existujú aj prípady, keď je predpísané príliš veľa alebo príliš málo dávkovania.

Pacienti sú tiež nezodpovední za liečbu. Často sa liečba preruší, keď príznaky prestávajú byť znepokojujúce. Zároveň mnohí ľudia radšej dokončia celý kurz až do konca. To je jeden z faktorov, ktoré prispievajú k rozvoju rezistencie baktérií. Celý kurz je určený na kompletnú patogénnu mikroflóru. Ak kurz nie je dokončený, nie je úplne zabitý. Tieto mikroorganizmy, ktoré prežívajú, podstupujú mutácie, rozvíjajú mechanizmy, ktoré im poskytujú ochranu pred týmto liekom a odovzdávajú ich ďalším generáciám. Nebezpečenstvo je, že rezistencia sa vyvíja nielen vo vzťahu k tejto konkrétnej droge, ale aj k celej skupine liekov.

Preto je dnes jedným z najúčinnejších prostriedkov racionálnej liečby a prevencie rezistencie predbežné stanovenie citlivosti na podávané činidlo a výber jeho optimálnej dávky.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]

Indikácie postupu testovanie citlivosti na antibiotiká

Zvyčajne by sa mala taká analýza vykonať vo všetkých prípadoch, keď sa vyžaduje antibakteriálna liečba. Na základných zákonov antibiotickej liečby základe, a to buď antibiotikum možno priradiť len po predbežnom vyhodnotení citlivosti mikroorganizmov na to znamená, v optimálnej koncentrácii vitro definovaná aktívne zložky. V praxi sa z rôznych dôvodov a okolností takáto štúdia pred začatím liečby nevykonáva a lekár je nútený "náhodne" vybrať liek.

Vážne pochybnosti o tom, či je určený prostriedok je účinný v prípade dlhodobej neprítomnosti účinku lieku, rovnako ako opakované použitie rovnakých prostriedkov na obmedzenú dobu dnešnom testovaní citlivosti sa vykonáva len v prípadoch, keď lekár tam. Citlivosť sa často určuje pri liečbe pohlavne prenosných chorôb. Mnoho špecialistov sa obráti na analýzu v prípade vedľajších účinkov, alergických reakcií a keď je potrebné nahradiť jeden liek druhým.

Tiež sa často uvádzajú pri výbere liekov na antibiotickú liečbu počas obdobia zotavenia po chirurgickom zákroku, pri laparoskopických intervenciách a pri odstraňovaní orgánov. V otdleniyah chirurgii, hnisavá chirurgia takýto výskum je nutný, pretože sa rýchlo vyvíja ustoychivost.krome rozvoja superstable "nozokomiálnych" Mnoho súkromných kliník sú vhodné pre lieky na predpis s plnou zodpovednosťou - až po testovanie citlivosti. V mnohých prípadoch rozpočet verejných inštitúcií jednoducho neumožňuje vykonať takéto štúdie pre každého pacienta, ktorý potrebuje antibiotickú liečbu.

[9], [10], [11]

Príprava

Príprava na štúdium nevyžaduje žiadne osobitné opatrenia. Je to rovnaké ako pri akejkoľvek analýze. Niekoľko dní pred štúdiom sa musíte zdržať konzumácie alkoholu. Ráno, v deň odberu vzoriek, vo väčšine prípadov nemôžete jesť a piť. Ale to všetko závisí od typu analýzy. Materiál pre štúdiu môže byť odlišný v závislosti od ochorenia.

Pri ochoreniach hrdla, dýchacích ciest, odoberte tampón z krku, nosa. Vo venerológii, gynekológii, urológii sa odoberajú tampóny z genitálií, krvi. Pri ochorení obličiek sa často vyžaduje moč. S chorobami tráviaceho traktu, niektorými infekčnými ochoreniami, skúmajte exkrementy, zvracať. Niekedy sa môže vyšetrovať materské mlieko, nazálny výtok, sekrécia očí, sliny, spúta. Pri ťažkých ochoreniach a podozrení na infekčný proces sa vyšetruje dokonca aj miechová tekutina. Spektrum je dosť široké.

Charakter príjmu materiálu určuje jeho biologická príslušnosť. Moč, výkaly sa zhromažďujú ráno v čistom obale alebo v špeciálnom kontajneri na biologické materiály. Zbierka materského mlieka sa vykonáva pred kŕmením. Štúdia má priemernú časť. Roztok sa odoberie špeciálnym tampónom, ktorý sa nanesie na sliznicu a potom sa spustí do skúmavky s pripraveným médiom. Krv sa zhromažďuje v skúmavke, prstom alebo žilou. Pri užívaní tampónov z močovej trubice alebo vagíny sa odporúča niekoľko dní vyhnúť sa sexuálnemu styku.

Pri zhromažďovaní biologického materiálu na výskum je najprv potrebné zabezpečiť správnosť oplotenia a sterility. Ale vo väčšine prípadov to je starostlivosť zdravotníckeho personálu, pacient by sa o to nemal obávať. Najčastejšie sa gynekológovia a urológovia stretávajú s podobnými štúdiami, na druhom mieste otolaryngológovia pri liečbe chorôb nosohltanu a hltanu, horných dýchacích ciest.

[12], [13], [14]

Technika testovanie citlivosti na antibiotiká

Zhromaždený biologický materiál sa za sterilných podmienok dodá do laboratória, kde sa vykonáva ďalšie vyšetrovanie. Primárne osivo sa primárne vykonáva na univerzálnych živných médiách. Tiež je súčasťou materiálu pre mikroskopické vyšetrenie. Pripravuje sa mikroskopický náter, uskutočňuje sa štúdia, pomocou ktorej sa dá určiť približný obraz, čo naznačuje, ktoré mikroorganizmy sú prítomné vo vzorke. To umožňuje prispôsobenie najoptimálnejšieho prostredia pre ďalší výskum a identifikáciu mikroorganizmov. Aj na mikroskopii môžu byť príznaky, ktoré naznačujú zápal, onkologický proces.

Niekoľko dní v Petriho miske kolónie mikroorganizmov rastú. Potom sa odoberie niekoľko kolónií, prechádzajú sa do selektívneho živného média, ktoré umožňujú určiť približnú skupinu mikroorganizmov. Inkubujte niekoľko dní v termostatu a potom pokračujte v identifikácii (určenie typu mikroorganizmov). Identifikácia sa vykonáva pomocou špeciálnych biochemických a genetických testov, determinantov. Okrem toho sa môže vykonať imunologické sledovanie.

Po izolácii hlavného patogénu vykonajte hodnotenie jeho citlivosti na antibiotiká. Existuje niekoľko spôsobov. Najčastejšie používaná metóda sériového riedenia alebo metóda disk-difúzie. Techniky sú podrobne popísané v mikrobiologických referenčných knihách, metodických pokynoch a laboratórnych štandardoch.

Podstatou spôsobu disku difúznej spočíva v tom, že očkovanie sa vykonáva mikroorganizmy, ktoré boli zistené v médiu kultúry, prekrýva horný špeciálnych diskov impregnovaných antibiotikami. Počas niekoľkých dní sa plodina inkubuje v termostatu a potom sa merajú výsledky. Odhadnite mieru retardácie rastu baktérií každým antibiotikom. Ak je baktéria citlivá na antibiotikum, vytvorí sa "lýzová zóna" okolo disku, v ktorej sa baktérie nerozmnožujú. Ich rast je pomalý alebo úplne chýba. Priemer zóny spomalenia rastu je určený stupňom citlivosti mikroorganizmu na antibiotikum a formuluje ďalšie odporúčania.

Metóda sériového riedenia je najpresnejšia. K tomu sa mikroorganizmy vysijú na kvapalné živné médium, pridá sa antibiotikum zriedené v systéme desatinných riedení. Potom sa skúmavky umiestnia niekoľko dní do termostatu na inkubáciu. Citlivosť na antibiotiká závisí od stupňa rastu baktérií v živnom vývare s pridaním antibiotika. Zaznamenajte minimálnu koncentráciu, pri ktorej stále dochádza k rastu mikroorganizmov. Toto je minimálna dávka lieku (je potrebné prepočítanie z mikrobiologických jednotiek na účinnú látku).

Ide o štandardné mikrobiologické metódy, ktoré sú základom akéhokoľvek výskumu. Zahŕňajú ručné vykonanie všetkých manipulácií. Dnes je mnoho laboratórií vybavených špeciálnym vybavením, ktoré vykonáva všetky tieto postupy v automatickom režime. Špecialista pracujúci s takýmto zariadením potrebuje iba schopnosť pracovať so zariadením, dodržiavaním bezpečnostných pravidiel a sterilitou.

Je potrebné vziať do úvahy, že indexy citlivosti v laboratóriu a v podmienkach živého organizmu sú výrazne odlišné. Preto je vyššia dávka predpísaná osobe, ako sa stanovilo počas štúdie. Je to spôsobené tým, že telo nemá také optimálne podmienky na rast baktérií. V laboratóriu sa vytvárajú "ideálne podmienky". Časť lieku môže byť neutralizovaná pôsobením sliny, žalúdočnej šťavy. Časť je neutralizovaná v krvi protilátkami a antitoxínmi, ktoré produkuje imunitný systém.

Analýza moču pre citlivosť na antibiotiká

Najprv sa zhromažďuje biologický materiál. Aby ste to dosiahli, musíte zozbierať priemernú časť ranného moču a doručiť ho laboratóriu. Je dôležité pozorovať sterilitu a neberiete antibiotiká niekoľko dní pred analýzou, inak môžete získať falošný negatívny výsledok. Potom sa vyrába štandardná plodina, ktorej podstata spočíva v izolácii čistej kultúry patogénu a vo výbere antibiotika, ktoré na ňu bude mať najlepšie baktericídny účinok. Stanoví sa potrebná koncentrácia antibiotika.

Analýza moču je najčastejšie predpísaná pre podozrenie na infekčný a zápalový proces v močovej sústave, s imunodeficienciami a metabolickými poruchami. Moč je zvyčajne sterilná kvapalina. Trvanie takejto štúdie je 1 až 10 dní a je určené rýchlosťou rastu mikroorganizmu.

Analýza kultúry a citlivosti na antibiotiká

Štúdia zahŕňa izoláciu mikroorganizmu, ktorý je pôvodcom v čistej kultúre. Niekedy takéto mikroorganizmy môžu byť viaceré (zmiešané infekcie). Niektoré mikroorganizmy sú schopné tvoriť biofilmy, ktoré sú zvláštnymi "mikrobiálnymi komunitami". Prežitie biofilmov je oveľa vyššie ako jednotlivé mikroorganizmy alebo asociácie. Navyše nie všetky antibiotiká sú schopné ovplyvniť biofilm a preniknúť do neho.

 Na stanovenie patogénu, jeho izolácie do čistej kultúry, sa uskutočňuje očkovanie. Počas výskumu sa pestuje niekoľko plodín v rôznych živných médiách. Potom sa pridelí čistá kultúra, stanoví sa biologický význam a určí sa náchylnosť na antibakteriálne liečivá. Optimálna koncentrácia sa vyberie.

Pre túto štúdiu možno použiť akýkoľvek biologický materiál, v závislosti od choroby, lokalizáciu infekčného procesu. Trvanie je určené rýchlosťou rastu mikroorganizmov.

[15], [16], [17], [18], [19], [20]

Fekálna analýza citlivosti

Výkaly sa vyšetrujú na rôzne ochorenia žalúdka a čriev, s podozrením na infekčný proces, bakteriálnu intoxikáciu, otravu potravou. Cieľom štúdie je izolovať patogén a vybrať optimálne antibakteriálne lieky, ktoré budú veľmi aktívne. Dôležitosť tohto typu štúdie spočíva v tom, že je možné vybrať liek, ktorý bude mať vplyv iba na pôvodcu ochorenia a nebude mať vplyv na zástupcov normálnej mikroflóry.

Prvou a veľmi významnou etapou je zbierka stolice. Musí sa zhromaždiť v špeciálnej sterilnej nádobe v ranných hodinách. Udržujte maximálne 1 - 2 hodiny. Ženy s menštruačným tokom by mali odložiť analýzu až do konca, pretože presnosť výsledkov sa zmení. Materiál sa dodáva do laboratória na vyšetrenie. Analýza sa uskutočňuje použitím štandardnej mikrobiologickej techniky inokulácie a izolácie čistej kultúry. Navyše sa vykonáva antibiotikum. Podľa záveru sa vypracujú odporúčania, určuje sa ďalšia výskumná schéma.

[21], [22], [23], [24]

Analýza dysbiózy s citlivosťou

Materiálom pre štúdiu sú výkaly okamžite po úprave. Normálna gastrointestinálna mikroflóra sa skladá zo zástupcov normálnej flóry a niekoľkých zástupcov patogénnej flóry. Ich druhové zloženie, počet a pomer sú prísne označené a udržiavané v rámci prípustnej normy. Ak dôjde k porušeniu takéhoto pomeru, dôjde k rozvoju dysbakteriózy. Môže sa prejaviť rôznymi spôsobmi. Infekčné ochorenia sa môžu vyvinúť, ak sa prudko zvýši množstvo patogénnej mikroflóry. Ak sa množstvo akéhokoľvek mikroorganizmu drasticky zníži, ostatní zástupcovia obsadia voľné miesto, ktoré nie je charakteristické pre gastrointestinálny trakt alebo patogénne. Často je prázdne miesto obsadené hubou, potom sa rozvinú rôzne plesňové lézie, kandidóza.

Na stanovenie kvantitatívneho a kvalitatívneho zloženia črevnej mikroflóry sa fekálie analyzujú na dysbakteriózu. Podmienečne sú všetci predstavitelia čreva rozdelení do troch skupín: patogénnych, oportunistických a nepatogénnych. Preto analýza pozostáva z troch častí. Každá skupina mikroorganizmov má svoje potreby v zdroji výživy, energie. Pre každú skupinu sú potrebné samostatné živné médiá a selektívne prísady.

Najprv sa vykoná mikroskopia a primárne očkovanie. Po výseve sú vybrané najväčšie kolónie, morfologicky podobné zástupcom každej skupiny. Vyrobené znovuzískaním na selektívnych médiách. Po rozšírení mikroorganizmov sa identifikujú a ihneď testujú na citlivosť na antibiotiká. Používajú sa štandardné mikrobiologické metódy.

Štúdium skupiny patogénnych mikroorganizmov okrem štandardných štúdií zahŕňa identifikáciu baktérií týfus, paratyfidov a dyzentérií. Určuje sa tiež, či je človek nosičom týchto mikroorganizmov. Komplexná štúdia o dysbióze zahŕňa aj štúdiu predstaviteľov skupiny bifidobaktérií a laktobacilov. Štúdia trvá približne týždeň a závisí od rýchlosti rastu mikroorganizmov.

[25], [26], [27], [28], [29]

Analýza citlivosti na bakteriofágy

Keď intestinálna infekcia pri liečbe často používa bakteriofágy namiesto antibiotík. Bakteriofágy sú vírusy baktérií, ktoré sú pre nich citlivé. Nájdu baktériu, s ktorou sú komplementárne, prenikajú do nej a postupne ničí bakteriálnu bunku. V dôsledku toho sa infekčný proces zastaví. Ale nie všetky baktérie sú citlivé na bakteriofágy. Aby sa skontrolovalo, či tento bakteriofág vykazuje aktivitu voči zástupcom mikroflóry, musí sa vykonať analýza.

Materiál štúdie je kal. Analýza by mala byť doručená laboratóriu do jednej hodiny, inak to nebude možné. Analýzu je potrebné vykonať v niekoľkých opakovaniach. Pôvodná technika je podobná metóde pri určovaní citlivosti na antibiotiká. Po prvé sa vykoná predbežná mikroskopia vzorky a potom primárne očkovanie na univerzálnych živných médiách. Potom sa na selektívnych živných médiách pripraví selektívna kultúra.

Hlavná práca sa uskutočňuje s čistou kultúrou. Liečia sa rôznymi typmi bakteriofágov. Ak sa kolónia rozpustí (lýzovaná), znamená to vysokú aktivitu bakteriofága. Ak sa lýza vyskytne čiastočne - bakteriofág funguje mierne. Pri absencii lýzy je možné hovoriť o rezistencii voči bakteriofágu.

Výhodou fágovej terapie je to, že bakteriofágy neovplyvňujú ľudské telo, nespôsobujú vedľajšie účinky. Pripájajú sa k určitým typom baktérií a lyzujú ich. Nevýhodou je, že sú veľmi špecifické a majú selektívny účinok a nie vždy sa môžu pripojiť k baktériám. 

[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Analýza sputa pre citlivosť na antibiotiká

Analýza je štúdiou odnímateľného dolného dýchacieho traktu. Cieľom je určiť typ mikroorganizmov, ktoré pôsobia ako pôvodca ochorenia. Vykonáva sa aj antibiotikum. V tomto prípade sa určí citlivosť patogénu na antibiotiká a zvolí sa optimálna koncentrácia. Používa sa na choroby dýchacích ciest.

Vyšetrenie spúta a iného obsahu pľúc a priedušiek je nevyhnutné pri výbere schémy liečby na rozlíšenie rôznych diagnóz. Používa sa na potvrdenie alebo popretie prítomnosti tuberkulózy.

Najprv musíte získať biologický materiál. Môže sa dosiahnuť kašľom, vykašliavaním alebo vytiahnutím z priedušnice s bronchoskopiou. Existujú špeciálne aerosóly, ktoré prispievajú k vyčerpaniu. Pred užitím spúta sa má ústa opláchnuť vodou, čo zníži stupeň bakteriálnej kontaminácie dutiny ústnej dutiny. Najskôr sa odporúča zobrať 3 hlboké dychy, aby ste vyvolali produktívny kašeľ. Spúta možno tiež odobrať odsávaním z priedušnice. V tomto prípade sa do trachey vloží špeciálny katéter. Keď sa bronchoskopia zavedie do dutiny bronchoskopického bronchoskopu. V tomto prípade sa mukózna membrána lubrikuje anestetikom.

Potom sa materiál dodá do laboratória na štúdium. Výsev sa vykonáva podľa štandardnej schémy, mikroskopie. Potom je izolovaná čistá kultúra a s ňou sa vykonávajú ďalšie manipulácie. Je umiestnený antibiotikogram, ktorý umožňuje identifikovať spektrum bakteriálnej citlivosti a vybrať optimálnu dávku. 

Ak je podozrenie na tuberkulózu, vyšetruje sa ranný hlien počas troch dní. Pri testovaní na tuberkulózu bude výsledok pripravený za 3-4 týždne. Pretože mycobacterium tuberculosis, ktorý je pôvodcom ochorenia, rastú veľmi pomaly.

Zvyčajne by sa mali nájsť zástupcovia normálnej mikroflóry dýchacieho traktu. Je tiež potrebné vziať do úvahy, že so zníženou odolnosťou sa parametre bežnej mikroflóry môžu líšiť.

Analýza citlivosti spermií na antibiotiká

Ide o bakteriologickú štúdiu ejakulátu spermií s ďalším výberom citlivých antibiotík a ich koncentrácií. Najčastejšie sa vykonáva pri liečbe neplodnosti a iných ochorení mužského reprodukčného systému. V prípade, že choroba je sprevádzaná infekčným procesom. Hlavnou príčinou mužskej neplodnosti je vo väčšine prípadov infekcia. Zvyčajne sa vykoná spermogram pôvodne. Výsledkom je stanovenie schopnosti hnojenia spermií. Ak táto analýza ukazuje veľké množstvo bielych krviniek, môžeme hovoriť o zápalovom procese. Súčasne je mikrobiologická analýza zvyčajne okamžite predpísaná, pretože zápal je takmer vždy sprevádzaný infekciou. Na základe získaných výsledkov sa zvolí vhodná liečba. Štúdiu zvyčajne predpisuje androlog.

Dôvodom analýzy je prostatitída, pohlavné choroby. Priraďte a v prípade, že partner má pohlavne prenosnú chorobu.

Správna analýza je založená predovšetkým na správnom výbere biologického materiálu. Vezmite materiál do špeciálnych nádob s širokým hrdlom. Teplota skladovania by mala zodpovedať teplote ľudského tela. V takomto prípade sa materiál môže skladovať dlhšie ako hodinu. V zmrazenom stave možno uložiť nie viac ako jeden deň. Pri príjme antibiotík nie je výsev vhodný, čo mení klinický obraz. Zvyčajne sa plodina odstráni pred začiatkom liečby antibiotikami. Alebo prestať užívať lieky 2-3 dni pred testom.

Potom sa vysije na živné médium. Inkubujte termostatom 1-2 dni. Po izolácii čistej kultúry sa vykoná identifikácia, určuje sa citlivosť a typ a rýchlosť rastu každej kolónie. Citlivosť na antibiotiká sa určuje v prípade detekcie patogénnych mikroorganizmov. V priemere sa analýza vykoná 5-7 dní.

[39], [40], [41], [42], [43],

Analýza citlivosti na glutén

Existuje veľa testov, pomocou ktorých môžete určiť imunologickú citlivosť na rôzne látky alebo patogény. Predtým bola hlavnou metódou vykonanie testov založených na aglutinačnej reakcii protilátok a antigénov. Dnes sa tieto testy používajú čoraz menej, pretože ich citlivosť je oveľa nižšia ako veľa moderných techník, napríklad testy na lepenie. Najčastejšie sa v praxi používa test na sliny na lepenie a analýzu výkalov.

Na diagnostiku rôznych porúch čreva sa používa test citlivosti na lepok. Je založená na reakcii imunitného systému. Ak sa glutén pridáva do stolice, reakcia nastane alebo chýba. Toto sa považuje za falošne pozitívny alebo falošne negatívny výsledok. Pozitívna indikuje predispozíciu ku kolitíde a vysokú pravdepodobnosť jej vývoja. Tiež potvrdzuje celiakiu.

Gluten môže byť tiež analyzovaný s použitím sliny ako biologického materiálu. Môžete merať množstvo protilátok proti gliadínu. Pozitívny výsledok naznačuje citlivosť na glutén. To môže naznačovať vysokú pravdepodobnosť vzniku cukrovky. Ak je výsledok v obidvoch testoch pozitívny, môžete potvrdiť iubet alebo celiakiu. 

[44], [45]

Analýza citlivosti chlamýdií na antibiotiká

Analýza sa uskutočňuje pri liečbe infekčných a zápalových ochorení urogenitálneho traktu s podozrením na chlamýdie. Materiál pre štúdium je škrabanie z vaginálnej sliznice - u žien, škvrna z uretry - u mužov. Plot sa vyrába v miestnosti na ošetrenie pomocou jednorazového zariadenia. Je dôležité pozorovať sterilitu. Pred prijatím materiálu by ste mali upustiť od intimity do 1-2 dní pred začiatkom štúdie. Ak žena má menštruáciu, materiál sa užíva 3 dni po jej úplnom ukončení.

Materiál sa dodáva do laboratória. Kompletná analýza zahŕňa predbežnú mikroskopiu škvŕn. To umožňuje vizuálne určiť mikroflóru morfologickými vlastnosťami, správne vybrať živné médium. Obsah hlienu, hnisu, častíc epitelu môže priamo alebo nepriamo indikovať vývoj zápalového procesu alebo malígnej degenerácie buniek.

Potom sa vytvorí primárna plodina. Kultúra sa inkubuje niekoľko dní pod termostatom a identifikuje sa kultiváciou. Potom sa produkuje tak, že sa znovu usadzuje na selektívnych živných médiách určených na kultiváciu chlamýdií. Výsledné kolónie sa identifikujú pomocou biochemických testov. Po stanovení citlivosti na antibiotiká štandardnými metódami. Vyberte najcitlivejšie antibiotikum, jeho koncentráciu. Na pestovanie chlamýdií sú potrebné špeciálne médiá navrhnuté špeciálne pre tento typ mikroorganizmu, ktoré obsahujú všetky potrebné látky a rastové faktory.

Je tiež možné vykonať biologickú štúdiu. Za týmto účelom infikujte pôvodcu potkanov. V niektorých laboratóriách sa namiesto potkanov používa špeciálne pestovaná tkanivová kultúra. Je to spôsobené tým, že chlamýdiá sú intracelulárne parazity a pre ich pestovanie sú potrebné špeciálne podmienky. Mikroorganizmy sa potom určia metódou PCR. Na stanovenie citlivosti sa uskutoční transplantácia na selektívne kultivačné médium pre chlamýdiá, po niekoľkých dňoch sa zaznamenajú výsledky. Na odolnosť alebo citlivosť je posudzovaná podľa potlačenie infekcie v bunkách.  

[46], [47], [48], [49], [50], [51], [52], [53], [54]

Koľko test antibiotickej citlivosti je vykonané?

V priemere sa analýza vykoná do 5 až 7 dní. Niektoré testy sa vykonávajú dlhšie. Napríklad pri diagnostikovaní tuberkulózy je potrebné očakávať výsledky od 3 týždňov až po mesiac. Všetko závisí od rýchlosti rastu mikroorganizmov. Pracovníci laboratórií sa často musia zaoberať prípadmi, keď sú pacienti požiadaní o rýchlejšiu analýzu. A dokonca ponúkajú "príplatok" za naliehavosť. Tu však treba pochopiť, že v tomto prípade nič nie je závislé od činnosti laboratórneho asistenta. Záleží len na tom, ako rýchlo rastú mikroorganizmy. Každý druh má svoju vlastnú, prísne definovanú mieru rastu.

Normálny výkon

Neexistujú žiadne ukazovatele absolútneho univerzálneho štandardu pre všetky analýzy. Po prvé, pre každý biotop sa tieto ukazovatele môžu líšiť. Po druhé, sú pre každý mikroorganizmus individuálne. To znamená, že ukazovatele normy toho istého mikroorganizmu, povedzme, pre hrdlo a črevá sa líšia. Takže ak stafylokoka prevažuje v hrdle ako reprezentant normálnej mikroflóry, potom v čreve dominuje E. Coli, bifido- a laktobacily. Tiež ukazovatele pre rovnaký mikroorganizmus v rôznych biotopoch sa môžu výrazne líšiť. Kandida môže byť napríklad bežne obsiahnutá v určitom množstve v urogenitálnej mikroflóre. V ústnej dutine nie sú normálne obsiahnuté. Prienik kandidov do ústnej dutiny môže naznačovať ich umelý drift z ich prirodzeného prostredia.

Moč, krv, cerebrospinálna tekutina sú biologické médiá, ktoré by mali byť bežne sterilné, to znamená, že by nemali obsahovať žiadnu mikroflóru. Prítomnosť mikroflóry v týchto kvapalinách naznačuje silný zápalový, infekčný proces a tiež naznačuje riziko bakteriémie a sepsy.

Vo všeobecnosti existuje približná klasifikácia. Jednotkou merania v mikrobiológii je KOE / ml, tj počet jednotiek tvoriacich kolónie v 1 mililitroch biologickej tekutiny. Stupeň očkovania je určený počtom CFE a mení sa v širokom rozmedzí od 10 ¹  do 10 ⁹. V súlade s tým 10 ¹  - minimálny počet mikroorganizmov 10 ⁹  - závažné stupňa infekcie. Zároveň sa považuje za normu rozsah až do 10 ³, všetky ukazovatele nad týmto číslom indikujú patologickú reprodukciu baktérií.

Čo sa týka citlivosti na antibiotiká, všetky mikroorganizmy sú rozdelené na stabilné, mierne citlivé, citlivé. Často sa tento výsledok vyjadruje ako kvalitatívna charakteristika s indikáciou MIG - minimálnej inhibičnej dávky antibiotika, ktorá stále inhibuje rast mikroorganizmu. Pre každú osobu, ako pre každý mikroorganizmus, sú tieto ukazovatele striktne individuálne.

[55], [56], [57], [58]

Zariadenie na analýzu

Pri vykonávaní bakteriologických štúdií, najmä s definíciou citlivosti na antibiotiká, nebude jedno zariadenie postačujúce. Je potrebné kompletné vybavenie bakteriologického laboratória. Je potrebné starostlivo plánovať a vybrať zariadenie, ktoré bude zodpovedať každému štádiu výskumu. V štádiu odberu vzoriek biologického materiálu sú na dodanie materiálu do laboratória potrebné sterilné prístroje, boxy, spojky, kontajnery, skladovacie komory a dopravné zariadenia.

Predovšetkým je v laboratóriu potrebný vysokokvalitný mikroskop na mikroskopiu škvŕn. V súčasnosti existuje veľké množstvo mikroskopov, ktoré majú rôzne vlastnosti - od tradičného svetla po fázový kontrast a mikroskop s atómovou silou. Moderné zariadenie vám umožňuje skenovať obraz v trojrozmernom priestore a prezerať ho pri vysokom zväčšení s vysokou presnosťou.

V štádiu výsadby a inkubácie autokláv s mikroorganizmami, sušiarne, exikátory, parné kúpele a odstredivka sa môžu vyžadovať. Termostat je nevyhnutný, pri ktorom prebieha hlavná inkubácia biologického materiálu.

V kroku identifikáciu mikroorganizmov a antibiogramu, Mikromanipulátory môže byť nevyhnutné, hmotnostné spektrometre, spektrofotometre, kolorimetre pre rôzne výpočty a hodnotenie biochemických vlastností kultúr.

Okrem toho môžu byť moderné laboratóriá vybavené špičkovými zariadeniami, ktoré vykonávajú všetky vyššie uvedené hlavné fázy vyšetrovania až do výpočtu výsledkov v automatickom režime. Medzi takéto prístroje patrí napríklad komplexné zariadenie bakteriologického laboratória založené na hmotnostnom spektrometri s časom letu. Tento rad zariadení umožňuje rozdeliť celé laboratórium na tri zóny. Prvá zóna je znečistená, v ktorej je vykonaná analýza, registrácia. Druhá zóna je pracovná zóna, v ktorej v skutočnosti robia základné mikrobiologické štúdie. A tretia zóna - sterilizácia a autokláv, kde sa vykonáva príprava a využitie pracovného materiálu.

Modely umožňujú inkubovať v širokom rozsahu teplôt a podmienok. Vstavaný analyzátor krvi a iných biologických vzoriek obsahuje výsledky s vysokou presnosťou a spoľahlivosťou. Balíček obsahuje elektronické váhy, bidistillyatory, odstredivky, skrine sterilizačné autoklávy, automatické sredovarka vodného kúpeľa s vstavaným miešadlom, pH-metrom, teplomerom a mikroskopy.

Používa sa aj mikrobiologický analyzátor, v ktorom sú položené testovacie vzorky, živné médium, testovacie súpravy na stanovenie citlivosti. Prístroj vykonáva potrebné štúdie a vydáva hotový záver.

Zvyšovanie a zníženie hodnôt

Dekódovanie analýzy môže vykonať iba lekár. Ale často pacienti, ktorí dostali výsledok v ich rukách, panika, si všimli veľké množstvo nepochopiteľných symbolov a postáv. Aby sme sa nestratili, odporúčame mať aspoň všeobecnú predstavu o tom, ako rozlíšiť analýzu citlivosti na antibiotiká. Zvyčajne vo výsledkoch prvá položka naznačuje názov mikroorganizmu, ktorý je pôvodcom ochorenia. Názov je v latinke. Tiež môže byť uvedený zástupca normálnej mikroflóry, ktorá prevažuje v tele, takže sa nemusíte panikať. Druhá položka označuje stupeň výsevu, teda množstvo mikroorganizmu. Obvykle sa toto číslo pohybuje od 10 ¹  do 10 ⁹. Tretia položka označuje formu patogénnosti a štvrtá - názvy antibakteriálnych liečiv, na ktoré je tento mikroorganizmus citlivý. Minimálna inhibičná koncentrácia, pri ktorej je potlačený rast mikroorganizmu, je uvedená ďalej.

[59], [60], [61], [62], [63], [64]