Mikroskopická analýza sputa

Mikroskopické pozorovanie natívnych aj pevných vzoriek farbených spúta umožňuje podrobné skúmanie jeho bunkové štruktúry, a určitej miery odráža povahu patologického procesu v pľúcach a priedušiek, jeho činnosti, aby sa určili rôzne vláknité a kryštalické formácie, majú tiež významnú diagnostickú hodnotu, a nakoniec zhruba posúdiť stav mikrobiálna flóra dýchacieho traktu (bakterioskopia).

Pri mikroskopii použite natívne a maľované prípravky z hlienu. Pre štúdium mikrobiálnej flóry (test), spútum šmuhy sa obvykle zafarbené Romanovský-Giemsa, Gram, a pre detekciu Mycobacterium tuberculosis, ale Ziehl-Nielsen.

Bunkové prvky a elastické vlákna

Bunky, ktoré možno nájsť v spúte pacientov s pneumóniou, diagnostická hodnota sú epitelové bunky, alveolárna makrofágy, biele krvinky a červené krvinky.

Epitelové bunky. Dlaždicového epitelu nemá z úst, nosohltana, hlasiviek a diagnostickú hodnotu epiglottis, a to aj napriek tomu, že detekcia veľkého počtu dlaždicových buniek, zvyčajne označuje vzorka nízku kvalitu slín do laboratória a slín, obsahujúci podstatné nečistoty.

U pacientov s pneumóniou sa spúta považuje za vhodnú na vyšetrenie, ak s mikroskopom s malým nárastom počet epiteliálnych buniek nepresahuje 10 v zornom poli. Väčší počet epiteliálnych buniek indikuje neprijateľnú prevahu v biologickej vzorke obsahu orofaryngu.

Alveolárne makrofágy, ktoré sa v malom množstve nachádzajú aj v akomkoľvek spute, sú veľké bunky retikulohystocytického pôvodu s excentricky umiestneným veľkým jadrom a bohatými inklúziami v cytoplazme. Tieto inklúzie môžu pozostávať z malých prachových častíc (prachových buniek), leukocytov a podobne, ktoré sú absorbované makrofágmi. Počet alveolárnych makrofágov sa zvyšuje so zápalovými procesmi v pľúcnom parenchýme a dýchacích cestách, vrátane pneumónie.

Bunky cylindrického ciliatovaného epitelu sliznice sliznice hrtanu, priedušnice a priedušiek. Vyzerajú ako pretiahnuté bunky, rozšírené na jednom konci, kde sa nachádza jadro a klinček. Články Valcové riasinkami epitelu vo ktorejkoľvek spúte, ale ich zvýšenie indikuje poškodenie bronchiálnej sliznice a priedušnice (akútna a chronická bronchitída, bronchiektázia, priedušnice, laryngitída).

Leukocyty v malom množstve (2-5 v zornom poli) sa nachádzajú v akomkoľvek spute. Pri zápale pľúcneho tkaniva alebo bronchiálnej sliznice a priedušnice, najmä pri hojenie (gangréna, pľúcny absces, bronchiektázia), sa ich počet výrazne zvýši.

Pri farbení prípravkov spúta podľa Romanovského-Giemsy je možné diferencovať jednotlivé leukocyty, ktoré majú niekedy dôležitú diagnostickú hodnotu. Teda, keď je exprimovaný pľúcny zápal alebo zvýšenie bronchiálnej sliznice tkaniva ako celkový počet neutrofilov a počtu degeneratívnych foriem fragmentáciu jadra a zničenie cytoplazmy.

Zvýšenie počtu degeneratívnych foriem leukocytov je najdôležitejším znakom aktivity zápalového procesu a závažnejším priebehom ochorenia.

Erytrocyty. Jediné erytrocyty možno detegovať prakticky a akékoľvek spúta. Výrazný nárast je pozorovaný pri narušení vaskulárnej permeability u pacientov s pneumóniou, s deštrukciou pľúcneho alebo bronchiálneho tkaniva, stagnáciou v malom kruhu obehu, infarktom pľúc atď. Vo veľkom počte červených krviniek v spúte sa zistí počas hemoptýzy akejkoľvek genetiky.

Elastické vlákna. Ďalším prvkom plazmových vlákien spúta, ktoré sa objavujú v hlienu pri zničení pľúcneho tkaniva (pľúcny absces, tuberkulóza, dezintegračný karcinóm pľúc atď.), By sa mali spomenúť. Elastické vlákna sú prezentované v spúte vo forme tenkých dvojvrstvových, zvlnené vlákna s dvojitým delením na koncoch. Vzhľad elastických vlákien v spúte u pacientov so závažnou pneumóniou poukazuje na výskyt jednej z komplikácií ochorenia - abscesu pľúcneho tkaniva. V niektorých prípadoch môžu byť pri tvorbe pľúcneho abscesu detekované elastické vlákna v spúte dokonca o niečo skôr ako zodpovedajúce rádiografické zmeny.

Často, s krupóznou pneumóniou, tuberkulózou, aktinomykózou, fibrínnou bronchitídou v prípravkoch na spúte, sa môžu zistiť tenké fibrínové vlákna.

Známky aktívneho zápalového procesu v pľúcach sú:

1. povaha spúta (mukopurulantná alebo purulentná);
2. zvýšenie počtu neutrofilov v spúte vrátane ich degeneratívnych foriem;
3. zvýšenie počtu alveolárnych makrofágov (z jednotlivých zhlukov viacerých buniek v zornom poli a viac);

Výskyt elastických vlákien v spúte naznačuje deštrukciu pľúcneho tkaniva a tvorbu pľúcneho abscesu.

Záverečné závery o prítomnosti a stupni aktivity zápalu a deštrukcie pľúcneho tkaniva sa tvoria iba vtedy, keď sa porovnávajú s klinickým obrazom ochorenia a výsledkami iných laboratórnych a inštrumentálnych vyšetrovacích metód.

[1], [2], [3], [4], [5]

Mikrobiálna flóra

Spútum ster mikroskopia, Gram-zafarbený, a štúdium mikrobiálnej flóry (bacterioscopy) u niektorých pacientov s pneumóniou približne dovoľuje určiť najpravdepodobnejší pôvodcu pľúcne infekcie. Táto jednoduchá metóda expresnej diagnostiky patogénu nie je dostatočne presná a mala by byť použitá iba v kombinácii s inými (mikrobiologickými, imunologickými) metódami skúšania spúta. Imerzná mikroskopia zafarbených škvŕn je niekedy veľmi užitočná pre núdzový výber a podávanie adekvátnej antibiotickej terapie. Treba však pamätať na možnosť kontaminácie bronchiálneho obsahu mikroflóry horných dýchacích ciest a dutiny ústnej dutiny, zvlášť keď sa zhromažďovanie spúta nesprávne zozbiera.

Preto sa považuje za vhodný na ďalšie vyšetrenie (bakterioskopia a mikrobiologické vyšetrenie) iba vtedy, ak spĺňa tieto podmienky:

• Gramové farbenie v spúte odhaľuje veľké množstvo neutrofilov (v zornom poli je viac ako 25 s malým zväčšením mikroskopu);
• Počet epiteliálnych buniek, charakteristických pre obsah orofaryngu, nepresahuje 10;
• v prípravku prevažuje mikroorganizmy rovnakého morfologického typu.

Pri farbení podľa Grama spúta v nátere niekedy dosť určiť gram pneumokoky, streptokoky, stafylokoky a gram-negatívne baktérie skupinu dobrá -. Klebsiella prútikom Pfeiffer, E. Coli a iných grampozitívne baktérie, v tomto prípade väčšej modrej a Gram - červená.

Bakteriálne patogény pneumónie

Grampozitívne	Gram
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptokoky streptokoky Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Stafilokoky: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiella  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilus influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre spútum ster je najjednoduchší spôsob overenia pneumónie patogénu a má určitú hodnotu pre výber optimálnej liečby antibiotikami. Napríklad pri zisťovaní šmuhy farbené Gram, grompolozhitelnyh diplokokov (pneumokoky) alebo stafylokoky miesto širokospektrálnych antibiotík, ktoré zvyšujú riziko selekcie a množenie mikroorganizmov aitibiotikorezistentnyh možné priradiť cielené terapie, aktívne proti stafylokokom, a pneumokoky. V iných prípadoch, detekcia dominantných flóry v náteroch Gram môže znamenať, pas, že spôsobuje pneumóniu Enterobacteriaceae sú gram-negatívne (Klebsiella, Escherichia coli, atď.), Čo vyžaduje zodpovedajúcu cieľovú cielenú terapiu.

Avšak predbežný záver pravdepodobného pôvodcu pľúcna infekcia mikroskopia môže byť vykonané PAS len na významný nárast baktérií v spúte, v koncentrácii 10 ⁶ - 10 ⁷  mikrobiálnych buniek / ml alebo viac (LL Vishnjakova). Nízke koncentrácie mikroorganizmov (<10 ³  mikrobiálnych buniek / ml) sú charakteristické sprievodné mikroflóry. V prípade, že koncentrácia mikrobiálnych buniek sa pohybuje v rozmedzí od 10 ⁴  do 10 ⁶  mikrobiálnych buniek / ml, to nevylučuje etiologický úlohe tohto mikroorganizmu v výskytu pľúcnych infekcií, ale to dokázať.

Treba tiež pripomenúť, že "atypické" intracelulárne patogény (mykoplazma,  legionella, chlamydia, rickettsia) neznečisťujú Gramm. V týchto prípadoch môže dôjsť k podozreniu na "atypickú" infekciu, ak roztieranie prejaví disociáciu medzi veľkým počtom neutrofilov a extrémne malým počtom mikrobiálnych buniek.

Bohužiaľ, pričom spôsob sa vyznačuje tým, mikroskopie a všeobecne pomerne nízku citlivosť a špecifickosť. Nie je prediktívna hodnota i proti pneumokokov sú dobre vykreslený sotva dosahuje 50%. To znamená, že polovica metóda udáva falošne pozitívne výsledky. Je to spôsobené niekoľkých dôvodov, jedným z nich je skutočnosť, že asi tretina pacientov pred hospitalizáciou sa podávali antibiotiká, čo značne znižuje účinnosť spúta mikroskopicky. Okrem toho, aj v prípade pozitívnych výsledkov štúdie, čo ukazuje na dostatočne vysokú koncentráciu v nátere "typické" bakteriálne patogény (napr. Pneumokokové), nemožno úplne vylúčiť prítomnosť ko-infekcia "atypické" intracelulárnu patogény (Mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

Metóda bakterioskopie štetinových škvŕn, zafarbených Gramom, v niektorých prípadoch pomáha overiť pôvodcovi zápalu pľúc, aj keď má vo všeobecnosti veľmi nízku prediktívnu hodnotu. Atypické intracelulárne patogény (mykoplazma, legionella, chlamydia, rickettsia) nie sú vôbec overené baktérioskopickým spôsobom, pretože neznečisťujú Gramm.

Malo by sa spomenúť možnosť mikroskopickej diagnózy u pacientov s pneumóniou infekcie pľúcnych pľúc. Najviac relevantné pre pacientov dlhodobo liečených širokospektrálnych antibiotík, je detekcia natívny alebo mikroskopie zafarbia spúta Candida albicans v podobe buniek kvasiniek a vetvenia podhubie. Indikujú zmenu mikroflóry tracheobronchiálneho obsahu, ktorá sa vyskytuje pod vplyvom antibiotickej liečby, čo si vyžaduje zásadnú korekciu liečby.

V niektorých prípadoch u pacientov s pneumóniou existuje potreba diferencovať existujúce pľúcne ochorenie s tuberkulózou. Pre tento účel používajú farbu smear Ziehl-Nielsen, ktoré v niektorých prípadoch umožňuje identifikáciu Mycobacterium tuberculosis, ale negatívny výsledok takéhoto vyšetrovania neznamená nedostatok pacientov s TBC. Pri farbení hlienu podľa Tsil-Nielsen je mycobacterium tuberculosis červená farba a všetky ostatné prvky spúta sú modré. Tuberkulózne mykobaktérie majú vzhľad výkalov, rovných alebo mierne zakrivených tyčiniek rôznych dĺžok so samostatným zahusťovaním. Sú umiestnené v prípravku v skupinách alebo samostatne. Diagnostickou hodnotou je detekcia pri príprave dokonca jednej tuberkulózy mykobaktérií.

Na zvýšenie účinnosti mikroskopickej detekcie tuberkulózy mykobaktérií používajte množstvo ďalších metód. Najbežnejšou z nich je tzv flotačné spôsob, v ktorom sa homogenizuje v spúte trepe sa toluén, xylén alebo benzén, ktorý klesá, navarovanie, zachytiť mykobaktérie. Po usadení spúta je horná vrstva pipetovaná na sklíčko. Potom sa liečivo fixuje a zafarbí Tsilyu-Nielsen. Existujú aj iné metódy akumulácie (elektroforéza) a mikroskopia tuberkulóznych baktérií (luminiscenčná mikroskopia).

Mikroskopické vyšetrenie (analýza) hlienu umožňuje zistiť hlien, bunkové prvky, vláknité a kryštalické útvary, huby, baktérie a parazity.

bunky

• Alveolárne makrofágy sú bunky s pôvodom retikulogistocytov. V chronických procesoch av štádiu riešenia akútnych procesov v bronchopulmonárnom systéme sa zisťuje veľké množstvo makrofágov v spúte. Alveolárne makrofágy obsahujúce hemosiderín ("bunky srdcových defektov") sa zisťujú miernym infarktom, krvácaním, stagnáciou v malom kruhu obehu. Makrofágy s lipidovými kvapkami sú znakom obštrukčného procesu v prieduškách a bronchiole.
• Xantomové bunky (mastné makrofágy) sa nachádzajú v abscese, aktinomykóze, echinokokóze pľúc.
• Bunky cylindrického ciliovaného epitelu sú bunky sliznice hrtanu, priedušnice a priedušiek; nachádzajú sa pri bronchitíde, tracheitíde, bronchiálnej astme, zhubných pľúcnych novotvaroch.
• Plochý epitel sa zistí, keď sa do sputa dostane špina, nemá diagnostický význam.
• Leukocyty v jednom alebo inom množstve sú prítomné v akomkoľvek spute. Množstvo neutrofilov je detekované v mukopurulentnom a purulentnom spúte. Bohaté zastúpenie eozinofilov v spúte pri astme, eozinofilná pneumónia, parazitárne pľúcne lézie, infarkt pľúca. Eozinofily sa môžu objaviť v spúte pre tuberkulózu a rakovinu pľúc. Veľké množstvo lymfocytov sa vyskytuje v čiernom kašľu a zriedkavejšie pri tuberkulóze.
• Erytrocyty. Detekcia jednotlivých červených krviniek v spúte nemá diagnostický význam. Ak je v spúte prítomná čerstvá krv, určujú sa nezmenené erytrocyty, ale ak krv, ktorá sa nachádza v dýchacom trakte, dlho zostáva s hlienom, vylúhujú sa červené krvinky.
• Bunky malígnych nádorov sa nachádzajú v malígnych novotvaroch.

vlákna

• Elastické vlákna sa objavujú v rozpadu pľúcneho tkaniva, ktorý je sprevádzaný deštrukciou epiteliálnej vrstvy a uvoľňovaním elastických vlákien; nachádzajú sa v tuberkulóze, abscese, echinokokóze, novotvaroch v pľúcach.
• Koronálne vlákna sa zisťujú pri chronických pľúcnych ochoreniach, ako je kavernózna tuberkulóza.
• Kalcované elastické vlákna sú elastické vlákna impregnované vápenatými soľami. Zisťovanie ich v spúte je charakteristické pre rozpad tuberkulárnej petrititídy.

Špirály, kryštály

• Kurshmanské špirály sa vytvárajú v spastickom stave priedušiek a prítomnosť hlienu v nich. Počas prívalu kašľa sa do lúmenu väčšieho bronchu uvoľní viskózny hlien, ktorý sa skrúca vo špirále. Kurshmanské špirály sa objavujú s bronchiálnou astmou, bronchitídou, pľúcnymi nádormi, stláčaním priedušiek.
• Kryštály Charcot-Leiden sú produktmi rozpadu eozinofilov. Zvyčajne sa vyskytujú v spúte obsahujúcom eozinofily; sú charakteristické pre bronchiálnu astmu, alergické stavy, eozinofilné infiltráty v pľúcach, pľúcne infekcie.
• Kryštály cholesterolu sa objavujú s abscesom, pľúcnou echinokokózou, novotvarmi v pľúcach.
• Kryštály hematoidínu sú charakteristické pre absces a gangrénu pľúc.
• V aktinomykóze pľúc sa zistili kiahne aktinomycete.
• Prvky echinokoka sa objavujú s echinokokózou pľúc.
• Corks Dietrich - kusy žlto-šedej farby s nepríjemnou vôňou. Pozostávajú z detritu, baktérií, mastných kyselín, kvapôčok tuku. Sú typické pre absces pľúc a bronchiektázu.
• Ehrlichov tetrad pozostáva zo štyroch prvkov: kalcifikovaný detritus, kalcifikované elastické vlákna, kryštály cholesterolu a tuberkulóza mykobaktérií. Vyskytuje sa v rozpadu kalcifikovaného primárneho tuberkulárneho zaostrenia.

Mycelium a bukové fungálne bunky sa objavujú v hubových léziách bronchopulmonálneho systému.

Pneumocystis sa vyskytuje pri pneumocystickej pneumónii.

V kokcidioidomykóze pľúc sa zisťujú sféry húb.

Ascaridové larvy sú detegované askarázou.

Larvy čreva ugristického sú identifikované silylloidiázou.

Vajcia pľúcnej chlopne sú označené paragonimózou.

Prvky nachádzajúce sa v spúte pri bronchiálnej astme. Keď je bronchiálna astma zvyčajne oddelená malým množstvom sliznice, viskózneho hlienu. Makroskopicky vidíte Kurshmanovu špirálu. Keď je mikroskopický výskum charakteristický pre prítomnosť eozinofilov, cylindrického epitelu, existujú kryštály Charcot-Leiden.