Krvný test na vírus Epsteina-Barrovej na protilátky a PCR: ako prejsť, normy

Pod pojmom herpes sme zvyknutí chápať nevzhľadné bolestivé pľuzgiere na tvári v oblasti pier, ktoré následne tvoria hnedé kôry. Bohužiaľ, toto je len jedna z tvárí herpes vírusu, ktorý sa u ľudí môže vyskytovať v 8 formách. To, čo zvyčajne nazývame herpes, je vírus typu 1 alebo vírus herpes simplex. Vírus typu 2 spôsobuje genitálny herpes, typu 3 - "ovčie kiahne" a pásový opar, typu 4 - infekčnú mononukleózu a niekoľko ďalších pomerne nebezpečných patológií atď. Tento zoznam môže pokračovať ďalej, ale zameriame sa na herpes vírus typu 4, ktorý sa inak nazýva vírus Epstein-Barrovej. Skúsme zistiť, čo je herpes vírus typu 4, prečo je nebezpečný, kedy a prečo sa vykonáva test na vírus Epstein-Barrovej a čo naznačujú výsledky laboratórnych testov.

Čo je herpesvírus typu 4?

Herpesvírus typu 4, ako jeden z druhov herpesvírusovej infekcie, opísal pred 53 rokmi anglický virológ Michael Epstein. Pri práci na projekte profesorovi pomáhala jeho doktorandka Yvonne Barr. Práve týmto ľuďom vďačí vírus za svoj názov. Avšak 15 rokov po objavení vírusu sa jeho vedecký názov zmenil na ľudský herpesvírus 4 a pred rokom sa vírus nazýval ľudský gamavírus typu 4.

Čo je to vírus Epstein-Barrovej? Tak ako každý iný vírus, aj virión (vírusová častica) herpesvírusu typu 4 pozostáva z genetického materiálu (v tomto prípade dvojvláknovej DNA) a okolitého proteínového obalu (kapsidy). Okrem toho je vírus obklopený membránou, ktorá mu pomáha ľahko preniknúť do buniek hostiteľa.

Akýkoľvek vírus je nebunková forma, ktorá je infekčným faktorom a nemôže sa vyvíjať a reprodukovať mimo buniek živého organizmu. Obľúbeným biotopom herpesvírusu typu 4 sú epitelové bunky nosohltana. Nepohŕdajú ani leukocytmi, uprednostňujú jeden z ich druhov, nazývaný B-lymfocyty. Práve B-bunky sa aktívne podieľajú na zabezpečovaní imunitnej obranyschopnosti tela. Pri kontakte s antigénom, ktorým je v našom prípade herpesvírus typu 4 (alebo skôr jeho antigény), B-lymfocyty produkujú protilátky (imunoglobulínové proteíny). Dajú sa zistiť v krvi pacienta vykonaním analýzy na vírus Epstein-Barrovej (EBV).

Herpesvírus typu 4 má 4 antigény, ktoré sa objavujú v presne definovanom poradí:

• EA je skorý antigén, ktorý sa objavuje v počiatočnom štádiu ochorenia, keď sú vírusové častice v štádiu syntézy (primárna akútna infekcia alebo reaktivácia latentného vírusu pri zníženej imunite),
• VCA je kapsidový antigén, ktorý je obsiahnutý v proteínovom obale a tiež patrí k skorým, pretože klinicky sa ochorenie v tomto období nemusí ani prejaviť,
• MA – membránový antigén, objavuje sa, keď je virión už vytvorený,
• EBNA – nukleárny (polypeptidový alebo jadrový) antigén patrí medzi neskoré antigény, protilátky proti ktorým sa dajú zistiť aj niekoľko mesiacov po ochorení a zostávajú v krvi po celý život.

Herpesvírus typu 4 je veľmi zákerný. Keďže vírus je mimo živého organizmu neaktívny, môže sa ním nakaziť iba od osoby, ktorá je zdrojom infekcie. A vôbec nie je potrebné, aby sa u nej prejavovali všetky príznaky ochorenia; infekcia môže byť latentná, maskovaná ako bežná únava. Napríklad syndróm chronickej únavy je vo väčšine prípadov spojený s vírusom Epstein-Barrovej.

Jednotlivé virióny sa nachádzajú v krvi, slinách, spermiách, vaginálnych sekrétoch a tkanivách rôznych orgánov. Vírusové častice spolu so slinami a krvou môžu vstúpiť do predmetov okolo nás, kde zostanú neaktívne, kým sa nejakým spôsobom nedostanú do ľudského tela. Vo veľkej väčšine prípadov k infekcii dochádza kvapôčkami vo vzduchu alebo kontaktom (bozkávaním). Možný je však aj vnútromaternicový prenos vírusu z matky na plod, infekcia počas transfúzie krvi (ak darcovská krv obsahovala vírusové virióny) a sexuálny kontakt.

Po vniknutí do tela a preniknutí do bunkových štruktúr môže trvať 5 až 50 dní, kým sa choroba prejaví. Môže sa však prejaviť aj inak, prebiehajúc v latentnej forme, ako je to vo väčšine prípadov.

Áno, podľa výskumu približne 90 % dospelej populácie aspoň raz v živote prekonalo herpesovú infekciu súvisiacu s EBV. Väčšina ľudí o tom ani nevie, pretože ich telo je schopné bojovať proti vírusovému útoku. Nie je to však vždy tak.

Ako sa prejavuje vírus Epstein-Barrovej?

Lekári sa vo svojej praxi najčastejšie stretávajú s nasledujúcimi typmi herpesvírusovej infekcie typu 4:

• Chronická forma (vyskytuje sa po akútnej fáze ochorenia, má niektoré všeobecné príznaky zlého zdravotného stavu),
• Latentná alebo skrytá forma (neexistujú žiadne príznaky, ale vírus zostáva aktívny a uvoľňuje sa do životného prostredia),
• Pomalá forma (menej častá, príznaky sa vyskytujú jeden po druhom počas dlhého obdobia a končia smrťou pacienta).

Ľudia sa prvýkrát nakazia vírusom Epstein-Barrovej, predovšetkým v detstve a dospievaní. Vrchol výskytu nastáva medzi 14. a 18. rokom života.

Primárna vírusová infekcia má 3 rôzne formy:

• asymptomatické (bez klinických prejavov),
• respiračné (príznaky infekcie dýchacích ciest: horúčka, výtok z nosa, celková slabosť atď.),
• Infekčná mononukleóza s triádou hlavných príznakov: vysoká teplota, príznaky bolesti hrdla so žltkastými kôrkami na mandliach, zväčšenie orgánov, ako sú pečeň a slezina; dochádza k zvýšeniu hladiny leukocytov a zväčšeniu lymfatických uzlín.

Existuje niekoľko možností, ako sa dostať z akútnej fázy ochorenia:

• úplné uzdravenie,
• príznaky ochorenia miznú, ale vírus zostáva v tele a vyvíja sa, hoci už nevedie k viditeľným zmenám v bunkách (stav nosiča),
• neexistujú žiadne príznaky ochorenia, vírus neopúšťa telo, ale vykazuje aj malú aktivitu (latentná forma),
• reaktivácia vírusu z latentnej formy,
• chronický priebeh infekcie (s relapsmi ochorenia, chronická aktívna forma, generalizovaná s poškodením orgánov a telesných systémov).

Výsledkom dlhodobého pobytu vírusu v tele môže byť:

• Chronická forma infekčnej mononukleózy.
• Hematofagocytárny syndróm: stabilná horúčka, znížený počet krvných zložiek (zvýšená zrážanlivosť krvi), zväčšená pečeň a slezina, krvácanie do slizníc, žltačka (v dôsledku dysfunkcie pečene), zväčšené lymfatické uzliny, neurologické príznaky.
• Latentná forma s rozvojom sekundárnej imunodeficiencie: dlhodobá hypertermia, celková slabosť, zväčšenie a bolesť lymfatických uzlín, bolesti svalov a kĺbov, časté infekčné ochorenia.
• Vývoj autoimunitných patológií vo forme lupus erythematosus, reumatoidnej artritídy atď.
• Prejavy syndrómu chronickej únavy so zhoršením celkovej pohody a výkonnosti.
• Generalizovaná forma chronickej infekcie s poškodením centrálneho nervového systému, srdcového myokardu, obličiek, pečene a pľúc.
• Vývoj onkologických ochorení (lymfocytová leukémia a lymfómy), pri ktorých sa pozoruje patologický nárast počtu buniek lymfatického systému. Herpesvírus typu 4 neničí nosičové bunky, ale núti ich aktívne sa množiť, v dôsledku čoho sa zisťujú neoplazmy z lymfoidného tkaniva.

Ako vidíme, vírus Epstein-Barrovej nie je taký neškodný, ako sa na prvý pohľad zdá, čo znamená, že by sa s ním nemalo zaobchádzať nedbalo. Navyše, herpes vírus typu 4 sa vyznačuje častými epizódami vírusonosičstva a latentnou formou, nehovoriac o rôznych formách chronickej infekcie, keď človek zostáva zdrojom infekcie bez toho, aby o tom tušil.

V tomto prípade je možné prítomnosť infekčného agensu v tele určiť iba pomocou špeciálnej analýzy vírusu Epstein-Barrovej, ktorého biomateriálom je zvyčajne krv.

Indikácie postupu Test na vírus Epstein-Barrovej.

Keďže infekciu herpesvírusom typu 4 niekedy nie je také ľahké odhaliť, nie je vždy podozrivá. Existujú však určité príznaky, podľa ktorých môže lekár podozrievať prítomnosť vírusu v tele:

• silne oslabený imunitný systém (riziková skupina sú pacienti s HIV infekciou a AIDS, pacienti po transplantácii orgánov alebo chemoterapii),
• zväčšenie regionálnych lymfatických uzlín v brade a okcipitálnej oblasti hlavy a ich bolestivosť, najmä ak sa to pozoruje po transfúzii krvi alebo transplantácii orgánov od darcu.
• akútna respiračná vírusová infekcia (ARVI), ktorá sa vyskytuje na pozadí veľmi vysokých teplôt (38-40 stupňov),
• výskyt príznakov infekčnej mononukleózy, ktorá sa najčastejšie vyskytuje pod vplyvom vírusu Epstein-Barrovej.

Aj keď osoba nemá vyššie uvedené príznaky, špecialista môže mať podozrenie na základe niektorých výsledkov bežných testov (všeobecný krvný test a biochémia), ako aj na základe štúdií imunitného stavu.

Kompletný krvný obraz na vírus Epstein-Barrovej môže ukázať:

• zvýšenie počtu lymfocytov,
• nízky hemoglobín, čo naznačuje zníženie hladiny červených krviniek,
• zvýšená zrážanlivosť krvi v dôsledku veľkého počtu krvných doštičiek,
• výskyt virocytov (atypických lymfocytov podobných štruktúre ako monocyty).

Biochemický krvný test, ktorý poskytuje informácie o stave vnútorných orgánov, ukáže zmeny vo fungovaní pečene a sleziny.

Imunotest na EBV môže preukázať zmenu v počte špecifických lymfocytov, rozdiel v počte imunoglobulínov rôznych tried (dysimunoglobulinémia) a nedostatok imunoglobulínu G, čo naznačuje slabý imunitný systém a jeho neschopnosť zastaviť nápor vírusu.

Takéto výsledky nešpecifických analýz môžu lekárov upozorniť, ale stále nie je možné presne povedať, s čím majú do činenia. Všetko zostane v štádiu predpokladov a predbežnej diagnózy. Vo väčšine prípadov lekári podozrievajú latentnú formu infekčnej mononukleózy, hoci sa iné vírusové patológie (chrípka, hepatitída atď.) môžu prejaviť rovnakým spôsobom.

Vzhľadom na vysoký výskyt hepatitídy 4. typu a možnosť jej prenosu z matky na dieťa bude test na vírus Epstein-Barr užitočný aj pri plánovaní tehotenstva. Ak matka už predtým prekonala infekciu, jej telo si proti nej vyvinulo protilátky. Reinfekcia je zvyčajne vylúčená vďaka vytvoreniu silnej imunity a ak k nej dôjde, nebude mať už také následky, aké sú možné pri prvom stretnutí s vírusom. Imunita bude počas celého života obmedzovať aktivitu vírusu, hoci samotný vírus zostane v tele, podobne ako ktorýkoľvek z herpes vírusov.

Ak sa nastávajúca matka počas tehotenstva nakazí vírusom herpesu, môže to viesť k potratom a predčasným pôrodom alebo vírus negatívne ovplyvní vnútromaternicový vývoj dieťaťa.

Onkológ môže nariadiť EBV test, ak existuje podozrenie na Burkettov lymfóm alebo na diagnostiku nádorových procesov u ľudí s HIV. Terapeut môže tento test použiť na diagnostiku herpes infekcií (diferenciálna diagnostika na určenie typu vírusu). Niekedy sa test používa aj na posúdenie účinnosti liečby.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Príprava

V závislosti od typu výskumu môže byť biomateriálom krv, sliny, moč, spútum, vzorka plodovej vody, škrabanie z krčka maternice alebo močovej trubice, mozgovomiechový mok (CSF). Najčastejšie sa lekári uchyľujú k krvným testom, ktoré sa považujú za najinformatívnejšie.

Je zrejmé, že niektoré faktory môžu negatívne ovplyvniť kvalitu a množstvo biomateriálu, preto sa oplatí deň predtým dodržiavať určité pravidlá:

• Akékoľvek testy (najmä krvné testy) sa odporúčajú robiť ráno na lačný žalúdok. Posledné jedlo by malo byť najneskôr 12 hodín pred odberom krvi, preto je lepšie piť na večeru vodu.
• Za najprijateľnejší materiál na analýzu vírusu Epstein-Barr sa považuje venózna krv a pred darovaním krvi zo žily sa vždy odporúča 15-minútový odpočinok, ak osoba práve prišla do laboratória,
• Aby odber krvi prebehol bez následkov a výsledky testov boli spoľahlivé, neodporúča sa vykonávať aktívnu fyzickú prácu alebo športovať, piť alkohol ani fajčiť do 12 hodín pred zákrokom.
• Výsledky testov môžu byť ovplyvnené aj liekmi, ktoré užívate. Lieky by ste mali prestať užívať aspoň 2 dni pred testom. Ak to nie je možné, musíte o liekoch, ktoré užívate, informovať laboratórnu sestru.
• Počas tehotenstva sa pred testovaním na EBV vykonáva test na toxoplazmózu, aby sa vylúčila falošne pozitívna reakcia.
• Ak sa u dieťaťa mladšieho ako 5 rokov robí krvný test na vírus Epstein-Barrovej, pol hodiny pred zákrokom by sa malo dieťaťu dať vypiť veľa prevarenej vody v relatívne malých porciách.

Ak sa na analýzu odoberie iný biomateriál, musíte si so svojím lekárom vopred objasniť všetky nuansy prípravy na analýzu v závislosti od použitého materiálu.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Technika Test na vírus Epstein-Barrovej.

Lekári pripisujú dôležitú úlohu v diagnostike herpes typu 4 a infekčnej mononukleózy špecifickým testom, ktoré pomáhajú identifikovať DNA vírusu alebo jedinečné protilátky v biomateriáli pacienta. Medzi hlavné typy laboratórnych testov používaných na detekciu vírusu Epstein-Barrovej v ľudskom tele patrí enzýmovo-imunoanalýza (ELISA) a PCR diagnostika. Pozrime sa bližšie na podstatu oboch metód a vlastnosti ich implementácie.

EBV enzýmový imunotest

ELISA je štúdia (analýza) venóznej krvi pacientov na protilátky proti vírusu Epstein-Barrovej. Výsledkom diagnostiky je, že v krvi pacientov s EBV sa detegujú imunoglobulíny typu IgG alebo IgM (celkovo ich existuje 5 typov) proti jednému z 3 antigénov vírusu (skorý, kapsidový alebo jadrový).

Analýza sa vykonáva v imunologickom laboratóriu, kde sa pacientovi z žily odoberie približne 10 ml krvi. Biomateriál sa potom nechá štvrť hodiny pri izbovej teplote, počas ktorej sa krv zráža. Zrazenina sa opatrne oddelí od tekutej časti. Tekutina sa centrifuguje a získa sa čisté krvné sérum. To sa podrobí ďalšiemu vyšetreniu.

Myšlienka metódy vznikla na základe údajov, že naše telo produkuje špecifické protilátky proti každému typu vírusu a baktérie, ktoré prenikajú do tela zvonku. Telo ich rozpozná ako cudzie a zničí ich pomocou jedinečných protilátok, ktoré pevne priľnú k antigénu.

Podstata ELISA analýzy je založená na tejto reakcii. Protilátky s pripojenými značkami sa kombinujú s antigénmi. Na značky sa aplikuje látka, ktorá pri reakcii so špeciálnym enzýmom mení farbu vzorky. Čím viac takýchto „reťazcov“, tým intenzívnejšia je farba biomateriálu.

Enzýmový imunotest sa môže vykonať tromi metódami:

• Priama ELISA. Testovacia tekutina sa umiestni do jamiek a nechá sa približne pol hodiny, aby sa antigény mohli prichytiť na steny jamiek. K adsorbovaným antigénom sa pridá tekutina so značenými protilátkami. Po uplynutí požadovaného času (od pol hodiny do 5 hodín), keď sa protilátky detegujú a naviažu na antigény, sa tekutina scedí, jamky sa starostlivo umyjú a pridá sa do nich enzým. Koncentrácia vírusu v jednotke krvi sa stanoví pomocou kolorizačnej metódy.
• Nepriama ELISA. Pri tejto metóde sa testované krvné sérum a značené protilátky pridajú k antigénom sorbovaným na povrchu jamiek. Výsledkom sú 2 typy väzov, z ktorých niektoré sú značené. Výsledok závisí od koncentrácie antigénov v testovanej vzorke. Čím viac neznačených protilátok, tým menej zlúčenín značených enzýmom.

Ďalej sa do premytej kompozície pridá špeciálne činidlo, ktoré sa používa na stanovenie enzymatickej aktivity komplexov antigén-protilátka.

• „Sendvič“. Od nepriamej metódy sa líši tým, že spočiatku sa na povrchu nesorbujú antigény, ale protilátky. K nim sa pridá roztok obsahujúci študované antigény. Po premytí nosiča sa pridajú protilátky s enzymatickými značkami. Prebytočné protilátky sa opäť odstránia a pomocou peroxidu vodíka sa získa farebná látka, ktorá sa študuje spektrometrickou metódou.

Tento typ analýzy umožňuje nielen identifikovať špecifické protilátky a určiť koncentráciu antigénov, ale aj objasniť štádium ochorenia. Faktom je, že rôzne antigény vírusu Epstein-Barr sa objavujú v rôznych štádiách herpetickej infekcie, čo znamená, že protilátky proti nim sa produkujú v určitom období ochorenia.

Protilátky IgG proti skorému antigénu (IgG EA) sa teda v krvi objavujú 1 – 2 týždne po infekcii, keď je ochorenie v akútnom štádiu alebo v štádiu reaktivácie vírusu. Imunoglobulíny tohto typu miznú po 3 – 6 mesiacoch. Pri chronickom priebehu vírusovej infekcie sú takéto protilátky obzvlášť početné a pri atypickej forme úplne chýbajú.

Protilátky IgG proti kapsidovému antigénu (IgG VCA) sa tiež objavujú skoro, počas prvých 4 týždňov ochorenia, ale ich najväčší počet je určený druhým mesiacom infekcie. V akútnej fáze sa nachádzajú u väčšiny pacientov, ale nemusia sa objaviť u detí. Pri chronickom priebehu ochorenia, najmä počas období reaktivácie vírusu, je množstvo IgG VCA obzvlášť vysoké. Tieto protilátky zostávajú v ľudskej krvi navždy, rovnako ako samotný vírus, čo naznačuje vytvorenú imunitu voči infekčnému agensu.

Protilátky IgM proti kapsidovému antigénu (IgM VCA) sa môžu objaviť ešte pred prvými príznakmi ochorenia. Ich koncentrácia (titer) je obzvlášť vysoká v prvých 6 týždňoch ochorenia. Tento typ protilátok je charakteristický pre akútnu infekciu a reaktiváciu chronickej infekcie. IgM VCA vymiznú po 1-6 mesiacoch.

Protilátky IgG proti jadrovému génu (IgG EBNA) môžu naznačovať, že sa osoba predtým priamo stretla s herpetickou infekciou. V akútnej fáze ochorenia sa zisťujú extrémne zriedkavo, zvyčajne sa objavujú počas obdobia zotavenia (v 3. – 10. mesiaci). V krvi sa dajú zistiť aj niekoľko rokov po infekcii.

Detekcia jednotlivých antigénov neposkytuje úplný obraz ochorenia, preto by sa testy na rôzne protilátky mali vykonávať spoločne. Napríklad, ak je prítomný iba IgM VCA a IgG EBNA nie je detekovaný, ide o primárnu infekciu.

Enzymový imunotest bohužiaľ často nestačí na zistenie primárnej herpetickej infekcie alebo vrodenej patológie. V druhom prípade sa protilátky nemusia vôbec zistiť. Ako potvrdzujúci test na primárne ochorenie sa používa molekulárna štúdia krvi alebo iného biologického materiálu na vírus Epstein-Barrovej.

Analýza PRC na vírus Epstein-Barrovej

Táto analýza sa vykonáva v štádiu akútnej primárnej infekcie, inak bude jej výsledok nesprávny.

Podstata metódy PCR (polydimenzionálna reťazová reakcia) spočíva v tom, že každý infekčný agens má svoju vlastnú sadu génov obsiahnutých v molekule DNA. DNA patogénu je obsiahnutá v biomateriáli odobratom na výskum v malých množstvách (samotné vírusy majú mikroskopickú veľkosť), takže je veľmi ťažké situáciu posúdiť. Ak sa však vykoná špecifická reakcia, množstvo genetického materiálu sa výrazne zvýši, čo umožní pomenovať patogén.

Pomocou jednorazových nástrojov sa odoberá materiál na molekulárny výskum, ktorý sa potom umiestni do špeciálneho zariadenia na analýzu. Zariadenie je termostat so špeciálnym programom - termocyklérom alebo zosilňovačom. Zariadenie spustí celý cyklus PRC niekoľko desiatok krát (približne 2-3 minúty), ktorý má 3 fázy:

• Denaturácia (pri teplote 95 stupňov sa oddelia vlákna DNA).
• Žíhanie (pri teplote 75 stupňov sa do študovaného materiálu zavádzajú špeciálne pripravené „priméry“ pre EBV, ktoré sa viažu na DNA vírusu).
• Rozšírenie alebo rozmnoženie genetického materiálu (do semena sa pri teplote 72 stupňov pridá špeciálny enzým, ktorý znovu vytvorí nový reťazec DNA, čím sa zdvojnásobí množstvo genetického materiálu).

Ak sa celý cyklus polydimenzionálnej reakcie spustí 50-krát, množstvo materiálu sa zvýši 100-krát. To znamená, že bude oveľa jednoduchšie identifikovať patogén.

Test na vírus Epstein-Barrovej u dieťaťa

Ako už vieme, vírus Epstein-Barrovej môže spôsobiť rozvoj mnohých ochorení. Po vstupe do ľudského tela zostáva jeho trvalým obyvateľom a iba dobre koordinovaná práca imunitného systému mu neumožňuje aktívne parazitovať vo vnútri buniek.

Takmer 95 % dospelej svetovej populácie žije s EBV v tele a väčšina z nich sa s vírusom zoznámila už v ranom detstve. Niektorí ho zdedili po matke, iní sa vírusom nakazili od rodičov a príbuzných, ktorí sa k dieťaťu ponáhľali s bozkami, alebo kvapôčkami vo vzduchu v materskej škole či škole (infekčné choroby tam zvyčajne nadobúdajú „univerzálne“ rozmery).

Malé deti majú vo všeobecnosti tendenciu dávať si všetko do úst a najväčší počet viriónov sa nachádza v slinách. A ak niekoľko detí olizuje tú istú hračku v materskej škole, zatiaľ čo sú učiteľky zaneprázdnené svojimi vlastnými záležitosťami, potom neprekvapuje, že sa vírus tak aktívne šíri vo veľkých skupinách detí.

EBV možno pokojne nazvať chorobou detí a mládeže, pretože v období dospievania už polovica detí má vírus v tele (a do 30 rokov asi 90 % dospelých). Deti v rôznom veku ochorejú vlastným spôsobom. Do jedného roka, kým dieťa aktívne nekomunikuje s ľuďmi, je pravdepodobnosť, že ochorie, malá. Dieťa staršie ako rok, aj keď nechodilo do škôlky, sa stáva spoločenskejším, hrá sa s rovesníkmi na ulici, aktívne nakupuje s mamou atď. a pravdepodobnosť nákazy vírusom sa výrazne zvyšuje.

To však nie je dôvod na to, aby ste dieťa zavreli do 4 stien. Vo veku 1-3 rokov choroba vo veľkej väčšine prípadov prebieha bez akýchkoľvek príznakov, s výnimkou snáď mierneho zvýšenia teploty a miernej nádchy, ktorá pripomína prechladnutie. Ukazuje sa, že čím skôr sa dieťa zoznámi s vírusom, tým ľahšie takéto zoznámenie prebieha.

Nie je dobré, ak dieťa ochorie bez výskytu protilátok IgG VCA v krvi, čo môže naznačovať, že imunita voči vírusu nebola vytvorená a reaktivácia vírusu je možná hneď, ako imunitný systém oslabí. Dôvodom je s najväčšou pravdepodobnosťou nedokonalosť imunitného systému malých detí, ktorý sa formuje už niekoľko rokov.

Školský život poskytuje ešte viac predpokladov pre vznik ochorenia, najmä v dospievaní, keď sa mladí ľudia aktívne bozkávajú. U detí starších ako 3 roky je však ochorenie menej často asymptomatické. Vo väčšine prípadov sa lekári stretávajú s infekčnou mononukleózou s jej charakteristickými príznakmi.

Napriek tomu, že patológia môže mať dlhý priebeh (približne 2 mesiace), nie je taká nebezpečná a nevyžaduje si užívanie závažných liekov. Lekári predpisujú protizápalové a antivírusové lieky, ak sa pripojí bakteriálna infekcia, vyhľadajú pomoc od antibiotík. Mimochodom, penicilíny sa v tomto prípade neodporúčajú, pretože môžu vyvolať výskyt kožnej vyrážky.

Nemyslite si, že ak dieťa alebo dospievajúci dostane infekčnú mononukleózu, znamená to, že sa v ich tele usadil vírus Epstein-Barrovej. Toto ochorenie má aj iné menej bežné patogény, ako je cytomegalovírus (herpesvírus typu 5). Aby lekári pochopili, s čím majú do činenia, predpisujú test na vírus Epstein-Barrovej a v prípade potreby aj ďalšie laboratórne testy.

Je tiež pravda, že infekčná mononukleóza nie je jediným prejavom EBV v detstve. S týmto patogénom sú spojené aj iné ochorenia, ale v našom regióne sú zriedkavé.

Burkittov lymfóm (ktorému EBV vďačí za svoju detekciu) sa teda vyskytuje hlavne u detí v afrických krajinách, veľmi zriedkavo v Amerike a ešte zriedkavejšie v Európe (a to len na pozadí AIDS). U detí vo veku 3-8 rokov sa vyskytuje nádor čeľuste s poškodením lymfatických uzlín, obličiek a iných orgánov.

Rakovina nosohltanu, významný podiel iných lymfómov, chlpatá leukoplakia úst - to všetko sú prejavy EBV na pozadí výrazne zníženej imunity, ktorá sa vyskytuje pri HIV infekcii a jej neskoršom štádiu AIDS.

Vrodená imunodeficiencia a pridanie vírusu Epstein-Barrovej je nebezpečná zmes, ktorá môže viesť k rozvoju proliferatívneho syndrómu u dieťaťa. V tomto prípade zvýšenie počtu B-lymfocytov vedie k vzniku granúl v mnohých orgánoch, čo bráni ich normálnemu fungovaniu. Ide o ochorenie s vysokou úmrtnosťou, ale nevyvíja sa na pozadí normálnej imunity.

Dá sa povedať, že v detstve je vírus Epstein-Barrovej nebezpečný najmä v prípadoch imunodeficiencie v dôsledku vzniku rôznych komplikácií. Vo väčšine prípadov sa všetko obmedzuje na infekčnú mononukleózu. A hoci si nevyžaduje špeciálnu liečbu, lekári stále uprednostňujú určenie povahy patogénu, na čo je dieťaťu predpísaný všeobecný krvný test, enzýmový imunotest a PCR.

Keďže v detstve dochádza hlavne k primárnej infekcii, je celkom možné obmedziť sa iba na kompletný krvný obraz a PCR, čo je pri prvom zistení ochorenia dosť informatívne.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Normálny výkon

Výsledky PCR analýzy sa spracúvajú elektroforézou alebo pomocou značených „primerov“. V druhom prípade stačí jednoducho pridať činidlo (chromogén) a farebne určiť, či sa vo vzorke nachádzajú virióny. Pozitívny výsledok elektroforézy je indikovaný, keď sa v skúmanej vzorke zistia vlákna DNA rôznych dĺžok.

Počas inkubačného obdobia ochorenia a asymptomatického nosičstva vírusu bude PCR dávať negatívny výsledok, rovnako ako v prípade absolútnej absencie vírusu v tele. Na začiatku vývoja primárnej infekcie a v jej skorých štádiách môže PCR v reálnom čase dávať pozitívne aj negatívne výsledky, čo situáciu nijako neobjasňuje.

Avšak uprostred ochorenia (akútna fáza), v jeho chronickom priebehu alebo reaktivácii vírusu (exacerbácia) a v prípade atypických foriem bude analýza pozitívna. Ak je človek chorý dlhší čas a vírus v jeho tele je v neaktívnom stave, PCR analýza poskytne negatívny výsledok, t. j. vykonávanie tejto analýzy počas tohto obdobia je tiež nevhodné, rovnako ako v príliš skorých štádiách ochorenia.

Treba povedať, že presné výsledky tohto typu laboratórneho výskumu sú možné iba v prípade primárnej infekcie a absencie viriónov iných vírusov.

Teraz, čo sa týka enzýmového imunotestu na vírus Epstein-Barrovej. Má rovnaké požiadavky. Prítomnosť herpes vírusu typu 5 alebo 6, toxoplazmózy a HIV infekcie v tele môže skresliť výsledok rovnako ako nedbalý prístup k analýze alebo nízka kvalita použitých činidiel. V tomto prípade môžu byť potrebné ďalšie štúdie s ohľadom na možné patogény.

Normálne výsledky testov, ktoré naznačujú neprítomnosť vírusu v tele, sa považujú za negatívny výsledok všetkých 4 testov: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA a IgG EBNA. Áno, každý test sa vykonáva samostatne, pretože antigény sa objavujú v rôznych obdobiach ochorenia. Niekedy môžu byť predpísané iba jednotlivé testy, ale vo väčšine prípadov je potrebné vykonať všetky 4 testy, ale v rôznych obdobiach ochorenia.

Napríklad počas inkubačného obdobia ochorenia, ako aj pri absencii infekcie, sa v krvi nezistia žiadne zo 4 typov protilátok. Takýto výsledok nemožno považovať za dostatočný, pretože neumožňuje odlíšiť osobu, ktorá prvýkrát ochorela, od zdravej osoby.

Na začiatku vývoja primárneho ochorenia sa v krvi objavujú iba protilátky IgM proti VCA. V skorých štádiách ochorenia sa k nim pridávajú protilátky IgG proti VCA.

Akútne štádium primárnej infekcie prebieha tvorbou troch typov protilátok: IgG VCA, IgM VCA a IgG EA, pričom najväčší počet IgG protilátok sa zisťuje proti kapsidovému antigénu. Rovnaké zloženie protilátok sa udržiava šesť mesiacov po akútnej fáze ochorenia, ale množstvo IgM VCA postupne klesá na nulu.

Šesť mesiacov po ochorení sa v krvi objavujú protilátky IgG proti EBNA, zatiaľ čo imunoglobulíny IgG EA sú čoraz menej a IgM VCA úplne chýbajú.

V chronických prípadoch ochorenia alebo reaktivácie vírusu sa môžu vyskytnúť rôzne indikátory. Najčastejšie sa v krvi nachádzajú všetky 4 typy protilátok. Je však dosť možné, že imunoglobulíny IgM VCA a IgG EBNA sa nezistia.

Komplikácia vírusovej infekcie nádorovými procesmi sa vyskytuje pri absencii protilátok IgM VCA a imunoglobulíny IgG EBNA nie sú vo všetkých prípadoch detegované.

Enzymový imunotest však určuje nielen prítomnosť určitých protilátok, ale aj ich koncentráciu, čo nám umožňuje s väčšou presnosťou posúdiť štádium patológie a jej možné následky. Nie je potrebné tu hovoriť o konkrétnych číslach. Koniec koncov, každé laboratórium vykonáva analýzu jedným z možných spôsobov s použitím rôznych činidiel, takže výsledky analýzy rôznych laboratórií sa môžu v digitálnom formáte líšiť.

Pacientovi sa vyžaduje, aby dostal formulár s uvedením prahových (referenčných) hodnôt. Ak je výsledok pod prahovou hodnotou, považuje sa to za normálny (negatívny) ukazovateľ. Ak je stanovené číslo nad referenčnou hodnotou, všetko naznačuje pozitívny výsledok, čo znamená, že vírus v tele žije. Hodnota stanovenej hodnoty indikuje štádium ochorenia a kolonizáciu tela viriónmi EBV, teda závažnosť patológie.

Ak je ELISA test negatívny, znamená to iba to, že daná osoba v minulosti neprišla do kontaktu s EBV. Nie je však možné s istotou povedať, či je vírus v súčasnosti v tele prítomný. Negatívny výsledok môže byť spôsobený inkubáciou patogénu v tele a asymptomatickým nosičstvom vírusu. Niekedy je potrebné po určitom čase vykonať druhú sériu testov, aby sa zabezpečilo, že telo nie je obývané vírusom.

Ak výsledok testu ELISA na vírus Epstein-Barrovej len mierne prekročí referenčné hodnoty, výsledok sa považuje za otázny. Príčinou je najčastejšie skoré štádium ochorenia alebo prítomnosť viriónov iného vírusu v tele. V takom prípade sa po 2 týždňoch odporúča urobiť opakovaný test na EBV a prípadne aj na iné patogény.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Pokiaľ ide o otázku, ako dlho trvá urobiť test na vírus Epstein-Barrovej a kedy môžete očakávať výsledky, nie sú potrebné žiadne zvláštne ťažkosti. V serióznom, dobre vybavenom laboratóriu budete musieť po odoslaní biomateriálu čakať maximálne 2 dni. V situáciách vyžadujúcich urgentnú analýzu je možné odpoveď získať aj po niekoľkých hodinách.

Test na vírus Epstein-Barrovej by sa mal vykonávať v dôveryhodnom laboratóriu, kde sú k dispozícii kvalitné činidlá aj kvalifikovaní odborníci. Test koniec koncov stojí peniaze (a nie malé, test na jeden typ protilátok stojí asi 150-170 UAH) a nechcel by som dostať falošný výsledok a potom prípadne znova kontaktovať, ale do iného laboratória, na opakovaný test.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]